| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-14页 |
| 1.1 昆虫抗药性的形成与发展 | 第9-12页 |
| 1.1.1 生理生化抗性 | 第9-11页 |
| 1.1.2 行为抗性 | 第11-12页 |
| 1.2 抗药性防治对策 | 第12页 |
| 1.3 果蝇的生物学研究与贡献 | 第12-13页 |
| 1.4 数字基因表达谱升级版(RNA-seq)技术 | 第13-14页 |
| 第二章 对硫磷处理果蝇S2细胞后的细胞毒性检测 | 第14-19页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 供试果蝇细胞 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14页 |
| 2.1.3 主要仪器与耗材 | 第14-15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-16页 |
| 2.2.1 细胞传代培养 | 第15页 |
| 2.2.2 对硫磷诱导果蝇细胞 | 第15页 |
| 2.2.3 倒置显微镜下观察细胞形态变化及细胞凋亡 | 第15页 |
| 2.2.4 细胞毒性检测 | 第15-16页 |
| 2.3 实验结果 | 第16-17页 |
| 2.3.1 倒置显微镜下观察对硫磷处理细胞后的形态变化及细胞凋亡 | 第16-17页 |
| 2.3.2 细胞存活率的测定及筛选 | 第17页 |
| 2.4 讨论 | 第17-19页 |
| 第三章 数字基因表达谱(升级版)检测对硫磷处理果蝇细胞后基因的表达变化及荧光定量验证 | 第19-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第19页 |
| 3.1.1 供试果蝇细胞 | 第19页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 3.2 实验方法 | 第19-24页 |
| 3.2.1 细胞处理 | 第19-20页 |
| 3.2.2 总RNA的提取和纯化 | 第20-21页 |
| 3.2.3 转录组测序 | 第21-22页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR验证 | 第22-24页 |
| 3.3 实验结果 | 第24-39页 |
| 3.3.1 数字基因表达谱(升级版)测定的差异表达的基因 | 第24-37页 |
| 3.3.2 实时荧光定量验证 | 第37-39页 |
| 3.3.3 实时荧光定量测定对硫磷胁迫下Cyp6a8基因表达水平和细胞毒性 | 第39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-43页 |
| 第四章 谷胱甘肽-S-转移酶E6(GSTE6)、气味结合蛋白(Obp99a)基因的过表达与对硫磷抗性的关系 | 第43-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 供试果蝇 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第43-44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-48页 |
| 4.2.1 总RNA的提取、纯化和反转录 | 第44页 |
| 4.2.2 果蝇细胞表达载体的构建 | 第44-46页 |
| 4.2.3 转染细胞 | 第46-48页 |
| 4.2.4 转染后细胞毒性检测 | 第48页 |
| 4.3 实验结果 | 第48-51页 |
| 4.3.1 目的基因的克隆 | 第48页 |
| 4.3.2 转染细胞后GSTE6和Obp99a的表达量变化 | 第48-49页 |
| 4.3.3 对硫磷转染组细胞的抗性分析 | 第49-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-53页 |
| 总结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 在读学位期间的研究成果及发表的学术论文 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
