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基于甘薯徐781和徐薯18转录组测序的SNP标记开发

摘要第5-6页
Abstract第6页
第一章 引言第12-23页
    1.1 甘薯产业的概况第12页
    1.2 甘薯分子标记及研究现状第12-15页
        1.2.1 分子标记种类及应用第12-14页
            1.2.1.1 分子标记的种类第12-13页
            1.2.1.2 分子标记的应用第13-14页
        1.2.2 分子标记在甘薯遗传育种研究中的应用第14-15页
            1.2.2.1 研究甘薯起源、进化与分类第14页
            1.2.2.2 分析甘薯遗传多样性和亲缘关系第14页
            1.2.2.3 绘制指纹图谱,鉴定甘薯品种第14-15页
            1.2.2.4 构建甘薯分子遗传图谱第15页
            1.2.2.5 甘薯基因定位和DNA分子标记辅助选择育种第15页
    1.3 SNP检测方法的研究进展第15-20页
        1.3.1 基于凝胶电泳的SNP检测方法第15-18页
            1.3.1.1 单链构象多态性(SSCP)第16页
            1.3.1.2 变性梯度凝胶电泳(DGGE)第16-17页
            1.3.1.3 酶切扩增多态性序列(CAPS)第17页
            1.3.1.4 等位基因特异性PCR(AS-PCR)第17-18页
        1.3.2 高通量、自动化程度较高的SNP检测方法第18-20页
            1.3.2.1 直接测序第18页
            1.3.2.2 DNA芯片第18-19页
            1.3.2.3 变性高效液相色谱(DHPLC)第19页
            1.3.2.4 质谱检测第19-20页
            1.3.2.5 高分辨熔解曲线(HRM)第20页
    1.4 转录组测序研究及分子标记开发第20-22页
        1.4.1 测序技术研究第20-21页
            1.4.1.1 全基因组测序的研究第21页
            1.4.1.2 转录组测序研究第21页
        1.4.2 甘薯转录组测序研究第21-22页
        1.4.3 基于转录组测序的分子标记的开发第22页
    1.5 本研究的目的和意义第22-23页
第二章 甘薯SNP检测方法的筛选与反应条件的优化第23-41页
    2.1 材料与方法第23-28页
        2.1.1 实验材料第23页
        2.1.2 实验主要仪器、设备第23-24页
        2.1.3 样本基因组DNA提取第24页
        2.1.4 甘薯SNP标记快速高效检测方法的选择第24-26页
            2.1.4.1 等位基因特异性PCR(AS-PCR)第24-25页
            2.1.4.2 四引物扩增受阻突变体系PCR(Tetra-primer ARMS-PCR)第25-26页
            2.1.4.3 酶切扩增多态性序列(CAPS)第26页
            2.1.4.4 SNP凝胶电泳检测第26页
        2.1.5 甘薯SNP检测方法反应体系的优化第26-28页
            2.1.5.1 Tetra-primer ARMS-PCR反应体系退火温度的优化第26-27页
            2.1.5.2 Tetra-primer ARMS-PCR反应体系中内外引物浓度比的优化第27-28页
            2.1.5.3 Tetra-primer ARMS-PCR反应体系中Taq DNA聚合酶用量的优化第28页
    2.2 结果与分析第28-38页
        2.2.1 样本基因组DNA的提取和检测第28-29页
        2.2.2 甘薯SNP标记快速高效检测方法的选择第29-31页
            2.2.2.1 SNP位点T2-32906检测效果比较第29-30页
            2.2.2.2 SNP位点T3-30695检测效果比较第30-31页
        2.2.3 甘薯SNP检测方法反应体系的优化第31-38页
            2.2.3.1 不同退火温度下SNP位点PCR扩增产物的检测第31-33页
            2.2.3.2 不同内外引物浓度比的SNP位点PCR扩增产物的检测第33-36页
            2.2.3.3 不同Taq DNA聚合酶用量的SNP位点PCR扩增产物的检测第36-38页
    2.3 讨论第38-41页
第三章 利用Tetra-primer ARMS-PCR开发甘薯SNP标记第41-54页
    3.1 材料与方法第41-42页
        3.1.1 实验材料第41页
        3.1.2 实验主要仪器、设备第41页
        3.1.3 Tetra-primer ARMS-PCR引物的设计第41-42页
        3.1.4 Tetra-primer ARMS-PCR引物的扩增第42页
        3.1.5 Tetra-primer ARMS-PCR扩增产物的电泳检测第42页
        3.1.6 甘薯SNP标记的开发第42页
    3.2 结果与分析第42-52页
        3.2.1 Tetra-primer ARMS-PCR引物第42-43页
        3.2.2 Tetra-primer ARMS-PCR扩增结果第43-47页
        3.2.3 甘薯候选SNP位点的检测第47-52页
    3.3 讨论第52-54页
第四章 全文结论第54-55页
参考文献第55-64页
致谢第64-65页
附录第65-85页
作者简历第85页

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