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猪圆环病毒2型Cap蛋白基因在毕赤酵母中的表达与复合水佐剂的研制

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 猪圆环病毒病诊断与疫苗研究进展第11-37页
 1 病原学第11-16页
   ·病毒形态第11-12页
   ·病毒基因组与编码蛋白第12-14页
   ·病毒致病性第14-15页
   ·PCV2传播第15-16页
 2 诊断技术第16-19页
   ·病原学诊断第16-18页
   ·血清学诊断第18-19页
 3 免疫防控第19-26页
   ·全病毒灭活疫苗第20-21页
   ·单位疫苗第21-23页
   ·活载体疫苗第23页
   ·基因疫苗第23页
   ·弱毒疫苗第23-24页
   ·PCV2疫苗佐剂第24-26页
 参考文献第26-37页
第二章 猪圆环病毒2型灭活疫苗新型复合水性佐剂的研制第37-55页
 1 材料与方法第38-42页
   ·病毒、实验动物和主要试剂第38页
   ·比较CP、CPH、CPT的佐剂效果第38-40页
   ·CPH佐剂中H蛋白的最适比例第40页
   ·CPH佐剂与商品佐剂的比较第40页
   ·CPH佐剂疫苗猪体免疫保护试验第40-42页
   ·数据的统计与分析第42页
 2 结果第42-49页
   ·不同佐剂免疫效果的比较第42-44页
   ·CPH佐剂中H蛋白最适浓度的筛选第44-45页
   ·CPH佐剂与商品佐剂的比较第45-46页
   ·猪体免疫保护试验第46-49页
 3 讨论第49-51页
 参考文献第51-55页
第三章 猪圆环病毒2型Cap蛋白在毕赤酵母中的表达第55-73页
 1 材料与方法第56-63页
   ·主要试剂第56页
   ·引物设计第56-57页
   ·重组质粒的构建第57-60页
   ·重组质粒线性化第60页
   ·酵母GS115菌株感受态的制备第60-61页
   ·重组质粒电转化入酵母感受态第61页
   ·重组酵母菌株的筛选第61页
   ·重组酵母菌株的PCR鉴定第61-62页
   ·目的蛋白诱导表达第62页
   ·表达上清中蛋白浓度测定及浓缩第62-63页
   ·诱导产物的SDS-PAGE分析第63页
   ·诱导上清的Western-blot鉴定第63页
   ·电子显微镜下各蛋白形态特征第63页
 2 结果第63-67页
   ·目的基因的扩增第63-64页
   ·重组质粒的鉴定第64-65页
   ·诱导产物SDS-PAGE第65-66页
   ·诱导产物Western-blot鉴定第66-67页
   ·电镜观察第67页
 3 讨论第67-69页
 参考文献第69-73页
第四章 酵母表达Cap蛋白的免疫特性研究第73-85页
 1 材料与方法第74-77页
   ·主要试剂第74页
   ·夹心ELISA方法测定不同蛋白抗原性第74-75页
   ·不同疫苗的配制和小鼠免疫第75页
   ·PCV2特异性ELISA抗体的检测第75-76页
   ·血清中和抗体的检测第76页
   ·淋巴细胞转化增殖实验第76-77页
   ·数据统计与分析第77页
 2 结果第77-80页
   ·夹心ELISA测定不同蛋白结果第77-78页
   ·小鼠血清ELISA抗体水平第78页
   ·血清中和抗体结果第78-79页
   ·小鼠淋巴细胞增殖转化结果第79-80页
 3 讨论第80-82页
 参考文献第82-85页
全文总结第85-87页
附录第87-93页
致谢第93页

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