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葡萄中赭曲霉毒素A产生菌的筛选及其产毒机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第12-22页
    1.1 OTA毒理特性第12-13页
    1.2 葡萄及其制品上OTA产生来源第13页
        1.2.1 国内外OTA限量标准第13页
        1.2.2 葡萄上OTA污染状况第13页
    1.3 主要产毒菌第13-14页
    1.4 环境对OTA产生的影响第14-15页
        1.4.1 培养基组分第15页
        1.4.2 培养条件第15页
    1.5 OTA合成途径第15-17页
    1.6 OTA合成相关基因第17页
    1.7 控制OTA污染的方法第17-21页
        1.7.1 去除已存在的毒素第18页
        1.7.2 预防毒素产生第18-19页
        1.7.3 分子生物学应用于OTA污染防控第19-21页
    1.8 本课题研究的目的及意义第21-22页
第二章 葡萄中赭曲霉毒素A产生菌的筛选与鉴定第22-34页
    2.1 前言第22-23页
    2.2 材料与方法第23-27页
        2.2.1 主要仪器第23页
        2.2.2 主要试剂第23页
        2.2.3 菌株来源第23-24页
        2.2.4 培养基第24页
        2.2.5 葡萄上致病菌的分离纯化第24页
        2.2.6 OTA产生菌株的筛选第24-26页
        2.2.7 分子生物学鉴定第26-27页
    2.3 结果与分析第27-33页
        2.3.1 筛选不同品种葡萄中的OTA产生菌第27页
        2.3.2 高效液相法筛选OTA产生菌第27-30页
        2.3.3 利用LC-MS进一步验证X9-4 产物中的OTA第30-31页
        2.3.4 产毒菌株形态学鉴定第31页
        2.3.5 产毒素菌株ITS区序列测定结果与分析第31-33页
    2.4 讨论与小结第33-34页
第三章 环境对菌株X9-4 的生长及产毒素影响第34-45页
    3.1 引言第34页
    3.2 材料与方法第34-38页
        3.2.1 主要仪器第34-35页
        3.2.2 主要试剂第35页
        3.2.3 菌种来源第35页
        3.2.4 培养基第35页
        3.2.5 菌悬液的制备第35-36页
        3.2.6 X9-4 菌株的生长条件研究第36-37页
        3.2.7 X9-4 菌株产毒条件的研究第37-38页
    3.3 结果与分析第38-43页
        3.3.1 X9-4 菌株的生长条件研究第38-41页
        3.3.2 X9-4 菌株的产毒条件研究第41-43页
    3.4 讨论与小结第43-45页
第四章 pH影响X9-4 产毒的相关蛋白质组学分析第45-60页
    4.1 引言第45页
    4.2 材料和方法第45-53页
        4.2.1 实验材料第45-46页
        4.2.2 主要仪器及化学试剂第46-47页
        4.2.3 总蛋白的提取第47-48页
        4.2.4 双向电泳第48-52页
        4.2.5 凝胶图谱分析第52页
        4.2.6 质谱实验操作流程第52-53页
        4.2.7 蛋白鉴定第53页
    4.3 结果与分析第53-59页
        4.3.1 不同pH下灰黄青霉蛋白质双向电泳凝胶图分析第54-55页
        4.3.2 蛋白差异点质谱鉴定结果第55-57页
        4.3.3 差异蛋白分析第57-59页
    4.4 讨论与小结第59-60页
第五章 X9-4 产毒相关基因的转录研究第60-77页
    5.1 引言第60页
    5.2 材料与设备第60-61页
        5.2.1 实验材料第60页
        5.2.2 主要试剂第60页
        5.2.3 主要仪器设备第60-61页
    5.3 实验方法第61-65页
        5.3.1 总RNA提取第61页
        5.3.2 总RNA质量鉴定第61-62页
        5.3.3 转录组测序第62页
        5.3.4 RNA文库构建第62-63页
        5.3.5 qRT-PCR验证相关基因第63-65页
    5.4 结果与分析第65-76页
        5.4.1 RNA提取的结果第65-66页
        5.4.2 转录组测序结果第66-67页
        5.4.3 Unigenes分析第67-68页
        5.4.4 Unigenes的功能注释分析第68-69页
        5.4.5 Unigenes的GO和COG分类第69-71页
        5.4.6 DEG的GO,COG和KEGG分类第71-73页
        5.4.7 qRT-PCR结果分析第73-76页
    5.5 讨论与小结第76-77页
第六章 结论与展望第77-79页
    6.1 主要结论第77-78页
    6.2 展望第78-79页
参考文献第79-83页
致谢第83-84页
攻读硕士期间发表论文第84页

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