| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 英文缩写表 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-24页 |
| 1 抗菌肽的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1 抗菌肽概述 | 第13页 |
| 1.2 禽抗菌肽的分类及分布 | 第13-14页 |
| 1.3 禽抗菌肽的功能 | 第14-16页 |
| 2 益生菌与抗菌肽的关系 | 第16-19页 |
| 2.1 益生菌的益生作用 | 第16-17页 |
| 2.2 益生菌诱导抗菌肽的表达 | 第17页 |
| 2.3 益生菌促进抗菌肽表达的菌种特异性 | 第17-18页 |
| 2.4 益生菌的特定组分促进宿主抗菌肽的表达 | 第18-19页 |
| 3 诱导抗菌肽表达的信号转导途径 | 第19-21页 |
| 3.1 Toll-样受体介导的信号转导途径 | 第19-20页 |
| 3.2 NOD样受体与抗菌肽表达 | 第20-21页 |
| 4 本论文研究目的、研究意义、研究内容及技术路线 | 第21-24页 |
| 4.1 研究目的、意义及内容 | 第21-23页 |
| 4.2 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二部分 试验部分 | 第24-55页 |
| 试验一 鼠李糖乳杆菌MLGA细胞壁完整肽聚糖对鸡外周血单核细胞抗菌肽AvBD9、Cath-B1基因表达的影响 | 第24-36页 |
| 1 材料与方法 | 第25-31页 |
| 1.1 试验材料 | 第25-27页 |
| 1.1.1 试验菌株 | 第25页 |
| 1.1.2 主要试验仪器设备 | 第25页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第25-26页 |
| 1.1.4 培养基 | 第26页 |
| 1.1.5 试剂配制 | 第26-27页 |
| 1.2 试验方法与步骤 | 第27-30页 |
| 1.2.1 鼠李糖乳杆菌MLGA的培养 | 第27页 |
| 1.2.2 鼠李糖乳杆菌MLGA细胞壁完整肽聚糖（whole peptidoglycan， WPG）的分离提取 | 第27页 |
| 1.2.3 肽聚糖酶解产物的制备 | 第27-28页 |
| 1.2.4 鸡外周血单核细胞的分离与培养 | 第28页 |
| 1.2.5 鸡外周血单核细胞与鼠李糖乳杆菌MLGA细胞壁完整肽聚糖、肽聚糖酶解产物共培养及AvBD9、Cath-B1 mRNA表达的检测 | 第28页 |
| 1.2.6 外周血单核细胞总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 1.2.7 细胞总RNA反转录 | 第29页 |
| 1.2.8 实时荧光定量RT-PCR | 第29-30页 |
| 1.2.8.1 特异性引物和探针的设计及合成 | 第29-30页 |
| 1.2.8.2 荧光定量PCR | 第30页 |
| 1.3 数据处理及统计分析 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-34页 |
| 2.1 细胞总RNA的提取 | 第31页 |
| 2.2 AvBD9、Cath-B1、TLR2、NOD1、NALP3基因的PCR结果 | 第31-32页 |
| 2.3 不同浓度鼠李糖乳杆菌细胞壁完整肽聚糖及其酶解产物对鸡外周血单核细胞AvBD9 mRNA表达水平的影响 | 第32-33页 |
| 2.4 不同浓度鼠李糖乳杆菌细胞壁完整肽聚糖及其酶解产物对Cath-B1基因表达的影响 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| 4 小结 | 第35-36页 |
| 试验二 鼠李糖乳杆菌MLGA细胞壁完整肽聚糖诱导鸡外周血单核细胞抗菌肽基因表达的信号转导途径 | 第36-55页 |
| 1 材料与方法 | 第37-43页 |
| 1.1 试验材料 | 第37-38页 |
| 1.1.1 主要试验仪器设备 | 第37-38页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 1.2 试验方法与步骤 | 第38-42页 |
| 1.2.1 鼠李糖乳杆菌细胞壁完整肽聚糖与鸡外周血单核细胞共培养 | 第38-39页 |
| 1.2.1.1 鼠李糖乳杆菌细胞壁完整肽聚糖对TLR2、NOD1、NALP3、AvBD9、Cath-B1 mRNA表达的影响 | 第38页 |
| 1.2.1.2 特异性抗体封闭TLR2后，鼠李糖乳杆菌MLGA细胞壁完整肽聚糖对鸡外周血单核细胞抗菌肽AvBD9、Cath-B1、MyD88基因表达的影响 | 第38-39页 |
| 1.2.1.3 特异性抑制剂抑制NOD1后鼠李糖乳杆菌MLGA细胞壁完整肽聚糖对鸡外周血单核细胞抗菌肽AvBD9、Cath-B1基因表达的影响 | 第39页 |
| 1.2.1.4 刺激后细胞总RNA的提取 | 第39页 |
| 1.2.1.5 总RNA反转录 | 第39页 |
| 1.2.2 实时荧光定量RT-PCR检测AvBD9、Cath-B1、TLR2、MyD88、NOD1、NALP3基因表达水平 | 第39-40页 |
| 1.2.2.1 特异性引物和探针的设计及合成 | 第39-40页 |
| 1.2.2.2 实时荧光定量PCR | 第40页 |
| 1.2.3 TLR2、NOD1介导的外周血单核细胞信号通路的研究 | 第40-42页 |
| 1.2.3.1 特异性抗体封闭TLR2后，Western Bolt检测鼠李糖乳杆菌MLGA细胞壁完整肽聚糖刺激鸡外周血单核细胞后对NF-κB和AP-1 通路中相关蛋白的影响 | 第40-41页 |
| 1.2.3.2 特异性抑制剂抑制NOD1后，Western Bolt检测鼠李糖乳杆菌MLGA细胞壁完整肽聚糖刺激鸡外周血单核细胞后对NF-κB和AP-1 通路中相关蛋白的影响 | 第41页 |
| 1.2.3.3 信号通路阻断实验 | 第41页 |
| 1.2.3.4 蛋白质提取 | 第41页 |
| 1.2.3.5 核蛋白质定量 | 第41-42页 |
| 1.2.3.6 Wetern Bolt（WB）检测 | 第42页 |
| 1.3 数据处理及统计分析 | 第42-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-49页 |
| 2.1 TLR2、NOD1、NALP3、MyD88基因PCR结果图 | 第43-44页 |
| 2.2 鼠李糖乳杆菌细胞壁完整肽聚糖对鸡外周血单核细胞AvBD9、Cath-B1、TLR2、NOD1、NALP3 mRNA表达的影响 | 第44页 |
| 2.3 特异性抗体封闭TLR2后鼠李糖乳杆菌细胞壁完整肽聚糖对鸡外周血单核细胞抗菌肽AvBD9、Cath-B1、MyD88基因表达的影响 | 第44-46页 |
| 2.4 特异性NOD1抑制剂处理鸡外周血单核细胞后鼠李糖乳杆菌MLGA细胞壁完整肽聚糖对其抗菌肽AvBD9、Cath-B1基因表达的影响 | 第46-48页 |
| 2.5 特异性抑制剂阻断NF-κB和AP-1 信号通路后鼠李糖乳杆菌细胞壁完整肽聚糖对鸡外周血单核细胞抗菌肽AvBD9、Cath-B1基因表达的影响 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-54页 |
| 4 小结 | 第54-55页 |
| 全文总结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
