| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第14-33页 |
| 1.1 流感概述 | 第14-19页 |
| 1.1.1 流行病学 | 第14-15页 |
| 1.1.2 病原学 | 第15-17页 |
| 1.1.3 流感病毒感染后宿主细胞的反应 | 第17-19页 |
| 1.2 流感疫苗研究进展 | 第19-30页 |
| 1.2.1 灭活流感疫苗 | 第19-21页 |
| 1.2.2 流感减毒活疫苗 | 第21页 |
| 1.2.3 DNA疫苗 | 第21-22页 |
| 1.2.4 基因重组活载体疫苗 | 第22-23页 |
| 1.2.5 通用流感疫苗 | 第23页 |
| 1.2.6 病毒样颗粒 | 第23-30页 |
| 1.3 霍乱毒素B亚基、蓖麻毒素B亚基及葡萄球菌肠毒素A的佐剂效应概述 | 第30-33页 |
| 1.3.1 霍乱毒素B亚基 | 第30页 |
| 1.3.2 蓖麻毒素B亚基 | 第30-31页 |
| 1.3.3 葡萄球菌肠毒素A | 第31-33页 |
| 2 2009甲型H1N1及嵌合CTB、RTB流感病毒样颗粒构建与鉴定 | 第33-54页 |
| 2.1 材料 | 第33-34页 |
| 2.1.1 病毒、细胞、载体和动物 | 第33页 |
| 2.1.2 常用试剂 | 第33页 |
| 2.1.3 昆虫细胞培养用品 | 第33页 |
| 2.1.4 仪器与设备 | 第33-34页 |
| 2.2 方法 | 第34-45页 |
| 2.2.1 HA、NA、M1重组杆状病毒质粒的构建与鉴定 | 第34-37页 |
| 2.2.2 HA、NA、M1重组杆状病毒的获得与鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.3 2009甲型H1N1流感病毒样颗粒的制备及纯化 | 第38-39页 |
| 2.2.4 2009甲型H1N1流感病毒样颗粒的鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.5 CTB、RTB融合基因的设计 | 第40页 |
| 2.2.6 CTB、RTB重组杆状病毒质粒的构建及鉴定 | 第40-42页 |
| 2.2.7 CTB、RTB重组杆状病毒的获得及鉴定 | 第42-43页 |
| 2.2.8 嵌合CTB、RTB流感病毒样颗粒的制备及纯化 | 第43-44页 |
| 2.2.9 嵌合CTB、RTB流感病毒样颗粒的鉴定 | 第44-45页 |
| 2.3 结果 | 第45-52页 |
| 2.3.1 A/changchun/01/2009(H1N1)毒株的HA、NA及M1基因扩增结果 | 第45页 |
| 2.3.2 HA、NA、M1重组质粒鉴定结果 | 第45-46页 |
| 2.3.3 重组杆状病毒rBV-HA、rBV-NA及rBV-M1鉴定结果 | 第46页 |
| 2.3.4 重组杆状病毒rBV-HA、rBV-NA及rBV-M1滴度的测定 | 第46-47页 |
| 2.3.5 2009甲型H1N1流感病毒样颗粒的鉴定结果 | 第47-48页 |
| 2.3.6 表达CTB、RTB融合基因扩增结果 | 第48-49页 |
| 2.3.7 表达CTB、RTB融合基因重组质粒的鉴定结果 | 第49页 |
| 2.3.8 CTB、RTB重组杆状病毒鉴定结果 | 第49-50页 |
| 2.3.9 重组杆状病毒滴度的测定 | 第50页 |
| 2.3.10 嵌合CTB、RTB流感病毒样颗粒的鉴定结果 | 第50-52页 |
| 2.4 讨论 | 第52-53页 |
| 2.5 小结 | 第53-54页 |
| 3 2009甲型H1N1及嵌合CTB、RTB流感病毒样颗粒的小鼠实验免疫研究 | 第54-63页 |
| 3.1 材料 | 第54页 |
| 3.1.1 病毒和细胞 | 第54页 |
| 3.1.2 实验动物 | 第54页 |
| 3.1.3 常用试剂 | 第54页 |
| 3.1.4 仪器与设备 | 第54页 |
| 3.2 方法 | 第54-57页 |
| 3.2.1 免疫与攻毒 | 第54-55页 |
| 3.2.2 IgG、IgA特异性抗体的检测 | 第55页 |
| 3.2.3 血凝抑制抗体效价检测 | 第55-56页 |
| 3.2.4 中和抗体检测 | 第56页 |
| 3.2.5 小鼠肺脏病毒滴度的测定 | 第56页 |
| 3.2.6 小鼠脾淋巴细胞的分离 | 第56页 |
| 3.2.7 IFN-γ和IL-4酶联免疫斑点检测 | 第56-57页 |
| 3.2.8 统计学分析 | 第57页 |
| 3.3 结果 | 第57-61页 |
| 3.3.1 IgG特异性抗体的检测结果 | 第57页 |
| 3.3.2 黏膜IgA、IgG特异性抗体的检测结果 | 第57-58页 |
| 3.3.3 血凝抑制抗体检测结果 | 第58页 |
| 3.3.4 微量中和抗体检测结果 | 第58-59页 |
| 3.3.5 脾淋巴细胞ELISpot细胞因子检测结果 | 第59页 |
| 3.3.6 小鼠攻毒试验结果 | 第59-60页 |
| 3.3.7 小鼠肺脏病毒滴度检测结果 | 第60-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-62页 |
| 3.5 小结 | 第62-63页 |
| 4 嵌合SEA流感病毒样颗粒构建与鉴定 | 第63-72页 |
| 4.1 材料 | 第63-64页 |
| 4.1.1 病毒、细胞、载体和动物 | 第63页 |
| 4.1.2 常用试剂 | 第63页 |
| 4.1.3 昆虫细胞培养用品 | 第63页 |
| 4.1.4 仪器与设备 | 第63-64页 |
| 4.2 方法 | 第64-66页 |
| 4.2.1 融合基因的设计 | 第64页 |
| 4.2.2 重组杆状病毒质粒的构建及鉴定 | 第64-65页 |
| 4.2.3 重组杆状病毒的获得及鉴定 | 第65页 |
| 4.2.4 嵌合SEA流感病毒样颗粒的制备及纯化 | 第65-66页 |
| 4.2.5 嵌合SEA流感病毒样颗粒的鉴定 | 第66页 |
| 4.3 结果 | 第66-70页 |
| 4.3.1 表达SEA融合基因扩增结果 | 第66-67页 |
| 4.3.2 表达SEA融合基因重组质粒的鉴定结果 | 第67页 |
| 4.3.3 重组杆状病毒鉴定结果 | 第67-68页 |
| 4.3.4 重组杆状病毒滴度的测定 | 第68页 |
| 4.3.5 嵌合CTB、RTB流感病毒样颗粒的鉴定结果 | 第68-70页 |
| 4.4 讨论 | 第70-71页 |
| 4.5 小结 | 第71-72页 |
| 5 嵌合SEA流感病毒样颗粒的小鼠实验免疫研究 | 第72-79页 |
| 5.1 材料 | 第72页 |
| 5.1.1 病毒和细胞 | 第72页 |
| 5.1.2 实验动物 | 第72页 |
| 5.1.3 常用试剂 | 第72页 |
| 5.1.4 仪器与设备 | 第72页 |
| 5.2 方法 | 第72-74页 |
| 5.2.1 免疫与攻毒 | 第72-73页 |
| 5.2.2 IgG特异性抗体的检测 | 第73页 |
| 5.2.3 血凝抑制抗体效价检测 | 第73页 |
| 5.2.4 中和抗体检测 | 第73-74页 |
| 5.2.5 小鼠肺脏病毒滴度的测定 | 第74页 |
| 5.3 结果 | 第74-77页 |
| 5.3.1 IgG特异性抗体的检测结果 | 第74页 |
| 5.3.2 血凝抑制抗体检测结果 | 第74-75页 |
| 5.3.3 微量中和抗体检测结果 | 第75页 |
| 5.3.4 小鼠攻毒试验结果 | 第75-76页 |
| 5.3.5 小鼠肺脏病毒滴度检测结果 | 第76-77页 |
| 5.4 讨论 | 第77-78页 |
| 5.5 小结 | 第78-79页 |
| 6 结论 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-99页 |
| 作者简介 | 第99-100页 |
