| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献回顾 | 第15-24页 |
| 第一部分 抗PSMA人源性抗体真核表达载体的构建、表达和纯化 | 第24-41页 |
| 1 材料 | 第24-28页 |
| 1.1 细胞系 | 第24页 |
| 1.2 质粒与菌种 | 第24页 |
| 1.3 实验仪器 | 第24-25页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第25-27页 |
| 1.5 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2 方法 | 第28-36页 |
| 2.1 基因合成 | 第28-29页 |
| 2.2 PSMAb真核表达载体的构建 | 第29-32页 |
| 2.3 PSMAb的真核表达 | 第32-33页 |
| 2.4 PSMAb的纯化 | 第33-35页 |
| 2.5 SDS-PAGE和Western blot检测 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-39页 |
| 3.1 pCDNA3真核表达载体的结构 | 第36页 |
| 3.2 PSMAb真核表达载体的构建和鉴定 | 第36-38页 |
| 3.3 PSMAb的表达与纯化 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 第二部分 抗PSMA人源性抗体PSMAb的生物学活性检测 | 第41-54页 |
| 1 材料 | 第41-43页 |
| 1.1 细胞系 | 第41页 |
| 1.2 实验动物 | 第41页 |
| 1.3 实验仪器 | 第41-42页 |
| 1.4 主要试剂的配置 | 第42页 |
| 1.5 实验试剂 | 第42-43页 |
| 2 方法 | 第43-46页 |
| 2.1 细胞培养 | 第43页 |
| 2.2 流式细胞术检测PSMAb与PSMA阳性细胞的结合能力 | 第43页 |
| 2.3 细胞ELISA检测PSMAb的亲和力 | 第43-44页 |
| 2.4 间接免疫荧光染色检测PSMAb的内化活性 | 第44-45页 |
| 2.5 PC3PSMA和PC3L稳转细胞系的建立 | 第45页 |
| 2.6 抗体阻断实验 | 第45-46页 |
| 2.7 动物活体成像检测PSMAb在荷瘤裸鼠体内的分布情况 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-52页 |
| 3.1 流式细胞术检测PSMAb与PSMA阳性细胞的结合能力 | 第46-47页 |
| 3.2 细胞ELISA检测PSMAb的亲和力 | 第47-48页 |
| 3.3 间接免疫荧光染色检测PSMAb的内化活性 | 第48-49页 |
| 3.4 PC3PSMA和PC3L稳转细胞系的流式鉴定 | 第49页 |
| 3.5 抗体阻断实验 | 第49页 |
| 3.6 PSMAb在荷瘤裸鼠体内的定位及分布情况 | 第49-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第三部分 抗体偶联药物的制备和功能检测 | 第54-65页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| 1.1 细胞系 | 第54页 |
| 1.2 实验动物 | 第54页 |
| 1.3 实验仪器 | 第54页 |
| 1.4 试剂配置 | 第54-55页 |
| 1.5 实验试剂 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-57页 |
| 2.1 抗体偶联药物PSMAb-DM1的制备 | 第55页 |
| 2.2 PSMAb-DM1的偶联效率检测 | 第55-56页 |
| 2.3 流式细胞术检测PSMAb-DM1与PSMA阳性细胞的结合能力 | 第56页 |
| 2.4 间接免疫荧光染色检测PSMAb-DM1的内化活性 | 第56页 |
| 2.5 流式细胞术检测PSMAb-DM1诱导PSMA阳性细胞凋亡的能力 | 第56页 |
| 2.6 Alamar Blue测定PSMAb-DM1的IC50浓度 | 第56-57页 |
| 2.7 体内实验检测PSMAb-DM1对PSMA阳性肿瘤生长的抑制 | 第57页 |
| 3 结果 | 第57-63页 |
| 3.1 抗体偶联药物PSMAb-DM1的制备 | 第57页 |
| 3.2 流式细胞术检测PSMAb-DM1与PSMA阳性细胞的结合能力 | 第57-58页 |
| 3.3 间接免疫荧光染色检测PSMAb-DM1的内化活性 | 第58-59页 |
| 3.4 流式细胞术检测PSMAb-DM1诱导PSMA阳性细胞凋亡的能力 | 第59-61页 |
| 3.5 Alamar Blue测定PSMAb-DM1的IC50浓度 | 第61-62页 |
| 3.6 PSMAb-DM1对荷瘤裸鼠体内PSMA阳性肿瘤生长的抑制 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 个人简历和研究成果 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
