| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| ·鱼类疫苗研究进展 | 第10-16页 |
| ·鱼类疫苗的分类 | 第10-12页 |
| ·鱼类疫苗的开发方法 | 第12-16页 |
| ·迟缓爱德华氏菌研究进展 | 第16-18页 |
| ·概述 | 第16页 |
| ·致病机理和毒力因子 | 第16-17页 |
| ·疫苗开发 | 第17-18页 |
| ·鞭毛蛋白 | 第18-20页 |
| ·概述 | 第18-19页 |
| ·迟缓爱德华氏菌FliC | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 应用IVIAT技术调取TX01 候选抗原基因 | 第21-37页 |
| ·材料与方法 | 第21-32页 |
| ·TX01 抗血清的制备 | 第22-24页 |
| ·兔抗TX01 抗血清的制备 | 第22页 |
| ·抗血清的处理 | 第22-23页 |
| ·抗血清质量检测 | 第23-24页 |
| ·TX01 原核表达文库的构建 | 第24-27页 |
| ·TX01 基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·TX01 基因组酶切处理 | 第25页 |
| ·原核表达文库的构建 | 第25-27页 |
| ·表达文库质量检测 | 第27页 |
| ·表达文库的保存 | 第27-28页 |
| ·TX01 原核表达文库的免疫筛选 | 第28-30页 |
| ·初筛 | 第28-29页 |
| ·复筛 | 第29页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第29-30页 |
| ·TX01 候选抗原基因的获取 | 第30-32页 |
| ·TX01 染色体步移文库的构建 | 第30页 |
| ·阳性克隆全基因序列的获取 | 第30-32页 |
| ·序列提交 | 第32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-37页 |
| ·兔抗TX01 抗血清的处理效果检测 | 第32-33页 |
| ·表达文库的构建及检测 | 第33-34页 |
| ·表达文库的筛选 | 第34-35页 |
| ·全基因的调取 | 第35-37页 |
| 第三章 亚单位疫苗的构建及免疫效果分析 | 第37-47页 |
| ·材料与方法 | 第37-43页 |
| ·重组蛋白质的原核表达 | 第37-39页 |
| ·重组转化子的获得 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白诱导表达 | 第39页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白质表达形式 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第40页 |
| ·重组蛋白质的纯化 | 第40-41页 |
| ·保持活性方式纯化蛋白 | 第40-41页 |
| ·变性方式纯化蛋白 | 第41页 |
| ·亚单位疫苗的免疫保护效应分析 | 第41-43页 |
| ·实验牙鲆的免疫 | 第41-42页 |
| ·TX01 攻毒实验 | 第42页 |
| ·免疫保护效应的评价 | 第42-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-47页 |
| ·重组亚单位疫苗的原核表达 | 第43页 |
| ·重组亚单位疫苗的纯化 | 第43-44页 |
| ·重组亚单位疫苗免疫效果 | 第44-47页 |
| 第四章 Eta21 抗原活菌载体疫苗的构建及免疫效果分析 | 第47-53页 |
| ·材料与方法 | 第47-49页 |
| ·Eta21 抗原传递菌株的构建 | 第47-48页 |
| ·Eta21 在DH5α/pTAET21 菌株中的表达 | 第48-49页 |
| ·Eta21 抗原传递菌株免疫保护效应测定 | 第49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-53页 |
| ·Eta21 在 DH5α/pTAET21 菌株中的表达情况 | 第49-50页 |
| ·活菌疫苗DH5α/pTAET21 的免疫保护效应 | 第50页 |
| ·抗体效价检测 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-53页 |
| 第五章 DNA疫苗的构建及免疫效果分析 | 第53-68页 |
| ·材料与方法 | 第53-60页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·抗原基因的克隆 | 第54页 |
| ·抗原基因DNA疫苗的构建 | 第54-55页 |
| ·抗原基因DNA疫苗的制备 | 第55页 |
| ·DNA疫苗免疫保护效应的测定 | 第55-58页 |
| ·实验牙鲆的免疫 | 第55-56页 |
| ·DNA疫苗残留情况检测 | 第56页 |
| ·DNA疫苗转录情况检测 | 第56-57页 |
| ·DNA疫苗表达情况检测 | 第57-58页 |
| ·DNA疫苗免疫保护效应的评价 | 第58-60页 |
| ·抗体效价的检测 | 第58-59页 |
| ·免疫相关基因表达水平的检测 | 第59-60页 |
| ·组织病理学观察 | 第60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-68页 |
| ·DNA疫苗残留及转录情况 | 第60-62页 |
| ·DNA疫苗的免疫保护效应 | 第62-64页 |
| ·pEta6 和pFliC的保护效应 | 第62页 |
| ·融合DNA疫苗pCE6 的免疫保护效应 | 第62-63页 |
| ·融合DNA疫苗pCE18 的免疫保护效应 | 第63-64页 |
| ·DNA疫苗免疫效果评价 | 第64-68页 |
| ·血清抗体检测 | 第64页 |
| ·免疫相关基因的表达 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-68页 |
| 科研成果的创新性和科学意义 | 第68-69页 |
| 附录—缓冲液的配置 | 第69-75页 |
| 参考文献 | 第75-85页 |
| 博士期间发表的文章和申请的专利 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
