摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
英文缩略词 | 第19-21页 |
第1章 绪论 | 第21-35页 |
1.1 人兽共患病概述 | 第21-23页 |
1.2 三种常见人兽共患病病原菌简介 | 第23-25页 |
1.2.1 大肠杆菌O157:H7 | 第23-24页 |
1.2.2 单增李斯特菌 | 第24页 |
1.2.3 布鲁氏菌 | 第24-25页 |
1.3 人兽共患病病原菌检测技术 | 第25-28页 |
1.3.1 传统分离培养鉴定法 | 第26页 |
1.3.2 免疫学检测方法 | 第26-27页 |
1.3.3 分子生物学检测方法 | 第27-28页 |
1.4 卵黄抗体技术及其应用 | 第28-30页 |
1.5 量子点的合成及应用研究 | 第30-31页 |
1.6 免疫磁分离技术 | 第31-32页 |
1.7 研究目的及意义 | 第32-35页 |
第2章 三价卵黄抗体的制备及鉴定 | 第35-63页 |
2.1 实验材料 | 第36-40页 |
2.1.1 主要试剂及试剂盒 | 第36-37页 |
2.1.2 主要器材 | 第37页 |
2.1.3 实验动物及饲养 | 第37-38页 |
2.1.4 菌株 | 第38页 |
2.1.5 主要试剂配制 | 第38-40页 |
2.2 实验方法 | 第40-46页 |
2.2.1 菌株培养 | 第40页 |
2.2.2 三价灭活疫苗的制备 | 第40页 |
2.2.3 蛋鸡免疫 | 第40页 |
2.2.4 IgY的分离提取 | 第40-41页 |
2.2.5 间接ELISA方法的建立 | 第41-43页 |
2.2.6 血清及IgY抗体效价测定 | 第43-44页 |
2.2.7 三价IgY的蛋白含量测定 | 第44页 |
2.2.8 三价IgY特异性鉴定 | 第44-45页 |
2.2.9 三价IgY的纯度测定 | 第45-46页 |
2.3 结果 | 第46-58页 |
2.3.1 间接ELISA方法的建立结果 | 第46-54页 |
2.3.2 三价血清及IgY血清抗体效价测定结果 | 第54-55页 |
2.3.3 三价IgY的蛋白含量测定结果 | 第55-56页 |
2.3.4 三价IgY特异性测定结果 | 第56-57页 |
2.3.5 三价IgY的纯度测定结果 | 第57-58页 |
2.4 讨论 | 第58-61页 |
2.4.1 免疫方法的选择与控制 | 第58-60页 |
2.4.2 IgY的提取分离方法 | 第60-61页 |
2.5 本章小结 | 第61-63页 |
第3章 兔多克隆抗体的制备及鉴定 | 第63-83页 |
3.1 实验材料 | 第63-64页 |
3.1.1 主要试剂及试剂盒 | 第63-64页 |
3.1.2 主要器材 | 第64页 |
3.1.3 实验动物及饲养 | 第64页 |
3.1.4 菌株 | 第64页 |
3.1.5 主要试剂配制 | 第64页 |
3.2 实验方法 | 第64-66页 |
3.2.1 灭活疫苗的制备 | 第64页 |
3.2.2 新西兰大白兔免疫 | 第64-65页 |
3.2.3 间接ELISA方法的建立 | 第65页 |
3.2.4 血清中多克隆抗体的提取 | 第65-66页 |
3.2.5 兔血清及多克隆抗体效价测定 | 第66页 |
3.2.6 兔多克隆抗体特异性鉴定 | 第66页 |
3.2.7 兔多克隆抗体蛋白含量测定 | 第66页 |
3.2.8 兔多克隆抗体纯度测定 | 第66页 |
3.3 结果 | 第66-78页 |
3.3.1 大肠杆菌O157:H7兔多克隆抗体间接ELISA方法的建立结果 | 第66-70页 |
3.3.2 单增李斯特菌兔多克隆抗体间接ELISA方法的建立结果 | 第70-74页 |
3.3.3 兔血清抗体效价测定结果 | 第74-75页 |
3.3.4 两种兔多克隆抗体特异性测定结果 | 第75-77页 |
3.3.5 两种兔多克隆抗体蛋白含量测定结果 | 第77页 |
3.3.6 两种兔多克隆抗体纯度测定结果 | 第77-78页 |
3.4 讨论 | 第78-82页 |
3.5 本章小结 | 第82-83页 |
第4章 量子点荧光生物探针的制备及表征 | 第83-101页 |
4.1 实验材料 | 第83-85页 |
4.1.1 主要试剂 | 第83-84页 |
4.1.2 主要器材 | 第84页 |
4.1.3 多克隆抗体 | 第84-85页 |
4.2 实验方法 | 第85-88页 |
4.2.1 有机相CdSe/ZnS量子点的合成 | 第85-86页 |
4.2.2 水溶性CdSe/ZnS量子点的合成 | 第86页 |
4.2.3 三种量子点荧光生物探针的制备 | 第86-88页 |
4.3 结果 | 第88-97页 |
4.3.1 绿色荧光CdSe/ZnS量子点的表征 | 第88-90页 |
4.3.2 黄色荧光CdSe/ZnS量子点的表征 | 第90-91页 |
4.3.3 红色荧光CdSe/ZnS量子点的表征 | 第91-93页 |
4.3.4 三种量子点与抗体最佳偶联率测定结果 | 第93-94页 |
4.3.5 三种量子点荧光生物探针红外光谱表征结果 | 第94-96页 |
4.3.6 三种量子点荧光生物探针zeta电位表征结果 | 第96页 |
4.3.7 三种量子点荧光生物探针荧光光谱表征结果 | 第96-97页 |
4.4 讨论 | 第97-98页 |
4.5 本章小结 | 第98-101页 |
第5章 三种人兽共患病病原菌同步快速检测方法的建立及效果评价 | 第101-127页 |
5.1 实验材料 | 第102-103页 |
5.1.1 主要试剂 | 第102页 |
5.1.2 主要器材 | 第102页 |
5.1.3 菌株 | 第102页 |
5.1.4 主要试剂配制 | 第102-103页 |
5.2 实验方法 | 第103-108页 |
5.2.1 免疫磁珠的制备 | 第103页 |
5.2.2 三种病原菌同步检测方法的建立 | 第103-106页 |
5.2.3 三种病原菌同步检测方法的检测效果评价 | 第106-107页 |
5.2.4 模拟样品的检测 | 第107-108页 |
5.3 结果 | 第108-121页 |
5.3.1 磁珠与三价IgY最佳偶联率测定结果 | 第108页 |
5.3.2 免疫磁珠的表征结果 | 第108-110页 |
5.3.3 三种病原菌同步检测方法的建立结果 | 第110-113页 |
5.3.4 三种病原菌同步检测方法的检测效果评价结果 | 第113-117页 |
5.3.5 模拟样的检测结果 | 第117-121页 |
5.4 讨论 | 第121-125页 |
5.4.1 免疫磁珠的制备 | 第122页 |
5.4.2 检测方法的建立及效果评价 | 第122-125页 |
5.5 本章小结 | 第125-127页 |
结论 | 第127-129页 |
附录 | 第129-135页 |
参考文献 | 第135-149页 |
攻读博士学位期间取得的成果 | 第149-151页 |
致谢 | 第151-152页 |