摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-22页 |
1.1 OTA毒理特性 | 第12-13页 |
1.2 葡萄及其制品上OTA产生来源 | 第13页 |
1.2.1 国内外OTA限量标准 | 第13页 |
1.2.2 葡萄上OTA污染状况 | 第13页 |
1.3 主要产毒菌 | 第13-14页 |
1.4 环境对OTA产生的影响 | 第14-15页 |
1.4.1 培养基组分 | 第15页 |
1.4.2 培养条件 | 第15页 |
1.5 OTA合成途径 | 第15-17页 |
1.6 OTA合成相关基因 | 第17页 |
1.7 控制OTA污染的方法 | 第17-21页 |
1.7.1 去除已存在的毒素 | 第18页 |
1.7.2 预防毒素产生 | 第18-19页 |
1.7.3 分子生物学应用于OTA污染防控 | 第19-21页 |
1.8 本课题研究的目的及意义 | 第21-22页 |
第二章 葡萄中赭曲霉毒素A产生菌的筛选与鉴定 | 第22-34页 |
2.1 前言 | 第22-23页 |
2.2 材料与方法 | 第23-27页 |
2.2.1 主要仪器 | 第23页 |
2.2.2 主要试剂 | 第23页 |
2.2.3 菌株来源 | 第23-24页 |
2.2.4 培养基 | 第24页 |
2.2.5 葡萄上致病菌的分离纯化 | 第24页 |
2.2.6 OTA产生菌株的筛选 | 第24-26页 |
2.2.7 分子生物学鉴定 | 第26-27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-33页 |
2.3.1 筛选不同品种葡萄中的OTA产生菌 | 第27页 |
2.3.2 高效液相法筛选OTA产生菌 | 第27-30页 |
2.3.3 利用LC-MS进一步验证X9-4 产物中的OTA | 第30-31页 |
2.3.4 产毒菌株形态学鉴定 | 第31页 |
2.3.5 产毒素菌株ITS区序列测定结果与分析 | 第31-33页 |
2.4 讨论与小结 | 第33-34页 |
第三章 环境对菌株X9-4 的生长及产毒素影响 | 第34-45页 |
3.1 引言 | 第34页 |
3.2 材料与方法 | 第34-38页 |
3.2.1 主要仪器 | 第34-35页 |
3.2.2 主要试剂 | 第35页 |
3.2.3 菌种来源 | 第35页 |
3.2.4 培养基 | 第35页 |
3.2.5 菌悬液的制备 | 第35-36页 |
3.2.6 X9-4 菌株的生长条件研究 | 第36-37页 |
3.2.7 X9-4 菌株产毒条件的研究 | 第37-38页 |
3.3 结果与分析 | 第38-43页 |
3.3.1 X9-4 菌株的生长条件研究 | 第38-41页 |
3.3.2 X9-4 菌株的产毒条件研究 | 第41-43页 |
3.4 讨论与小结 | 第43-45页 |
第四章 pH影响X9-4 产毒的相关蛋白质组学分析 | 第45-60页 |
4.1 引言 | 第45页 |
4.2 材料和方法 | 第45-53页 |
4.2.1 实验材料 | 第45-46页 |
4.2.2 主要仪器及化学试剂 | 第46-47页 |
4.2.3 总蛋白的提取 | 第47-48页 |
4.2.4 双向电泳 | 第48-52页 |
4.2.5 凝胶图谱分析 | 第52页 |
4.2.6 质谱实验操作流程 | 第52-53页 |
4.2.7 蛋白鉴定 | 第53页 |
4.3 结果与分析 | 第53-59页 |
4.3.1 不同pH下灰黄青霉蛋白质双向电泳凝胶图分析 | 第54-55页 |
4.3.2 蛋白差异点质谱鉴定结果 | 第55-57页 |
4.3.3 差异蛋白分析 | 第57-59页 |
4.4 讨论与小结 | 第59-60页 |
第五章 X9-4 产毒相关基因的转录研究 | 第60-77页 |
5.1 引言 | 第60页 |
5.2 材料与设备 | 第60-61页 |
5.2.1 实验材料 | 第60页 |
5.2.2 主要试剂 | 第60页 |
5.2.3 主要仪器设备 | 第60-61页 |
5.3 实验方法 | 第61-65页 |
5.3.1 总RNA提取 | 第61页 |
5.3.2 总RNA质量鉴定 | 第61-62页 |
5.3.3 转录组测序 | 第62页 |
5.3.4 RNA文库构建 | 第62-63页 |
5.3.5 qRT-PCR验证相关基因 | 第63-65页 |
5.4 结果与分析 | 第65-76页 |
5.4.1 RNA提取的结果 | 第65-66页 |
5.4.2 转录组测序结果 | 第66-67页 |
5.4.3 Unigenes分析 | 第67-68页 |
5.4.4 Unigenes的功能注释分析 | 第68-69页 |
5.4.5 Unigenes的GO和COG分类 | 第69-71页 |
5.4.6 DEG的GO,COG和KEGG分类 | 第71-73页 |
5.4.7 qRT-PCR结果分析 | 第73-76页 |
5.5 讨论与小结 | 第76-77页 |
第六章 结论与展望 | 第77-79页 |
6.1 主要结论 | 第77-78页 |
6.2 展望 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第84页 |