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金属离子和离子转运蛋白在蚕丝成纤过程中的功能研究

摘要第9-13页
ABSTRACT第13-17页
第一章 文献综述第18-34页
    1.1 家蚕丝腺的结构及功能第18-22页
        1.1.1 后部丝腺与中部丝腺第19页
        1.1.2 前部丝腺第19-20页
        1.1.3 吐丝器及菲氏腺第20-22页
    1.2 丝纤维的结构和性能第22-25页
        1.2.1 丝纤维的结构第22-23页
        1.2.2 丝纤维的性能第23-25页
    1.3 丝纤维形成机制第25-31页
        1.3.1 概述第25页
        1.3.2 氢离子第25-27页
        1.3.3 剪切力和延伸力第27-28页
        1.3.4 金属离子和非金属离子第28-31页
    1.4 丝纤维性能改良研究进展第31-34页
        1.4.1 人工拉丝第31页
        1.4.2 对蚕丝进行处理第31页
        1.4.3 利用家蚕表达蜘蛛丝纤维第31-34页
第二章 引言第34-38页
    2.1 研究背景、目的及意义第34-35页
    2.2 主要研究内容第35-36页
    2.3 技术路线第36-38页
第三章 家蚕吐丝器及菲氏腺的转录组学分析第38-56页
    3.1 材料与方法第38-43页
        3.1.1 实验材料第38-39页
        3.1.2 主要实验试剂和耗材第39页
        3.1.3 主要实验仪器第39页
        3.1.4 实验方法第39-43页
    3.2 结果与分析第43-54页
        3.2.1 用于转录组测序的RNA第44页
        3.2.2 RNA测序原始数据第44-45页
        3.2.3 样品中基因表达统计与分析第45-46页
        3.2.4 吐丝器中基因的功能注释第46-48页
        3.2.5 吐丝器中与丝蛋白纤维化相关的基因第48-50页
        3.2.6 不同发育时期吐丝器的差异基因第50-52页
        3.2.7 吐丝器与菲氏腺的差异基因第52-53页
        3.2.8 菲氏腺特异表达的基因第53-54页
    3.3 总结与讨论第54-56页
第四章 家蚕吐丝器的蛋白质组学分析第56-70页
    4.1 材料与方法第56-60页
        4.1.1 实验材料第56页
        4.1.2 主要的试剂及耗材第56页
        4.1.3 主要的实验仪器第56-57页
        4.1.4 溶液配制第57-58页
        4.1.5 实验方法与步骤第58-60页
    4.2 结果与分析第60-67页
        4.2.1 家蚕吐丝器蛋白的SDS-PAGE电泳分析第60-61页
        4.2.2 家蚕吐丝器的LC-MS/MS分析第61-62页
        4.2.3 家蚕吐丝器中的蛋白分类及高丰度蛋白第62-64页
        4.2.4 家蚕吐丝器中的表皮蛋白第64页
        4.2.5 吐丝器中酶参与的信号通路第64-65页
        4.2.6 五龄第3天和上蔟第1天吐丝器中的差异蛋白第65-66页
        4.2.7 蛋白质组学与转录组学数据关联性分析第66-67页
    4.3 总结与讨论第67-70页
第五章 家蚕内质网型钙离子ATP酶的功能研究第70-94页
    5.1 材料与方法第70-80页
        5.1.1 实验材料第70页
        5.1.2 主要实验试剂和耗材第70-71页
        5.1.3 主要实验仪器第71-72页
        5.1.4 溶液配制第72-74页
        5.1.5 实验方法与步骤第74-80页
    5.2 结果与分析第80-91页
        5.2.1 BmSERCA基因的克隆第80-81页
        5.2.2 生物信息分析第81页
        5.2.3 BmSERCA蛋白胞外区域的原核表达第81页
        5.2.4 重组蛋白的纯化及多克隆抗体制备第81-83页
        5.2.5 BmSERCA基因的表达模式分析第83-84页
        5.2.6 BmSERCA的酶活分析第84页
        5.2.7 免疫荧光第84-86页
        5.2.8 BmSERCA基因的Bac-to-Bac真核表达第86-89页
        5.2.9 BmSERCA基因的功能研究第89-91页
    5.3 总结与讨论第91-94页
第六章 金属离子调控丝蛋白构象及力学性能第94-110页
    6.1 材料与方法第94-99页
        6.1.1 实验材料第94页
        6.1.2 主要的试剂及耗材第94页
        6.1.3 主要的实验仪器第94-95页
        6.1.4 溶液配制第95页
        6.1.5 实验方法第95-99页
    6.2 结果与分析第99-106页
        6.2.1 上蔟期家蚕丝腺不同区段金属元素含量分析第99-100页
        6.2.2 离子转运蛋白基因在上蔟期家蚕丝腺中的表达模式第100页
        6.2.3 金属离子体外诱导再生丝素构象改变第100-101页
        6.2.4 K、Cu离子与丝蛋白构象及丝纤维力学性能的相互关系第101-105页
        6.2.5 Ca离子与丝蛋白构象及丝纤维力学性能的相互关系第105-106页
    6.3 总结与讨论第106-110页
第七章 利用金属离子对蚕丝的力学性能进行改良第110-128页
    7.1 材料与方法第110-118页
        7.1.1 实验材料第110页
        7.1.2 主要实验试剂和耗材第110页
        7.1.3 主要实验仪器第110-111页
        7.1.4 溶液配制第111页
        7.1.5 实验方法与步骤第111-118页
    7.2 结果与分析第118-126页
        7.2.1 转基因载体的构建第118页
        7.2.2 转基因家蚕的获取第118页
        7.2.3 转基因家蚕的分子检测第118-121页
        7.2.4 转基因家蚕茧壳的元素分析第121-122页
        7.2.5 转基因家蚕的经济性状及茧壳茧丝形态第122-123页
        7.2.6 转基因茧丝的二级结构分析第123-125页
        7.2.7 转基因茧丝的力学性能分析第125-126页
    7.3 总结与讨论第126-128页
第八章 综合与结论第128-132页
论文的创新点第132-134页
参考文献第134-154页
附录第154-160页
论文发表与参加课题第160-164页
致谢第164-165页

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