| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略语表(Abbreviations) | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 转录因子概述 | 第13-15页 |
| 1.1.1 植物转录因子的结构特点及作用机制 | 第13-14页 |
| 1.1.2 植物转录因子的分类 | 第14-15页 |
| 1.2 植物转录因子在植物物胁迫中的作用 | 第15-17页 |
| 1.3 植物WRKY类转录因子研究进展 | 第17-20页 |
| 1.4 植物耐盐机制概述 | 第20-21页 |
| 1.5 植物激素在植物生长及非生物胁迫中的作用 | 第21-23页 |
| 1.5.1 生长素在植物生长及非生物胁迫中的作用 | 第21-22页 |
| 1.5.2 脱落酸在植物生长及非生物胁迫中的作用 | 第22-23页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23-24页 |
| 2.1.2 生化试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要试剂的配置 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-40页 |
| 2.2.1 植物DNA提取及Southern杂交 | 第26-28页 |
| 2.2.2 Bna.TTG2基因家族的克隆 | 第28-29页 |
| 2.2.3 Bna.TTG2基因家族生物信息学分析 | 第29-30页 |
| 2.2.4 Bna.TTG2基因家族及AtTTG2基因表达载体构建 | 第30页 |
| 2.2.5 Bna.TTG2基因家族启动子克隆及GUS载体构建 | 第30-32页 |
| 2.2.6 拟南芥及甘蓝型油菜的遗传转化及阳性鉴定 | 第32页 |
| 2.2.7 Bna.TTG2启动子转化植株的GUS染色分析 | 第32页 |
| 2.2.8 Bna.TTG2基因家族亚细胞定位分析 | 第32-33页 |
| 2.2.9 植株表皮毛性状考察 | 第33页 |
| 2.2.10 植物耐盐性鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.11 植株渗透胁迫鉴定 | 第34页 |
| 2.2.12 植株离子含量测定 | 第34页 |
| 2.2.13 植物淀粉及内源激素含量测定 | 第34页 |
| 2.2.14 淀粉酶活性测定 | 第34-35页 |
| 2.2.15 拟南芥叶片半薄切片 | 第35页 |
| 2.2.16 Real-time PCR表达分析 | 第35页 |
| 2.2.17 转录激活、酵母双杂交及酵母单杂交分析 | 第35-37页 |
| 2.2.18 双荧光酶素报告(DLR)系统分析 | 第37-38页 |
| 2.2.19 双分子荧光互补实验 | 第38-40页 |
| 2.2.20 ABA处理种子萌发实验 | 第40页 |
| 2.2.21 葡萄糖处理实验 | 第40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-72页 |
| 3.1 Bna.TTG2基因家族的克隆、结构及表达分析 | 第40-47页 |
| 3.1.1 Bna.TTG2基因家族拷贝数分析 | 第40-41页 |
| 3.1.2 Bna.YTG2基因家族与拟南芥AtTTG2基因同源性分析 | 第41-43页 |
| 3.1.3 Bna.TTG2剪切变异分析 | 第43-44页 |
| 3.1.4 Bna.TTG2基因家族表达时空分析 | 第44-45页 |
| 3.1.5 Bna.TTG2基因家族亚细胞定位 | 第45-46页 |
| 3.1.6 BnaA.TTG2.a.1转录激活/抑制区域分析 | 第46-47页 |
| 3.2 Bna.TTG2基因参与植物表皮毛发育调控 | 第47-52页 |
| 3.2.1 Bna.TTG2基因家族可以回复拟南芥ttg2-1突变体 | 第47-50页 |
| 3.2.2 Bna.TTG2蛋白WRKY结构域对于表皮毛发生的影响 | 第50页 |
| 3.2.3 BnaA.TTG2.a.1过表达拟南芥及油菜叶片表皮毛数目增加 | 第50-52页 |
| 3.3 Bna.TTG2基因影响植物生长素介导的盐胁迫响应 | 第52-64页 |
| 3.3.1 BnaA.TTG2.a.1过表达拟南芥及油菜对盐过敏感 | 第52-53页 |
| 3.3.2 盐胁迫下渗透胁迫和离子毒害对过表达植株的影响 | 第53-57页 |
| 3.3.3 BnaA.TTG2.a.1过表达影响拟南芥盐胁迫下淀粉代谢 | 第57页 |
| 3.3.4 盐胁迫改变过表达拟南芥叶片细胞形态 | 第57-59页 |
| 3.3.5 盐胁迫下过表达植株内源生长素含量降低 | 第59-60页 |
| 3.3.6 过表达植株盐胁迫下生长素路径相关基因的表达受到影响 | 第60-62页 |
| 3.3.7 BnaA.TTG2.a.1可以结合TRP5和YUC2基因启动子区域 | 第62-64页 |
| 3.3.8 BnaA.TTG2.a.1蛋白N端区域对盐胁迫的影响 | 第64页 |
| 3.4 Bna.TTG2基因可能参与葡萄糖及激素代谢相关的过程 | 第64-66页 |
| 3.4.1 BnaA.TTG2.a.1影响葡萄糖处理下植株苗期形态建成 | 第64-65页 |
| 3.4.2 BnaA.TTG2.a.1影响ABA介导的种子萌发 | 第65-66页 |
| 3.5 BnaA.TTG2.a.1互作转录因子分析 | 第66-72页 |
| 3.5.1 全长BnaA.TTG2.a.1互作转录因子的筛选 | 第66-67页 |
| 3.5.2 BnaA.TTG2.a.1互作转录因子BIFC验证 | 第67-70页 |
| 3.5.3 BnaA.TTG2.a.1蛋白N端区域在该蛋白与其它蛋白互作中的作用 | 第70-72页 |
| 4 讨论 | 第72-81页 |
| 4.1 Bna.TTG2及其同源基因在进化上高度保守 | 第72-73页 |
| 4.2 Bna.TTG2基因参与植物表皮毛发育调控 | 第73-75页 |
| 4.3 Bna.TTG2基因影响植物生长素介导的盐胁迫响应 | 第75-78页 |
| 4.3.1 过表达BnaA.TTG2.a.1在盐胁迫下对植株产生负向效应 | 第75页 |
| 4.3.2 渗透胁迫和离子毒害不是造成过表达植株盐敏感的原因 | 第75-76页 |
| 4.3.3 BnaA.TTG2.a.1过表达影响拟南芥盐胁迫下糖代谢 | 第76页 |
| 4.3.4 BnaA.TTG2.a.1在盐胁迫下负调控植物生长素路径 | 第76-77页 |
| 4.3.5 BnaA.TTG2.a.1负调控植物耐盐性的可能机制 | 第77-78页 |
| 4.4 Bna.TTG2可能是个双重功能的转录因子 | 第78页 |
| 4.5 展望 | 第78-81页 |
| 4.5.1 Bna.TTG2可能影响葡萄糖及ABA信号转导路径 | 第78-79页 |
| 4.5.2 Bna.TTG2互作蛋白后续分析-从物理互作到功能互作 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-97页 |
| 附录 | 第97-99页 |
| 附录1 部分实验详细步骤 | 第97-98页 |
| 附录2 作者简介及在读期间发表的论文 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
