| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-22页 |
| ·代谢工程与合成生物学 | 第14-15页 |
| ·代谢工程简介 | 第14页 |
| ·合成生物学简介 | 第14-15页 |
| ·基于合成生物学的代谢工程 | 第15页 |
| ·阿维菌素 | 第15-19页 |
| ·阿维菌素简介 | 第15-17页 |
| ·阿维菌素的生物合成 | 第17页 |
| ·阿维菌素代谢工程的研究 | 第17-19页 |
| ·乙酰乳酸合酶 | 第19-21页 |
| ·乙酰乳酸合酶简介 | 第19页 |
| ·大肠杆菌的乙酰乳酸合酶 | 第19-20页 |
| ·阿维链霉菌中的乙酰乳酸合酶 | 第20-21页 |
| ·论文研究的意义、内容 | 第21-22页 |
| 第2章 前体添加实验 | 第22-34页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第22-24页 |
| ·实验试剂和试剂盒 | 第24页 |
| ·设备仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·阿维菌素的发酵工艺 | 第24-25页 |
| ·阿维链霉菌发酵液的氨基酸检测 | 第25页 |
| ·前体添加实验的发酵工艺及检测方法 | 第25-27页 |
| ·实验结果与分析 | 第27-31页 |
| ·阿维链霉菌发酵液的氨基酸检测 | 第27-28页 |
| ·前体添加对发酵液中pH的影响 | 第28-29页 |
| ·前体添加对发酵液中生物量的影响 | 第29-30页 |
| ·前体添加对阿维菌素产量的影响 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-34页 |
| 第3章 阿维链霉菌tdh基因以及ilvB系列基因的敲除载体的构建 | 第34-50页 |
| ·实验材料 | 第34-39页 |
| ·菌株及质粒 | 第34-35页 |
| ·引物 | 第35-37页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第37-38页 |
| ·实验试剂和试剂盒 | 第38-39页 |
| ·设备仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-45页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第39页 |
| ·目的基因的获取 | 第39-42页 |
| ·克隆载体的构建 | 第42-43页 |
| ·敲除载体的构建 | 第43-45页 |
| ·实验结果与分析 | 第45-49页 |
| ·目的基因的获取 | 第45-46页 |
| ·克隆载体的构建 | 第46-47页 |
| ·敲除载体的构建 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 第4章 阿维链霉菌tdh基因以及ilvB系列基因的敲除 | 第50-62页 |
| ·实验材料 | 第50-53页 |
| ·菌株及质粒 | 第50页 |
| ·引物 | 第50-51页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第51-53页 |
| ·实验试剂和试剂盒 | 第53页 |
| ·设备仪器 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| ·大肠杆菌-链霉菌之间的结合转移实验 | 第53-54页 |
| ·阳性菌落的传代筛选与验证 | 第54-55页 |
| ·基因敲除的阿维链霉菌的发酵检测 | 第55-56页 |
| ·实验结果与分析 | 第56-60页 |
| ·大肠杆菌-链霉菌之间的结合转移实验 | 第56页 |
| ·阳性菌落的传代筛选与验证 | 第56-57页 |
| ·基因敲除的阿维链霉菌的发酵检测 | 第57-60页 |
| ·本章小结 | 第60-62页 |
| 第5章 阿维链霉菌ilvH基因的定点突变与过表达载体的构建 | 第62-82页 |
| ·实验材料 | 第62-66页 |
| ·菌株及质粒 | 第62-63页 |
| ·引物 | 第63-64页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第64-65页 |
| ·实验试剂和试剂盒 | 第65-66页 |
| ·设备仪器 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-75页 |
| ·目的基因的获取 | 第66-69页 |
| ·基因ilvH定点突变载体的构建 | 第69-73页 |
| ·基因ilvH过表达载体的构建 | 第73-75页 |
| ·实验结果与分析 | 第75-79页 |
| ·目的基因的获取 | 第75-76页 |
| ·基因ilvH定点突变载体的构建 | 第76-79页 |
| ·基因ilvH过表达载体的构建 | 第79页 |
| ·本章小结 | 第79-82页 |
| 第6章 阿维链霉菌ilvH基因的定点突变与过表达 | 第82-94页 |
| ·实验材料 | 第82-85页 |
| ·菌株及质粒 | 第82页 |
| ·引物 | 第82-83页 |
| ·培养基 | 第83-84页 |
| ·实验试剂和试剂盒 | 第84-85页 |
| ·设备仪器 | 第85页 |
| ·实验方法 | 第85-87页 |
| ·基因ilvH突变及过表达的阿维链霉菌的构建 | 第85-87页 |
| ·ilvH基因改造后的阿维链霉菌的发酵检测 | 第87页 |
| ·实验结果与分析 | 第87-92页 |
| ·基因ilvH突变及过表达的阿维链霉菌的构建 | 第87-89页 |
| ·基因ilvH突变的阿维链霉菌的发酵检测 | 第89-91页 |
| ·基因ilvH过表达的阿维链霉菌的发酵检测 | 第91-92页 |
| ·本章小结 | 第92-94页 |
| 总结和展望 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
| 在学期间主要研究成果 | 第104页 |
