符号说明 | 第4-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-24页 |
1.1 CSFV的生物学特性 | 第13-17页 |
1.1.1 CSFV的基因组特点 | 第14-15页 |
1.1.2 CSFV编码的结构蛋白 | 第15-17页 |
1.1.3 我国CSFV基因分群 | 第17页 |
1.2 猪瘟疫苗质量研究 | 第17-18页 |
1.3 猪源BVDV与CSFV的联系研究 | 第18-19页 |
1.3.1 猪感染BVDV的传染来源 | 第18页 |
1.3.2 非典型猪瘟的临床症状和病理变化 | 第18-19页 |
1.4 猪感染BVDV和CSFV的鉴别诊断 | 第19-21页 |
1.4.1 病毒的分离和鉴定 | 第19-20页 |
1.4.2 单克隆抗体技术 | 第20页 |
1.4.3 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第20页 |
1.4.4 核酸杂交试验技术(NAH) | 第20页 |
1.4.5 反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR) | 第20-21页 |
1.4.6 实时荧光定量RT-PCR技术 | 第21页 |
1.5 我国CSF发病原因分析 | 第21-23页 |
1.5.1 免疫程序的影响 | 第21-22页 |
1.5.2 母源抗体的干扰 | 第22页 |
1.5.3 疫苗效价的影响 | 第22页 |
1.5.4 免疫抑制病的影响 | 第22-23页 |
1.5.5 母猪带毒综合征 | 第23页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-34页 |
2.1 材料 | 第24-27页 |
2.1.1 病毒和病料 | 第24-25页 |
2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
2.1.3 主要仪器 | 第25页 |
2.1.4 试剂配制 | 第25-27页 |
2.2 方法 | 第27-34页 |
2.2.1 CSFV/BVDV双重RT-qPCR方法的建立及初步应用 | 第27-28页 |
2.2.2 病毒的分离鉴定 | 第28-30页 |
2.2.3 山东地区CSFV分子生物学特征的研究 | 第30-34页 |
3 结果与分析 | 第34-43页 |
3.1 CSFV/BVDV双重RT-qPCR方法建立的结果 | 第34-36页 |
3.1.1 阳性质控品的制备及浓度确定 | 第34页 |
3.1.2 双重RT-qPCR条件的优化及标准曲线建立 | 第34-35页 |
3.1.3 特异性、重复性和敏感性试验结果 | 第35-36页 |
3.1.4 临床样品检测 | 第36页 |
3.2 病毒分离鉴定的结果 | 第36-37页 |
3.2.1 CSFV接种PK15细胞后细胞状态 | 第36-37页 |
3.2.2 病毒分离与RT-qPCR鉴定结果 | 第37页 |
3.3 山东地区CSFV分子生物学特性的研究的结果 | 第37-43页 |
3.3.1 PCR扩增结果 | 第37-38页 |
3.3.2 酶切鉴定结果 | 第38-39页 |
3.3.3 同源性分析结果 | 第39-41页 |
3.3.4 遗传进化分析结果 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-48页 |
4.1 CSFV/BVDV双重RT-qPCR检测方法的建立 | 第43-44页 |
4.2 病毒的分离鉴定 | 第44-45页 |
4.3 山东地区CSFV分子生物学特性的研究 | 第45-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
附录 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第64页 |