| 中文摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 符号说明 | 第17-19页 |
| 1. 前言 | 第19-27页 |
| 1.1 胃癌干细胞研究进展 | 第19-20页 |
| 1.2 长链非编码RNA研究进展 | 第20-23页 |
| 1.3 胃癌患者表达上调的lncRNA及其功能 | 第23-25页 |
| 1.3.1 SPRY4—IT1(SPRY4—IT1 intronic transcript 1) | 第23页 |
| 1.3.2 CCAT2(colon cancer associated transcript 2) | 第23-24页 |
| 1.3.3 linc-UBC1(up-regulated in bladder cancer 1) | 第24页 |
| 1.3.4 CCAT1(colon cancer associated transcript 1) | 第24页 |
| 1.3.5 LSINCT5(long stress-induced non-coding transcript 5) | 第24页 |
| 1.3.6 GAPLINC(gastric adenocarcinoma predictive long intergenic noncoding RNA) | 第24-25页 |
| 1.3.7 PVT1(plasmacytoma variant translocation 1) | 第25页 |
| 1.4 胃癌患者表达下调的lncRNA及其功能 | 第25-26页 |
| 1.4.1 TUSC7(tumor suppressor candidate 7) | 第25页 |
| 1.4.2 NPTN-IT1(NPTN intronic transcript 1) | 第25页 |
| 1.4.3 LEIGC | 第25-26页 |
| 1.4.4 AC138128.1 | 第26页 |
| 1.4.5 FENDRR(FOX1 adjacent non-coding development regulatory RNA) | 第26页 |
| 1.5 总结 | 第26-27页 |
| 2. 实验材料 | 第27-32页 |
| 2.1 质粒 | 第27页 |
| 2.2 菌株 | 第27页 |
| 2.3 细胞 | 第27页 |
| 2.4 试剂 | 第27-29页 |
| 2.4.1 工具酶、分子量标准Markers | 第27页 |
| 2.4.2 抗体 | 第27页 |
| 2.4.3 引物 | 第27-28页 |
| 2.4.4 试剂盒 | 第28页 |
| 2.4.5 其他生化试剂 | 第28-29页 |
| 2.5 仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.6 主要溶液的配制 | 第30-31页 |
| 2.6.1 Western Blot试剂 | 第30页 |
| 2.6.2 RPMI-1640培养基(含10%胎牛血清的RPMI-1640完全培养基) | 第30-31页 |
| 2.6.3 PBS磷酸盐缓冲液 | 第31页 |
| 2.6.4 细胞消化液(0.25%胰酶+0.02%EDTA) | 第31页 |
| 2.6.5 细胞冻存液 | 第31页 |
| 2.6.6 4%多聚甲醛 | 第31页 |
| 2.7 组织标本 | 第31-32页 |
| 3. 实验方法 | 第32-42页 |
| 3.1 常规实验方法 | 第32页 |
| 3.2 细胞培养 | 第32-33页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第32页 |
| 3.2.2 细胞的传代 | 第32-33页 |
| 3.2.3 细胞冻存 | 第33页 |
| 3.2.4 细胞复苏 | 第33页 |
| 3.3 细胞转染 | 第33-35页 |
| 3.3.1 质粒转染真核细胞 | 第33-34页 |
| 3.3.2 siRNA转染真核细胞 | 第34-35页 |
| 3.4 反转录、聚合酶链式反应和实时荧光定量PCR | 第35-37页 |
| 3.4.1 细胞总RNA提取 | 第35-36页 |
| 3.4.2 逆转录反应合成cDNA | 第36页 |
| 3.4.3 实时荧光定量PCR扩增目的基因 | 第36-37页 |
| 3.5 蛋白质印迹 | 第37-38页 |
| 3.6 免疫荧光实验 | 第38-39页 |
| 3.7 CCK-8细胞增殖实验 | 第39-40页 |
| 3.7.1 细胞活性检测 | 第39页 |
| 3.7.2 制作标准曲线 | 第39-40页 |
| 3.8 Transwell侵袭实验 | 第40页 |
| 3.9 流式细胞术检测 | 第40-41页 |
| 3.10 统计学分析 | 第41-42页 |
| 4. 实验结果 | 第42-53页 |
| 4.1 胃癌干细胞的分选与鉴定,以及其中lncRNA ROR的表达情况 | 第42-45页 |
| 4.1.1 胃癌干细胞的分选与鉴定 | 第42-43页 |
| 4.1.2 胃癌干细胞中lncRNA ROR的表达情况 | 第43-45页 |
| 4.2 探究lncRNA ROR对胃癌干细胞增殖、侵袭和凋亡能力的影响 | 第45-50页 |
| 4.2.1 lncRNA ROR对胃癌干细胞增殖的影响 | 第45-47页 |
| 4.2.2 lncRNA ROR对胃癌干细胞侵袭能力的影响 | 第47-49页 |
| 4.2.3 lncRNA ROR对胃癌干细胞凋亡的影响 | 第49-50页 |
| 4.3 探究lncRNA ROR对胃癌干细胞特性的影响 | 第50-53页 |
| 4.3.1 CD133-细胞中过表达lncRNA ROR对胃癌干细胞特性的影响 | 第50-52页 |
| 4.3.2 CD133+细胞中敲低lncRNA ROR对胃癌干细胞特性的影响 | 第52-53页 |
| 5. 讨论 | 第53-59页 |
| 6. 结论 | 第59-61页 |
| 7. 参考文献 | 第61-70页 |
| 8. 致谢 | 第70-71页 |
| 9. 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第71-72页 |
| 10. 学位论文评阅及答辩情况 | 第72-73页 |
| 11. 外文论文 | 第73-101页 |
