| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 绪论 | 第11-21页 |
| ·APC蛋白 | 第11-14页 |
| ·APC蛋白主要在Wnt信号通道中起作用 | 第11-12页 |
| ·APC蛋白的结构特征 | 第12-14页 |
| ·APC与鸟苷酸交换因子Asef | 第14-17页 |
| ·Asef与Dbl家族 | 第14-16页 |
| ·APC与Asef间的相互作用 | 第16-17页 |
| ·APC与MAGUK家族成员DLG1 | 第17-19页 |
| ·DLG1 与MAGUK家族 | 第17-18页 |
| ·APC与DLG1 间的相互作用 | 第18-19页 |
| ·等温滴定量热法测定定量结合常数 | 第19-20页 |
| ·本课题的研究内容与研究意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-35页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·试剂和溶液配制 | 第23-26页 |
| ·实验方法及步骤 | 第26-35页 |
| ·蛋白质分析 | 第26-27页 |
| ·重组质粒构建 | 第27-30页 |
| ·质粒转化及蛋白表达检测 | 第30页 |
| ·蛋白质表达 | 第30-31页 |
| ·蛋白质纯化 | 第31-34页 |
| ·蛋白质结晶 | 第34-35页 |
| 3 APC-PreArm-Arm结构域蛋白及Asef-ABR-SH3 结构域蛋白的表达、纯化，及其复合物的结晶和结构解析 | 第35-48页 |
| ·APC-PreArm-Arm及Asef-ABR-SH3 结构域蛋白的小规模纯化 | 第35-37页 |
| ·His-APC（303-739）与His-Asef（170-271）菌株的表达检测 | 第35-36页 |
| ·His-APC（303-739）与His-Asef（170-271）的小规模纯化 | 第36-37页 |
| ·His-APC（303-739）与His-Asef（170-271）蛋白的纯化 | 第37-40页 |
| ·His-APC（303-739）与His-Asef（170-271）蛋白的Ni柱亲和纯化 | 第37-38页 |
| ·His-APC（303-739）与His-Asef（170-271）蛋白的分子筛层析 | 第38-39页 |
| ·His-APC（303-739）/His-Asef（170-271）复合物的分子筛层析 | 第39-40页 |
| ·His-APC（303-739）/His-Asef（170-271）复合物的结晶及结构解析 | 第40-46页 |
| ·His-APC（303-739）/His-Asef（170-271）复合物的结晶 | 第40-41页 |
| ·His-APC（303-739）/His-Asef（170-271）复合物的结构解析 | 第41-43页 |
| ·APC与Asef结合界面的研究 | 第43-46页 |
| ·本章小结 | 第46-48页 |
| 4 APC-Arm结构域与Asef-ABR结构域结合性质的研究 | 第48-61页 |
| ·点突变蛋白表达系统的构建 | 第48-51页 |
| ·点突变蛋白表达质粒载体的构建 | 第49-50页 |
| ·点突变蛋白表达系统的表达检测 | 第50-51页 |
| ·点突变蛋白的纯化 | 第51-55页 |
| ·点突变蛋白的Ni柱亲和纯化 | 第52-53页 |
| ·点突变蛋白的分子筛层析 | 第53-55页 |
| ·APC-Arm结构域与Asef-ABR结构域结合性质的验证 | 第55-60页 |
| ·APC-Arm结构域和Asef-ABR结构域结合性质的定性验证 | 第55-56页 |
| ·APC-Arm结构域和Asef-ABR结构域结合性质的定量验证 | 第56-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 5 APC和DLG1 结合性质的研究 | 第61-71页 |
| ·DLG1 结合APC的关键结构域研究 | 第61-65页 |
| ·DLG1 结合APC的关键结构域的定性检验 | 第61-63页 |
| ·DLG1 结合APC的关键结构域的定量检验 | 第63-65页 |
| ·DLG1 与APC的结合性质研究 | 第65-69页 |
| ·PDZ1、PDZ2 和PDZ3 序列对比分析 | 第65-67页 |
| ·DLG1 与APC结合性质的定性研究 | 第67-68页 |
| ·DLG1 与APC结合性质的定量研究 | 第68-69页 |
| ·本章小结 | 第69-71页 |
| 6 总结与讨论 | 第71-73页 |
| ·APC与Asef结合性质的研究 | 第71页 |
| ·APC与DLG1 结合性质的研究 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第77-80页 |
| 附件 | 第80页 |
