| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第11-13页 |
| 1.1 玉米大斑病及其致病菌 | 第11页 |
| 1.2 植物病原真菌中的MAPK信号转导途径 | 第11-12页 |
| 1.3 酿酒酵母中水甘油通道蛋白的研究 | 第12页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第12-13页 |
| 2 材料和方法 | 第13-19页 |
| 2.1 菌株 | 第13页 |
| 2.2 培养基 | 第13页 |
| 2.3 试剂 | 第13页 |
| 2.4 主要仪器 | 第13-14页 |
| 2.5 StFPS1 基因敲除载体的验证 | 第14页 |
| 2.6 StFPS1 基因敲除突变体的获得 | 第14-16页 |
| 2.6.1 原生质体的转化 | 第14页 |
| 2.6.2 敲除突变体的抗性筛选 | 第14-15页 |
| 2.6.3 敲除突变体的验证 | 第15-16页 |
| 2.7 StFPS1 基因敲除突变体的初步分析 | 第16-17页 |
| 2.7.1 菌落形态和生长速率的测定 | 第16页 |
| 2.7.2 菌丝形态显微观察 | 第16页 |
| 2.7.3 分生孢子产量测定 | 第16页 |
| 2.7.4 对高渗胁迫的敏感性分析 | 第16页 |
| 2.7.5 病菌胞内甘油含量的测定 | 第16-17页 |
| 2.7.6 甘油合成基因的实时荧光定量PCR分析 | 第17页 |
| 2.8 StFPS1 基因敲除突变体细胞壁发育的分析 | 第17-18页 |
| 2.8.1 菌丝形态的透射电镜观察 | 第17-18页 |
| 2.8.2 细胞壁合成基因的实时荧光定量PCR分析 | 第18页 |
| 2.8.3 对细胞壁干扰物质的敏感性测定 | 第18页 |
| 2.8.4 StHOG1 和StSLT2 基因的实时荧光定量PCR分析 | 第18页 |
| 2.9 不同胁迫条件下StFPS1 基因的表达分析 | 第18-19页 |
| 2.9.1 氧胁迫对StFPS1 基因表达的影响 | 第18页 |
| 2.9.2 温度胁迫对StFPS1 基因表达的影响 | 第18-19页 |
| 3 结果与分析 | 第19-33页 |
| 3.1 StFPS1 基因敲除载体的验证 | 第19页 |
| 3.2 StFPS1 基因敲除突变体的获得 | 第19-21页 |
| 3.2.1 突变体的抗性筛选 | 第19-20页 |
| 3.2.2 突变体特异引物的PCR验证 | 第20页 |
| 3.2.3 突变体的RT-PCR验证 | 第20-21页 |
| 3.3 StFPS1 基因对病菌发育的影响 | 第21-23页 |
| 3.3.1 菌落形态及生长速率 | 第21页 |
| 3.3.2 菌丝形态 | 第21-22页 |
| 3.3.3 分生孢子发育 | 第22-23页 |
| 3.4 St FPS1 基因对病菌高渗胁迫反应的影响 | 第23-26页 |
| 3.4.1 突变体的生长速率 | 第23-24页 |
| 3.4.2 突变体菌丝的形态 | 第24页 |
| 3.4.3 突变体菌丝中甘油的含量 | 第24-25页 |
| 3.4.4 突变体中甘油合成基因的表达 | 第25-26页 |
| 3.5 St FPS1 基因对病菌细胞壁发育的影响 | 第26-31页 |
| 3.5.1 菌丝细胞壁结构 | 第26-27页 |
| 3.5.2 细胞壁合成基因的表达 | 第27-28页 |
| 3.5.3 对细胞壁合成抑制剂的敏感性 | 第28-30页 |
| 3.5.4 StFPS1 基因与HOG途径和CWI途径的关系 | 第30-31页 |
| 3.6 不同胁迫条件对StFPS1 基因表达的影响 | 第31-33页 |
| 3.6.1 氧胁迫下StFPS1 的表达 | 第31-32页 |
| 3.6.2 温度胁迫下StFPS1 的表达 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 4.1 St FPS1 参与调控玉米大斑病菌高渗胁迫反应机制 | 第33页 |
| 4.2 St FPS1 对病菌细胞壁发育的影响 | 第33-34页 |
| 4.3 St FPS1 与HOG-MAPK和CWI-MAPK级联途径的关系 | 第34-35页 |
| 5 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第40-41页 |
| 作者简历 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
