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单精子胞质内注射转基因法(ICSI-MGT)生产转Fat-1基因兔的初步研究

摘要第4-9页
ABSTRACT第9-14页
第一章 精子载体介导转基因法及n-3 PUFAs的研究进展第19-44页
    前言第19-20页
    1. 精子载体法转基因研究进展第20-37页
        1.1 精子载体法转基因研究简史第20-22页
        1.2 精子介导转基因中的精子特性第22-23页
        1.3 精子介导转基因法方式的演变第23-28页
        1.4 精子载体法转基因分子机制第28-32页
        1.5 外源DNA/精子相互作用方式的发展第32-34页
        1.6 精子载体法应用前景第34-35页
        1.7 转基因兔模型的研究及应用第35-37页
    2 多不饱和脂肪酸的研究进展与转基因工程研究第37-43页
        2.1 多不饱和脂肪酸分类与细胞膜功能第37-38页
        2.2 n-3 PUFAs脂肪酸的功能第38-39页
        2.3 n-6/n-3 PUFAs的比例与健康第39页
        2.4 n-3 PUFAs的合成代谢第39-41页
        2.5 n-3 PUFAs的转基因工程技术的研究进展第41-43页
    3 研究前景及本课题的意义第43-44页
第二章 兔精子处理方法对ICSI-MGT转基因效率的影响第44-61页
    摘要第44-45页
    前言第45页
    1 材料与方法第45-50页
        1.1 材料与试剂第45页
        1.2 仪器与设备第45-46页
        1.3 主要溶液的配制第46页
        1.4 实验方法第46-50页
        1.5 试验设计第50页
        1.6 统计分析第50页
    2 结果第50-58页
        2.1 无抗冻剂液氮长期冻存对精子DNA损伤、ICSI-MGT受精能力及转基因效率的影响第50-54页
        2.2 精子来源对其结合pPGK1/Fat-1-CMV/EGFP质粒效率及转基因效率的影响第54-56页
        2.3 精浆对pPGK1/Fat-1-CMV/EGFP质粒孵育的影响第56-58页
    3 讨论第58-60页
        3.1 无抗冻剂液氮长期冻存对兔精子ICSI-MGT转基因效率的影响第58-59页
        3.2 兔精子不同来源对其转基因效率的影响第59-60页
    4 结论第60-61页
第三章 兔ICSI激活方法与培养对胚胎发育的影响第61-72页
    摘要第61页
    前言第61-62页
    1 材料与方法第62-64页
        1.1 材料与试剂第62页
        1.2 仪器与设备第62页
        1.3 主要溶液的配制第62-63页
        1.4 实验方法第63-64页
        1.5 试验设计第64页
        1.6 统计分析第64页
    2 结果第64-69页
        2.1 不同激活方法对胚胎发育及对胚胎碎裂的影响第64-67页
        2.2 培养液中添加S1P对胚胎培养与发育的影响第67-69页
    3 讨论第69-71页
        3.1 ICSI卵母细胞激活的研究第69-70页
        3.2 碎裂对胚胎发育的影响第70页
        3.3 S1P对碎裂的影响第70-71页
    4 结论第71-72页
第四章 转Fat-1基因兔模型的制备与检测第72-89页
    摘要第72页
    前言第72-73页
    1 材料与方法第73-77页
        1.1 材料与试剂第73页
        1.2 仪器与设备第73页
        1.3 PCR引物及探针第73页
        1.4 实验方法第73-76页
        1.5 试验设计第76-77页
        1.6 统计分析第77页
    2 结果第77-86页
        2.1 质粒浓度对兔ICSI-MGT转基因胚胎生产效率的影响第77-79页
        2.2 质粒线状/环状的不同比例对兔ICSI-MGT转基因胚胎生产效率的影响第79页
        2.3 ICSI-MGT兔胚胎体内发育第79-80页
        2.4 转基因兔的鉴定第80-86页
    3 讨论第86-88页
        3.1 DNA浓度对兔ICSI-MGT转基因胚胎生产效率的影响第86页
        3.2 质粒线状/环状不同比例对兔ICSI-MGT转基因效率的影响第86-87页
        3.3 ICSI-MGT生产转Fat-1基因兔的可行性第87-88页
    4 结论第88-89页
第五章 精子结合外源DNA分子机制的初步研究第89-105页
    摘要第89页
    前言第89-90页
    1 材料与方法第90-92页
        1.1 材料与试剂第90页
        1.2 仪器与设备第90-91页
        1.3 实验方法第91-92页
    2 结果第92-102页
        2.1 DBPs蛋白质的鉴定第92-96页
        2.2 IAM38蛋白质的结构与功能预测第96-99页
        2.3 CD4分子在精子细胞内的鉴定及其与转基因效率的关系第99-101页
        2.4 精子结合外源DNA并内化模式图的构建第101-102页
    3 讨论第102-104页
        3.1 与DNA结合的精子蛋白质筛选与鉴定第102-103页
        3.2 CD4分子在精子载体中的作用第103页
        3.3 精子/DNA结合转运模型的模式建立第103-104页
    4 结论第104-105页
参考文献第105-125页
图片第125-128页
附录第128-129页
致谢第129-130页

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