中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语 | 第11-13页 |
前言 | 第13-19页 |
研究现状、成果 | 第13-18页 |
研究目的、方法 | 第18-19页 |
一、DNA甲基化引起内皮细胞AA代谢失衡 | 第19-43页 |
1.1 对象和方法 | 第19-34页 |
1.1.1 主要试剂 | 第19-20页 |
1.1.2 主要仪器 | 第20-22页 |
1.1.3 主要试剂的配制 | 第22-25页 |
1.1.4 细胞的培养及处理 | 第25-30页 |
1.1.5 细胞内容物的代谢产物检测 | 第30-31页 |
1.1.6 细胞内基因实时定量PCR分析 | 第31-34页 |
1.1.7 DNA甲基化特异型分析实验 | 第34页 |
1.1.8 统计分析 | 第34页 |
1.2 结果 | 第34-41页 |
1.2.1 5-AZA诱导的DNA去甲基化影响AA代谢通路间平衡 | 第34-38页 |
1.2.2 5-AZA调控AA代谢酶的基因表达水平 | 第38-39页 |
1.2.3 5-AZA影响AA代谢酶的表达不是内皮细胞特异性的 | 第39-41页 |
1.3 讨论 | 第41-42页 |
1.3.1 代谢组学研究AA代谢的意义 | 第41页 |
1.3.2 DNA甲基化对AA代谢酶的作用 | 第41-42页 |
1.3.3 AA代谢产物对血管的影响 | 第42页 |
1.4 小结 | 第42-43页 |
二、DNA甲基化特异性分析验证甲基化状态改变 | 第43-54页 |
2.1 对象和方法 | 第43-50页 |
2.1.1 主要仪器 | 第43页 |
2.1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第44-46页 |
2.1.4 细胞的培养与处理 | 第46-47页 |
2.1.5 DNA的甲基化特异性PCR分析 | 第47-49页 |
2.1.6 相关的分子生物学实验 | 第49-50页 |
2.1.7 统计分析 | 第50页 |
2.2 结果 | 第50-53页 |
2.2.1 生物学分析TBXAS1的启动子区CpG岛的含量 | 第50-51页 |
2.2.2 BSP验证TBXAS1的启动子区甲基化状态改变 | 第51-52页 |
2.2.3 生物学分析PTGDS的启动子区CpG岛的含量 | 第52-53页 |
2.2.4 BSP验证PTGDS的启动子区甲基化状态改变 | 第53页 |
2.3 讨论 | 第53页 |
2.4 小结 | 第53-54页 |
三、DNA去甲基化诱导AA代谢紊乱的病理意义 | 第54-65页 |
3.1 对象和方法 | 第54-60页 |
3.1.1 主要仪器 | 第54页 |
3.1.2 主要试剂 | 第54-55页 |
3.1.3 主要试剂配制 | 第55-58页 |
3.1.4 内皮细胞的培养与处理 | 第58页 |
3.1.5 细胞内代谢产物的萃取 | 第58页 |
3.1.6 实时定量PCR分析 | 第58页 |
3.1.7 蛋白电泳与蛋白质印记 | 第58-60页 |
3.1.8 统计分析 | 第60页 |
3.2 结果 | 第60-63页 |
3.2.1 DNA去甲基化诱导内皮细胞的激活 | 第60-62页 |
3.2.2 高同型半胱氨酸 (HCY) 模型中AA代谢谱的改变 | 第62-63页 |
3.3 讨论 | 第63-64页 |
3.4 小结 | 第64-65页 |
四、在体验证DNA甲基化对AA代谢影响 | 第65-72页 |
4.1 对象和方法 | 第65-69页 |
4.1.1 主要仪器 | 第65页 |
4.1.2 主要试剂 | 第65页 |
4.1.3 主要试剂配制 | 第65页 |
4.1.4 动物的饲养与处理 | 第65-66页 |
4.1.5 血浆及组织内代谢产物的萃取 | 第66-67页 |
4.1.6 实时定量PCR分析 | 第67-69页 |
4.1.7 统计分析 | 第69页 |
4.2 结果 | 第69-71页 |
4.2.1 血浆及肝脏内AA代谢产物的检测 | 第69-70页 |
4.2.2 在体检测组织内靶基因的表达水平 | 第70-71页 |
4.3 讨论 | 第71页 |
4.4 小结 | 第71-72页 |
全文讨论 | 第72-75页 |
全文结论 | 第75-76页 |
论文创新点 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-89页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第89-91页 |
综述 | 第91-106页 |
综述参考文献 | 第98-106页 |
致谢 | 第106-107页 |