| 缩略词表 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 干扰素的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.1 IFN-γ的生物活性 | 第11-12页 |
| 1.2 ChIFN-γ的研究进展 | 第12-17页 |
| 1.2.1 ChIFN-γ在家禽上的抗虫作用 | 第13页 |
| 1.2.2 ChIFN-γ在植物中的抗虫作用 | 第13页 |
| 1.2.3 CAF1的生物学功能 | 第13-15页 |
| 1.2.4 COP9的生物学功能 | 第15-16页 |
| 1.2.5 HD的生物学功能 | 第16页 |
| 1.2.6 植物激素与抗虫性 | 第16-17页 |
| 1.3 植物抗虫性研究 | 第17-19页 |
| 1.3.1 形态结构与抗虫 | 第18页 |
| 1.3.2 特殊物质与抗虫 | 第18-19页 |
| 1.4 抗虫基因的来源 | 第19-20页 |
| 1.4.1 微生物来源的抗虫基因 | 第19页 |
| 1.4.2 植物来源的抗虫基因 | 第19-20页 |
| 1.4.3 动物来源的抗虫基因 | 第20页 |
| 1.5 蛋白质相互作用技术及其应用 | 第20-21页 |
| 1.5.1 蛋白质相互作用的概述 | 第20-21页 |
| 1.6 蛋白质相互作用技术 | 第21-22页 |
| 1.6.1 酵母双杂交系统 | 第21页 |
| 1.6.2 双分子荧光互补 | 第21-22页 |
| 1.6.3 等温滴定微量热 | 第22页 |
| 1.6.4 GST – pull down | 第22页 |
| 1.7 本研究的目的及意义 | 第22-25页 |
| 第二章 目的蛋白的原核表达及纯化 | 第25-61页 |
| 2.1 材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 菌株 | 第25页 |
| 2.1.2 载体 | 第25页 |
| 2.1.3 PCR引物 | 第25-26页 |
| 2.2 实验仪器 | 第26页 |
| 2.3 试剂 | 第26-31页 |
| 2.3.1 主要试剂及试剂盒 | 第26-27页 |
| 2.3.2 主要溶液的配制 | 第27-31页 |
| 2.4 实验方法 | 第31-45页 |
| 2.4.1 菌株的活化与检测 | 第31-34页 |
| 2.4.2 HD、CAF1、Cop8基因片段的胶回收 | 第34-35页 |
| 2.4.3 HD、CAF1、Cop8基因片段和pET28a的酶切 | 第35-37页 |
| 2.4.4 HD、CAF1、Cop8基因片段与pET28a的连接和转化 | 第37-38页 |
| 2.4.5 菌落PCR和质粒PCR鉴定重组质粒pET28a-HD、pET28a--CAF1、pET28a-Cop8 | 第38页 |
| 2.4.6 重组质粒pET28a-HD、pET28a-CAF1、pET28a-Cop8的双酶切鉴定 | 第38-40页 |
| 2.4.7 重组蛋白pET28a-HD、pET28a-CAF1、pET28a-Cop8的诱导表达 | 第40页 |
| 2.4.8 SDS-PAGE检测目的蛋白 | 第40-41页 |
| 2.4.9 HD、CAF1基因与pET30a的构建 | 第41页 |
| 2.4.10 重组蛋白pET30a-HD、pET30a-CAF1的诱导表达 | 第41-42页 |
| 2.4.11 重组蛋白 pET28a-Cop8、pET30a-HD、pET30a-CAF1 的纯化 | 第42页 |
| 2.4.12 包涵体可溶性蛋白的复性 | 第42-43页 |
| 2.4.13 目的蛋白浓度的测定 | 第43-44页 |
| 2.4.14 目的蛋白纯度的检测 | 第44页 |
| 2.4.15 Western Blot检测目的蛋白 | 第44-45页 |
| 2.5 结果与分析 | 第45-59页 |
| 2.5.1 菌落PCR鉴定重组质粒pET28a-CAF1、pET28a-Cop8和pET28a-HD | 第45-46页 |
| 2.5.2 质粒PCR检测重组质粒pET28a-CAF1、pET28a-Cop8和pET28a-HD | 第46-47页 |
| 2.5.3 双酶切鉴定重组质粒pET28a-CAF1、pET28a-Cop8和pET28a--HD | 第47-48页 |
| 2.5.4 重组蛋白pET28a-CAF1、pET28a-Cop8、pET28a-HD的诱导表达 | 第48-49页 |
| 2.5.5 重组质粒pET30a-CAF1、pET30a-HD的双酶切鉴定 | 第49-50页 |
| 2.5.6 重组蛋白pET30a-CAF1、pET30a-HD的诱导表达 | 第50-51页 |
| 2.5.7 Cop8蛋白的纯化 | 第51-53页 |
| 2.5.8 HD包涵体的纯化 | 第53-54页 |
| 2.5.9 CAF1蛋白纯化 | 第54-55页 |
| 2.5.10 HD蛋白、Cop8蛋白浓度的测定 | 第55-56页 |
| 2.5.11 CAF1蛋白浓度的测定 | 第56-57页 |
| 2.5.12 HD、Cop8、CAF1蛋白纯度的检测 | 第57-58页 |
| 2.5.13 HD、Cop8、CAF1蛋白的Western Blot检测 | 第58-59页 |
| 2.6 结果与讨论 | 第59-61页 |
| 第三章 目的蛋白与ChIFN-γ的互作研究 | 第61-68页 |
| 3.1 材料 | 第61页 |
| 3.1.1 实验材料及试剂 | 第61页 |
| 3.2 试验方法 | 第61-62页 |
| 3.3 结果与分析 | 第62-66页 |
| 3.3.1 ChIFN-γ蛋白与HD蛋白的互作 | 第62-64页 |
| 3.3.2 ChIFN-γ蛋白与Cop8蛋白的互作 | 第64-65页 |
| 3.3.3 ChIFN-γ蛋白与CAF1蛋白的互作 | 第65-66页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第66-68页 |
| 第四章 结论与展望 | 第68-69页 |
| 4.1 结论 | 第68页 |
| 4.2 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-76页 |
