摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 引言 | 第8-34页 |
1.1 MicroRNA的检测方法 | 第8-26页 |
1.1.1 Northern印迹法 | 第8-9页 |
1.1.2 微阵列芯片技术(microarray) | 第9-10页 |
1.1.3 茎环-反转录-聚合酶链式反应(stem-loop RT-PCR) | 第10-12页 |
1.1.4 基于碱基堆积作用的实时定量PCR | 第12-13页 |
1.1.5 基于探针连接的聚合酶链式反应 | 第13-14页 |
1.1.6 链替代扩增(SDA)检测microRNA | 第14-15页 |
1.1.7 滚环扩增(RCA)检测microRNA | 第15-16页 |
1.1.8 环介导等温扩增技术(LAMP)检测microRNA | 第16-18页 |
1.1.9 恒温指数扩增技术(IEXPAR)检测microRNA | 第18-19页 |
1.1.10 连接酶链式反应(LCR)检测microRNA | 第19-21页 |
1.1.11 基于体积编码的聚合酶链式反应(SL-PCR)检测microRNA | 第21-22页 |
1.1.12 分子信标法检测microRNA | 第22-25页 |
1.1.13 基于阳离子共轭聚合物的microRNA检测 | 第25-26页 |
1.2 单细胞中microRNA的分析方法 | 第26-29页 |
1.2.1 基于反转录的分析方法检测单细胞中的microRNA | 第26-27页 |
1.2.2 基于原位杂交的分析方法检测单细胞中的microRNA | 第27页 |
1.2.3 基于单球成像分析方法检测单细胞中的microRNA | 第27-29页 |
1.3 聚合酶链式反应(PCR) | 第29-30页 |
1.4 微滴式数字PCR技术(ddPCR) | 第30-33页 |
1.4.1 数字PCR(dPCR)概述 | 第30-32页 |
1.4.2 微滴式数字PCR(ddPCR)概述 | 第32-33页 |
1.5 选题目的及意义 | 第33-34页 |
第二章 基于连接反应的微滴式数字PCR检测单细胞中mioroRNA | 第34-53页 |
2.1 前言 | 第34-35页 |
2.2 实验部分 | 第35-39页 |
2.2.1 仪器与试剂 | 第35-36页 |
2.2.2 实验方法 | 第36-39页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第39-51页 |
2.3.1 实验原理 | 第39-41页 |
2.3.2 连接反应中探针A和探针B的浓度对microRNA检测影响 | 第41-42页 |
2.3.3 ddPCR扩增过程中循环数对microRNA检测的影响 | 第42-43页 |
2.3.4 连接反应温度的优化 | 第43-44页 |
2.3.5 检测microRNA的校正曲线和线性范围 | 第44-46页 |
2.3.6 MicroRNA检测的特异性 | 第46-47页 |
2.3.7 检测microRNA的通用性 | 第47页 |
2.3.8 ddPCR反应中细微浓度变化的准确检测 | 第47-49页 |
2.3.9 单细胞中microRNA的检测 | 第49-50页 |
2.3.10 ddPCR信号特异性依赖于连接反应 | 第50-51页 |
2.4 本章小结 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-64页 |
致谢 | 第64-66页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第66页 |