| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 第1章 绪论 | 第17-37页 |
| 1.1 维生素D概述 | 第17-20页 |
| 1.1.1 维生素D理化性质及生理功能 | 第17-18页 |
| 1.1.2 维生素D在体内的代谢及生物学作用的发挥 | 第18-20页 |
| 1.2 维生素D受体及相关代谢酶与肿瘤 | 第20-23页 |
| 1.2.1 CYP24A1与肿瘤 | 第20-21页 |
| 1.2.2 CYP27B1与肿瘤 | 第21-23页 |
| 1.2.3 VDR与肿瘤 | 第23页 |
| 1.3 维生素D的抗结直肠癌作用 | 第23-30页 |
| 1.3.1 维生素D与结直肠癌发病风险流行病学研究现状 | 第23-25页 |
| 1.3.2 维生素D与结直肠癌临床试验研究现状 | 第25-26页 |
| 1.3.3 维生素D与结肠直肠癌动物实验研究现状 | 第26页 |
| 1.3.4 1,25(OH)_2D_3抗结直肠癌作用机制 | 第26-30页 |
| 1.4 DNA甲基化与维生素D代谢通路基因的表达 | 第30-34页 |
| 1.4.1 甲基化及CpG岛概念 | 第30-31页 |
| 1.4.2 DNA甲基化调控维生素D代谢通路基因的表达 | 第31-32页 |
| 1.4.3 肿瘤细胞DNA甲基化检测技术 | 第32-33页 |
| 1.4.4 维生素D与DNA甲基化 | 第33-34页 |
| 1.5 本课题的研究内容及意义 | 第34-37页 |
| 第2章 材料与方法 | 第37-57页 |
| 2.1 主要材料和仪器 | 第37-42页 |
| 2.1.1 组织及血液标本 | 第37页 |
| 2.1.2 肠癌细胞系来源 | 第37页 |
| 2.1.3 主要试剂及耗材 | 第37-38页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第38-40页 |
| 2.1.5 主要仪器和设备 | 第40-42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-57页 |
| 2.2.1 组织芯片的制作 | 第42页 |
| 2.2.2 免疫组织化学技术 | 第42-44页 |
| 2.2.3 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第44-46页 |
| 2.2.4 实时定量PCR检测肠癌及配对组织中CYP24A1的表达 | 第46-49页 |
| 2.2.5 细胞培养技术 | 第49页 |
| 2.2.6 细胞增殖检测 | 第49-50页 |
| 2.2.7 RNA干扰（RNA interference，RNAi）实验 | 第50-51页 |
| 2.2.8 BSP（bisulfite sequencing PCR）亚硫酸氢盐测序法 | 第51-56页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第56-57页 |
| 第3章 实验结果 | 第57-77页 |
| 3.1 CYP24A1、VDR在结直肠癌中的表达及临床意义 | 第57-68页 |
| 3.1.1 组织芯片合成 | 第57页 |
| 3.1.2 CYP24A1、VDR在正常肠粘膜、腺瘤、结直肠癌中的表达情况 | 第57-59页 |
| 3.1.3 CYP24A1、VDR表达与结直肠癌患者临床病理学指标之间的关系 | 第59-62页 |
| 3.1.4 CYP24A1、VDR表达与结直肠癌患者预后的相关性分析 | 第62-66页 |
| 3.1.5 CYP24A1、VDR表达与血清 25(OH)D_3水平的相关性分析 | 第66-68页 |
| 3.2 CYP24A1异常表达对 1,25(OH)_2D_3抗结直肠癌细胞增殖的影响 | 第68-70页 |
| 3.2.1 1,25(OH)_2D_3抗结直肠癌细胞增殖作用 | 第68-69页 |
| 3.2.2 1,25(OH)_2D_3处理后肠癌细胞中VDR，CYP24A1表达的变化 | 第69页 |
| 3.2.3 干涉CYP24A1表达对 1,25(OH)_2D_3抗结直肠癌细胞增殖的影响 | 第69-70页 |
| 3.3 CYP24A1高表达的表观遗传学调控机制 | 第70-77页 |
| 3.3.1 CYP24A1基因启动子区CpG岛预测及BSP引物设计 | 第70-71页 |
| 3.3.2 结直肠癌细胞系及组织中CYP24A1基因启动子甲基化状态分析 | 第71-74页 |
| 3.3.3 5-氮杂2脱氧胞苷对结直肠癌细胞CYP24A1基因去甲基化作用的研究 | 第74-77页 |
| 第4章 讨论 | 第77-85页 |
| 4.1 组织芯片联合免疫组化技术在结直肠癌研究中的应用价值 | 第77页 |
| 4.2 VDR在腺瘤及结直肠癌中的表达情况及临床意义 | 第77-78页 |
| 4.3 CYP24A1在腺瘤及结直肠癌中的表达情况及临床意义 | 第78-80页 |
| 4.4 结直肠癌患者中血清 25(OH)D_3水平与CYP24A1、VDR表达的相关性 | 第80页 |
| 4.5 干涉CYP24A1基因表达后对 1,25(OH)_2D_3抗肿瘤的影响 | 第80-82页 |
| 4.6 CYP24A1表达的甲基化调控机制研究 | 第82-85页 |
| 第5章 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-103页 |
| 作者简介及在学习期间所取得的科研成果 | 第103-105页 |
| 致谢 | 第105页 |
