| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩写符号 | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-20页 |
| 1.1 过敏简介 | 第13-14页 |
| 1.1.1 过敏 | 第13页 |
| 1.1.2 过敏的发病机制 | 第13-14页 |
| 1.1.3 过敏原及其分类 | 第14页 |
| 1.2 尘螨过敏 | 第14-15页 |
| 1.2.1 尘螨 | 第14页 |
| 1.2.2 尘螨过敏的防治措施 | 第14-15页 |
| 1.3 乳酸菌 | 第15-17页 |
| 1.3.1 乳酸菌简介 | 第15页 |
| 1.3.2 乳酸菌在过敏防治中的应用 | 第15-17页 |
| 1.4 重组乳酸菌疫苗 | 第17-18页 |
| 1.5 本论文的研究背景和研究内容 | 第18-20页 |
| 1.5.1 立题依据及研究意义 | 第18-19页 |
| 1.5.2 本论文研究的主要内容 | 第19-20页 |
| 第二章 Der p2 在重组乳酸菌中的表达部位对免疫效果的影响 | 第20-41页 |
| 2.1 前言 | 第20页 |
| 2.2 材料与设备 | 第20-24页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.2.2 实验小鼠 | 第20-21页 |
| 2.2.3 主要的材料及相关试剂 | 第21页 |
| 2.2.4 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.2.5 培养基 | 第22页 |
| 2.2.6 相关分子试剂 | 第22-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-33页 |
| 2.3.1 重组质粒pET28a-Der p2 的构建 | 第24-26页 |
| 2.3.2 Der p2 蛋白在大肠杆菌中的诱导表达及纯化 | 第26-27页 |
| 2.3.3 乳酸乳球菌重组质粒pNZ8148-ID的构建 | 第27-29页 |
| 2.3.4 重组质粒pNZ8148-ED和pNZ8148-WD的构建 | 第29页 |
| 2.3.5 Der p2 在重组乳酸乳球菌中的表达与检测 | 第29-30页 |
| 2.3.6 动物模型的构建 | 第30-31页 |
| 2.3.7 小鼠血清及组织的处理 | 第31页 |
| 2.3.8 单细胞悬浮液的分离 | 第31-32页 |
| 2.3.9 检测指标及方法 | 第32页 |
| 2.3.10 统计方法 | 第32-33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-40页 |
| 2.4.1 大肠杆菌表达质粒的构建 | 第33-34页 |
| 2.4.2 Der p2 蛋白的表达及纯化 | 第34页 |
| 2.4.3 乳酸乳球菌表达质粒的构建 | 第34-35页 |
| 2.4.4 Der p2 在重组乳酸乳球菌中的表达与鉴定 | 第35-36页 |
| 2.4.5 重组乳酸菌对小鼠过敏反应的抑制作用 | 第36-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 表达Der p2 衍生物的重组乳酸菌对屋尘螨过敏反应的抑制作用 | 第41-54页 |
| 3.1 前言 | 第41页 |
| 3.2 材料与设备 | 第41-43页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第41页 |
| 3.2.2 实验小鼠 | 第41-42页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第42页 |
| 3.2.4 主要材料及相关试剂 | 第42-43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-47页 |
| 3.3.1 重组质粒pMD19DM的构建 | 第43-45页 |
| 3.3.2 重组大肠杆菌 28DM的构建 | 第45页 |
| 3.3.3 Der p2 衍生物DM的表达与纯化 | 第45页 |
| 3.3.4 Der p2 衍生物DM与T细胞的反应 | 第45页 |
| 3.3.5 Der p2 衍生物DM与特异性IgE的反应 | 第45页 |
| 3.3.6 Der p2 衍生物DM与特异性IgG的反应 | 第45页 |
| 3.3.7 重组质粒pNZ8148-DM的构建 | 第45页 |
| 3.3.8 Der p2 衍生物DM在重组乳酸菌中的表达与鉴定 | 第45-46页 |
| 3.3.9 动物实验的设计 | 第46页 |
| 3.3.10 小鼠血清及组织的分离及处理 | 第46页 |
| 3.3.11 单细胞悬浮液的制备 | 第46页 |
| 3.3.12 检测指标及方法 | 第46页 |
| 3.3.13 统计方法 | 第46-47页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第47-53页 |
| 3.4.1 Der p2 衍生物DM的构建 | 第47页 |
| 3.4.2 重组大肠杆菌 28DM的构建 | 第47-48页 |
| 3.4.3 Der p2 衍生物DM在大肠杆菌中的表达 | 第48页 |
| 3.4.4 Der p2 衍生物DM与特异性IgE的结合反应 | 第48-49页 |
| 3.4.5 Der p2 衍生物DM免疫原性的检测 | 第49页 |
| 3.4.6 乳酸乳球菌表达质粒的构建 | 第49-50页 |
| 3.4.7 Der p2 衍生物DM在重组乳酸菌中的表达与鉴定 | 第50页 |
| 3.4.8 表达Der p2 衍生物DM的重组乳酸菌对小鼠过敏反应的抑制作用 | 第50-53页 |
| 3.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 第四章 表达Der p2 多肽片段的重组乳酸菌对屋尘螨过敏反应的抑制作用 | 第54-67页 |
| 4.1 前言 | 第54页 |
| 4.2 材料与设备 | 第54-56页 |
| 4.2.1 菌株与质粒 | 第54页 |
| 4.2.2 实验小鼠 | 第54-55页 |
| 4.2.3 主要材料及相关试剂 | 第55-56页 |
| 4.2.4 实验设备 | 第56页 |
| 4.3 实验方法 | 第56-60页 |
| 4.3.1 表达Der p2 多肽片段的重组乳酸菌的构建 | 第56-58页 |
| 4.3.2 Der p2 多肽片段在重组乳酸菌中的表达与鉴定 | 第58-59页 |
| 4.3.3 Der p2 多肽片段与T细胞的反应 | 第59页 |
| 4.3.4 Der p2 多肽片段与特异性IgE的反应 | 第59页 |
| 4.3.5 动物实验的设计 | 第59-60页 |
| 4.3.6 小鼠血清及组织的处理 | 第60页 |
| 4.3.7 检测指标及方法 | 第60页 |
| 4.3.8 统计方法 | 第60页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第60-66页 |
| 4.4.1 Der p2 多肽片段与特异性IgE的结合反应 | 第60-61页 |
| 4.4.2 Der p2 多肽片段与T细胞的反应 | 第61-62页 |
| 4.4.3 表达Der p2 多肽片段的重组乳酸菌的构建 | 第62页 |
| 4.4.4 Der p2 多肽片段在重组乳酸菌中的表达与鉴定 | 第62-63页 |
| 4.4.5 表达Der p2 多肽片段的重组乳酸菌对小鼠过敏反应的抑制作用 | 第63-66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 第五章 增强重组乳酸菌抗过敏效果的益生菌的筛选 | 第67-88页 |
| 5.1 前言 | 第67页 |
| 5.2 材料与设备 | 第67-69页 |
| 5.2.1 主要实验材料 | 第67-68页 |
| 5.2.2 主要仪器和设备 | 第68-69页 |
| 5.2.3 实验小鼠 | 第69页 |
| 5.3 实验方法 | 第69-76页 |
| 5.3.1 乳酸菌悬浮液的制备 | 第69页 |
| 5.3.2 单细胞悬浮液的制备 | 第69-70页 |
| 5.3.3 体外细胞筛选 | 第70页 |
| 5.3.4 动物实验的设计一 | 第70-71页 |
| 5.3.5 小鼠血清及组织的分离及处理 | 第71页 |
| 5.3.6 检测指标的测定及方法 | 第71-73页 |
| 5.3.7 动物实验的设计二 | 第73-74页 |
| 5.3.8 小鼠血清及组织的分离及处理 | 第74-75页 |
| 5.3.9 检测指标的测定及方法 | 第75-76页 |
| 5.3.10 统计方法 | 第76页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第76-86页 |
| 5.4.1 具有抗过敏特性的乳酸菌的筛选及动物实验验证 | 第76-82页 |
| 5.4.2 抗过敏益生菌在抗生素预处理小鼠中对过敏反应的抑制效果 | 第82-86页 |
| 5.5 本章小结 | 第86-88页 |
| 第六章 抗过敏益生菌与重组乳酸菌的协同效果 | 第88-94页 |
| 6.1 前言 | 第88页 |
| 6.2 材料与设备 | 第88-89页 |
| 6.2.1 主要实验材料 | 第88页 |
| 6.2.2 主要仪器和设备 | 第88页 |
| 6.2.3 实验小鼠 | 第88-89页 |
| 6.3 实验方法 | 第89-91页 |
| 6.3.1 乳酸菌悬浮液的制备 | 第89页 |
| 6.3.2 动物模型的构建 | 第89-90页 |
| 6.3.3 小鼠血清和组织的分离及处理 | 第90页 |
| 6.3.4 检测指标及方法 | 第90-91页 |
| 6.3.5 统计方法 | 第91页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第91-93页 |
| 6.4.1 ST218 和重组乳酸菌对特异性抗体表达的影响 | 第91页 |
| 6.4.2 ST218 和重组乳酸菌对Tregs的调节作用 | 第91-92页 |
| 6.4.3 ST218 和重组乳酸菌对肺部炎症反应的影响 | 第92-93页 |
| 6.5 本章小结 | 第93-94页 |
| 主要结论与展望 | 第94-96页 |
| 论文创新点 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-110页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第110页 |
