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以构建启动子文库的方法筛选新的2,4,6-三硝基甲苯感应元件

中文摘要第3-6页
Abstract第6-7页
英文缩略词表第10-11页
第1章 前言第11-16页
    1.1 2,4,6-三硝基甲苯(TNT)第11-12页
        1.1.1 2,4,6-三硝基甲苯的概述第11页
        1.1.2 2,4,6-三硝基甲苯的危害第11页
        1.1.3 2,4,6-三硝基甲苯的检测第11-12页
    1.2 细菌应激损伤系统第12-13页
        1.2.1 应激损伤系统简介第12页
        1.2.2 大肠杆菌中的SOS应答第12-13页
    1.3 合成生物学的思想第13-15页
    1.4 研究思路及意义第15-16页
第2章 SOS::GFP载体的构建与表达第16-32页
    1 实验材料第16-20页
        1.1 菌种及载体第16页
        1.2 主要试剂第16-17页
        1.3 主要培养基和溶液第17-18页
        1.4 实验仪器第18-20页
    2 实验方法第20-28页
        2.1 大肠杆菌基因组提取与提纯第20-22页
        2.2 应激损伤家族启动元件的PCR扩增第22-27页
        2.3 构建SOS::GFP表达体系第27-28页
        2.4 GFP荧光检测第28页
    3 结果第28-30页
        3.1 大肠杆菌基因组鉴定第28-29页
        3.2 组质粒SOS::GFP的构建及鉴定第29页
        3.3 SOS家族启动元件对不同浓度TNT的应答第29-30页
    4 讨论第30-32页
第3章 生物传感器promoter::GFP文库筛选和研究第32-47页
    1 实验材料第32-34页
        1.1 菌种及载体第32页
        1.2 主要试剂第32-33页
        1.3 主要溶液的配置第33-34页
        1.4 实验仪器第34页
    2 实验方法第34-38页
        2.1 随机突变文库的设计与合成第34-35页
        2.2 构建生物传感器promoter::GFP文库第35-36页
        2.3 E.coli BL21(DE3)感受态的化学转化第36-37页
        2.4 GFP焚光检测第37页
        2.5 TNT对文库筛选办法第37页
        2.6 文库中启动元件的测序第37-38页
        2.7 EC_(200)测定第38页
    3 实验结果第38-45页
        3.1 随机突变启动子文库Mutsos的设计第38-39页
        3.2 启动子文库筛选第39-40页
        3.3 筛选得到启动元件的序列分析第40-41页
        3.4 筛选得到5个启动元件的荧光检测第41-42页
        3.5 特异性研究第42-43页
        3.6 敏感度研究第43-44页
        3.7 时效性研究第44-45页
    4 讨论第45-47页
第4章 新的生物传感元件topAp4的发现第47-59页
    1 实验材料第47-50页
        1.1 菌种及载体第47页
        1.2 主要试剂第47-48页
        1.3 主要培养基及缓冲液配制第48-49页
        1.4 实验仪器第49-50页
    2 实验方法第50-53页
        2.1 随机启动子文库构建第50-52页
        2.2 TNT对随机启动子文库的筛选办法第52页
        2.3 文库中启动元件的测序与分析第52页
        2.4 promoter::GFP载体构建第52-53页
        2.5 荧光检测第53页
        2.6 EC_(200)测定第53页
    3 实验结果第53-57页
        3.1 大肠杆菌K-12 MG1655基因组启动子文库的构建与筛选第53-54页
        3.2 文库序列C12序列分析第54-55页
        3.3 topAp1~topAp5启动子对不同浓度TNT敏感性分析第55-56页
        3.4 topAp4在甲苯衍生化合物中特异性研究第56页
        3.5 时效性研究第56-57页
    4 讨论第57-59页
结论第59-60页
参考文献第60-65页
攻读硕士学位期间发表的学术论文、专利及参加的会议第65-66页
致谢第66页

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