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用代谢组学方法研究DNA甲基化对花生四烯酸代谢的影响及血管内皮激活的机制

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语第11-13页
前言第13-19页
    研究现状、成果第13-18页
    研究目的、方法第18-19页
一、DNA甲基化引起内皮细胞AA代谢失衡第19-43页
    1.1 对象和方法第19-34页
        1.1.1 主要试剂第19-20页
        1.1.2 主要仪器第20-22页
        1.1.3 主要试剂的配制第22-25页
        1.1.4 细胞的培养及处理第25-30页
        1.1.5 细胞内容物的代谢产物检测第30-31页
        1.1.6 细胞内基因实时定量PCR分析第31-34页
        1.1.7 DNA甲基化特异型分析实验第34页
        1.1.8 统计分析第34页
    1.2 结果第34-41页
        1.2.1 5-AZA诱导的DNA去甲基化影响AA代谢通路间平衡第34-38页
        1.2.2 5-AZA调控AA代谢酶的基因表达水平第38-39页
        1.2.3 5-AZA影响AA代谢酶的表达不是内皮细胞特异性的第39-41页
    1.3 讨论第41-42页
        1.3.1 代谢组学研究AA代谢的意义第41页
        1.3.2 DNA甲基化对AA代谢酶的作用第41-42页
        1.3.3 AA代谢产物对血管的影响第42页
    1.4 小结第42-43页
二、DNA甲基化特异性分析验证甲基化状态改变第43-54页
    2.1 对象和方法第43-50页
        2.1.1 主要仪器第43页
        2.1.2 主要试剂第43-44页
        2.1.3 主要试剂配制第44-46页
        2.1.4 细胞的培养与处理第46-47页
        2.1.5 DNA的甲基化特异性PCR分析第47-49页
        2.1.6 相关的分子生物学实验第49-50页
        2.1.7 统计分析第50页
    2.2 结果第50-53页
        2.2.1 生物学分析TBXAS1的启动子区CpG岛的含量第50-51页
        2.2.2 BSP验证TBXAS1的启动子区甲基化状态改变第51-52页
        2.2.3 生物学分析PTGDS的启动子区CpG岛的含量第52-53页
        2.2.4 BSP验证PTGDS的启动子区甲基化状态改变第53页
    2.3 讨论第53页
    2.4 小结第53-54页
三、DNA去甲基化诱导AA代谢紊乱的病理意义第54-65页
    3.1 对象和方法第54-60页
        3.1.1 主要仪器第54页
        3.1.2 主要试剂第54-55页
        3.1.3 主要试剂配制第55-58页
        3.1.4 内皮细胞的培养与处理第58页
        3.1.5 细胞内代谢产物的萃取第58页
        3.1.6 实时定量PCR分析第58页
        3.1.7 蛋白电泳与蛋白质印记第58-60页
        3.1.8 统计分析第60页
    3.2 结果第60-63页
        3.2.1 DNA去甲基化诱导内皮细胞的激活第60-62页
        3.2.2 高同型半胱氨酸 (HCY) 模型中AA代谢谱的改变第62-63页
    3.3 讨论第63-64页
    3.4 小结第64-65页
四、在体验证DNA甲基化对AA代谢影响第65-72页
    4.1 对象和方法第65-69页
        4.1.1 主要仪器第65页
        4.1.2 主要试剂第65页
        4.1.3 主要试剂配制第65页
        4.1.4 动物的饲养与处理第65-66页
        4.1.5 血浆及组织内代谢产物的萃取第66-67页
        4.1.6 实时定量PCR分析第67-69页
        4.1.7 统计分析第69页
    4.2 结果第69-71页
        4.2.1 血浆及肝脏内AA代谢产物的检测第69-70页
        4.2.2 在体检测组织内靶基因的表达水平第70-71页
    4.3 讨论第71页
    4.4 小结第71-72页
全文讨论第72-75页
全文结论第75-76页
论文创新点第76-77页
参考文献第77-89页
发表论文和参加科研情况说明第89-91页
综述第91-106页
    综述参考文献第98-106页
致谢第106-107页

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