| 中文摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-16页 |
| 1.1 2,4,6-三硝基甲苯(TNT) | 第11-12页 |
| 1.1.1 2,4,6-三硝基甲苯的概述 | 第11页 |
| 1.1.2 2,4,6-三硝基甲苯的危害 | 第11页 |
| 1.1.3 2,4,6-三硝基甲苯的检测 | 第11-12页 |
| 1.2 细菌应激损伤系统 | 第12-13页 |
| 1.2.1 应激损伤系统简介 | 第12页 |
| 1.2.2 大肠杆菌中的SOS应答 | 第12-13页 |
| 1.3 合成生物学的思想 | 第13-15页 |
| 1.4 研究思路及意义 | 第15-16页 |
| 第2章 SOS::GFP载体的构建与表达 | 第16-32页 |
| 1 实验材料 | 第16-20页 |
| 1.1 菌种及载体 | 第16页 |
| 1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 1.3 主要培养基和溶液 | 第17-18页 |
| 1.4 实验仪器 | 第18-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-28页 |
| 2.1 大肠杆菌基因组提取与提纯 | 第20-22页 |
| 2.2 应激损伤家族启动元件的PCR扩增 | 第22-27页 |
| 2.3 构建SOS::GFP表达体系 | 第27-28页 |
| 2.4 GFP荧光检测 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-30页 |
| 3.1 大肠杆菌基因组鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2 组质粒SOS::GFP的构建及鉴定 | 第29页 |
| 3.3 SOS家族启动元件对不同浓度TNT的应答 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 第3章 生物传感器promoter::GFP文库筛选和研究 | 第32-47页 |
| 1 实验材料 | 第32-34页 |
| 1.1 菌种及载体 | 第32页 |
| 1.2 主要试剂 | 第32-33页 |
| 1.3 主要溶液的配置 | 第33-34页 |
| 1.4 实验仪器 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.1 随机突变文库的设计与合成 | 第34-35页 |
| 2.2 构建生物传感器promoter::GFP文库 | 第35-36页 |
| 2.3 E.coli BL21(DE3)感受态的化学转化 | 第36-37页 |
| 2.4 GFP焚光检测 | 第37页 |
| 2.5 TNT对文库筛选办法 | 第37页 |
| 2.6 文库中启动元件的测序 | 第37-38页 |
| 2.7 EC_(200)测定 | 第38页 |
| 3 实验结果 | 第38-45页 |
| 3.1 随机突变启动子文库Mutsos的设计 | 第38-39页 |
| 3.2 启动子文库筛选 | 第39-40页 |
| 3.3 筛选得到启动元件的序列分析 | 第40-41页 |
| 3.4 筛选得到5个启动元件的荧光检测 | 第41-42页 |
| 3.5 特异性研究 | 第42-43页 |
| 3.6 敏感度研究 | 第43-44页 |
| 3.7 时效性研究 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 新的生物传感元件topAp4的发现 | 第47-59页 |
| 1 实验材料 | 第47-50页 |
| 1.1 菌种及载体 | 第47页 |
| 1.2 主要试剂 | 第47-48页 |
| 1.3 主要培养基及缓冲液配制 | 第48-49页 |
| 1.4 实验仪器 | 第49-50页 |
| 2 实验方法 | 第50-53页 |
| 2.1 随机启动子文库构建 | 第50-52页 |
| 2.2 TNT对随机启动子文库的筛选办法 | 第52页 |
| 2.3 文库中启动元件的测序与分析 | 第52页 |
| 2.4 promoter::GFP载体构建 | 第52-53页 |
| 2.5 荧光检测 | 第53页 |
| 2.6 EC_(200)测定 | 第53页 |
| 3 实验结果 | 第53-57页 |
| 3.1 大肠杆菌K-12 MG1655基因组启动子文库的构建与筛选 | 第53-54页 |
| 3.2 文库序列C12序列分析 | 第54-55页 |
| 3.3 topAp1～topAp5启动子对不同浓度TNT敏感性分析 | 第55-56页 |
| 3.4 topAp4在甲苯衍生化合物中特异性研究 | 第56页 |
| 3.5 时效性研究 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文、专利及参加的会议 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
