| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 本论文常用中英文缩写词 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-19页 |
| 引言 | 第19-21页 |
| 1 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·菌株、质粒与细胞 | 第21页 |
| ·酶类与主要试剂(盒) | 第21页 |
| ·主要溶液与培养基的制备 | 第21-24页 |
| ·细胞培养所用溶液 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用试剂 | 第22页 |
| ·制备感受态细胞所需溶液 | 第22-23页 |
| ·蛋白电泳检测所需溶液 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)的培养与保存 | 第24页 |
| ·EPC细胞的复苏 | 第24页 |
| ·EPC细胞的传代 | 第24页 |
| ·EPC细胞的冻存 | 第24页 |
| ·拟态弧菌黏附特性研究 | 第24-26页 |
| ·细菌培养与计数 | 第24页 |
| ·细菌对EPC细胞的黏附动力学测定 | 第24-25页 |
| ·细菌对EPC细胞的黏附性测定 | 第25页 |
| ·化学因子对拟态弧菌黏附性的影响 | 第25-26页 |
| ·OmpU基因荧光原核表达质粒的构建与表达 | 第26-28页 |
| ·荧光原核表达质粒pET-32a-EGFP-OmpU的构建 | 第26-27页 |
| ·EGFP基因的PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·重组融合蛋白的诱导表达与纯化 | 第27-28页 |
| ·OmpU蛋白的黏附功能鉴定 | 第28-29页 |
| ·间接免疫荧光法鉴定OmpU蛋白的黏附功能 | 第28-29页 |
| ·EGFP-OmpU融合蛋白与EPC细胞的结合试验 | 第29页 |
| ·抗rOmpU蛋白抗体的黏附抑制试验 | 第29页 |
| ·OmpU蛋白的受体结合域确定 | 第29-32页 |
| ·OmpU蛋白表位肽的合成与荧光标记 | 第29-30页 |
| ·表位肽与EPC细胞特异性结合的FACS检测 | 第30页 |
| ·标记表位肽与未标记表位肽对EPC细胞结合的竞争试验 | 第30-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-45页 |
| ·EPC细胞的培养 | 第32-33页 |
| ·拟态弧菌的黏附特性 | 第33-34页 |
| ·拟态弧菌的黏附动力学 | 第33页 |
| ·拟态弧菌的黏附特性 | 第33-34页 |
| ·化学因子对拟态弧菌黏附性的影响 | 第34页 |
| ·OmpU基因荧光原核表达质粒的构建与表达 | 第34-39页 |
| ·EGFP基因的PCR扩增 | 第34页 |
| ·OmpU基因荧光原核表达质粒的鉴定 | 第34-37页 |
| ·重组工程菌的荧光性检测 | 第37-39页 |
| ·重组融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第39页 |
| ·OmpU蛋白的黏附功能 | 第39-40页 |
| ·间接免疫荧光法鉴定OmpU蛋白的黏附功能 | 第39-40页 |
| ·rEGFP-OmpU与EPC细胞的结合性 | 第40页 |
| ·OmpU蛋白受体结合域的确定 | 第40-45页 |
| ·OmpU蛋白表位肽与EPC细胞结合的FACS分析 | 第40页 |
| ·标记表位肽与表位肽对EPC细胞结合的竞争 | 第40-45页 |
| 3 讨论 | 第45-48页 |
| ·上皮细胞系的选择与EPC细胞黏附模型的建立 | 第45-46页 |
| ·拟态弧菌黏附素鉴定方法的确立 | 第46页 |
| ·流式细胞术在受体结合域确定中的应用 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 | 第55-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |
