| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 白细胞介素-1 的概述 | 第11-16页 |
| 1.1.1 IL-1 的结构与受体 | 第11-13页 |
| 1.1.2 IL-1 的生物学作用 | 第13-14页 |
| 1.1.3 IL-1 与疾病的关系 | 第14-15页 |
| 1.1.4 IL-1 的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.2 毕赤酵母表达系统 | 第16-19页 |
| 1.2.1 毕赤酵母表达系统的优点 | 第16-17页 |
| 1.2.2 影响外源蛋白在毕赤酵母中的表达因素 | 第17-18页 |
| 1.2.3 毕赤酵母表达系统的应用前景 | 第18-19页 |
| 1.3 蛋白的分离纯化 | 第19-23页 |
| 1.3.1 分离纯化方法 | 第19-20页 |
| 1.3.2 分离纯化的过程 | 第20页 |
| 1.3.3 毕赤酵母表达外源蛋白质的纯化方法 | 第20-21页 |
| 1.3.4 蛋白分离纯化方法的应用与展望 | 第21-23页 |
| 第二章 rhIL-1β 的工程菌构建、筛选和鉴定 | 第23-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 主要试剂及培养基的配制 | 第24-28页 |
| 2.1.5 实验方法 | 第28-34页 |
| 2.2 结果 | 第34-37页 |
| 2.2.1 rhIL-1β 表达质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.2 rhIL-1β 转化子验证及重组蛋白表达 | 第35-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 rhIL-1β 的 3L规模发酵条件优化及分离纯化 | 第39-51页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39-43页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.2 实验设备 | 第39-40页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第40页 |
| 3.1.4 主要试剂及培养基的配制 | 第40-41页 |
| 3.1.5 实验方法 | 第41-43页 |
| 3.2 实验结果 | 第43-47页 |
| 3.2.1 rhIL-1β 工程菌的 3L规模发酵工艺的优化 | 第43-45页 |
| 3.2.2 rhIL-1β 的分离纯化 | 第45-47页 |
| 3.3 讨论 | 第47-51页 |
| 第四章 rhIL-1β 的生物学活性检测 | 第51-57页 |
| 4.1 材料与方法 | 第51-54页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第51页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第51-52页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第52页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第52-53页 |
| 4.1.5 实验方法 | 第53-54页 |
| 4.2 实验结果 | 第54-55页 |
| 4.2.1 MTT检测 | 第54页 |
| 4.2.2 Hoechst33258染色 | 第54-55页 |
| 4.3 讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目及已发表的论文 | 第71-72页 |
