| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-25页 |
| ·漆酶综述 | 第11-23页 |
| ·漆酶的来源 | 第11-12页 |
| ·漆酶理化性质 | 第12-14页 |
| ·漆酶催化反应机制 | 第14-16页 |
| ·漆酶的底物特性 | 第16-17页 |
| ·漆酶的催化反应介体 | 第17页 |
| ·漆酶的功能 | 第17-19页 |
| ·漆酶的应用 | 第19-22页 |
| ·灵芝漆酶 | 第22-23页 |
| ·研究目的、意义及主要内容 | 第23-25页 |
| ·研究目的与意义 | 第23-24页 |
| ·研究主要内容 | 第24-25页 |
| 第二章 漆酶基因的合成、表达及纯化 | 第25-47页 |
| ·材料 | 第25-29页 |
| ·菌株及质粒 | 第25页 |
| ·主要仪器和设备 | 第25-26页 |
| ·生化试剂 | 第26页 |
| ·酶类 | 第26页 |
| ·主要培养基的配制 | 第26-27页 |
| ·常用缓冲液和试剂的成分及配制 | 第27-29页 |
| ·方法 | 第29-39页 |
| ·利用DNAworks 3.1 软件设计灵芝漆酶引物 | 第29-31页 |
| ·目的基因获取 | 第31-34页 |
| ·重组质粒的提取（参考TIANGEN质粒小提取试剂盒） | 第34-35页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第35页 |
| ·重组质粒的序列测定与分析 | 第35页 |
| ·灵芝漆酶基因异源表达和蛋白纯化 | 第35-37页 |
| ·重组表达载体p PICZα A-Laccase在毕赤酵母中的小量表达 | 第37页 |
| ·灵芝漆酶酶活性检测 | 第37页 |
| ·灵芝漆酶基因胞外表达及蛋白纯化 | 第37-39页 |
| ·结果 | 第39-45页 |
| ·目的基因获取 | 第39-40页 |
| ·重组载体灵芝漆酶构建 | 第40-41页 |
| ·测序 | 第41-44页 |
| ·小量诱导表达灵芝漆酶酶活性检测 | 第44页 |
| ·大量诱导表达灵芝漆酶蛋白的纯化与定量 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 灵芝漆酶酶学性质的研究 | 第47-51页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-49页 |
| ·最适pH | 第48页 |
| ·最适温度 | 第48页 |
| ·pH稳定性 | 第48-49页 |
| ·温度稳定性 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 固定化灵芝漆酶对染料脱色的研究 | 第51-63页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-56页 |
| ·固定化灵芝漆酶的制备 | 第52页 |
| ·固定化灵芝漆酶活性检测 | 第52-53页 |
| ·单因素分析 | 第53-54页 |
| ·PB试验设计 | 第54-55页 |
| ·最陡爬坡试验 | 第55页 |
| ·中心组合设计和响应面分析 | 第55页 |
| ·拟合度试验 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-61页 |
| ·单因素实验 | 第56-58页 |
| ·影响氨基黑 10B脱色的主要因素 | 第58-59页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第59页 |
| ·中心组合设计及响应面分析 | 第59-61页 |
| ·拟合度实验 | 第61页 |
| ·固定化酶的重复利用 | 第61页 |
| ·结论 | 第61-63页 |
| 第五章 总结与展望 | 第63-65页 |
| ·全文总结 | 第63页 |
| ·展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-77页 |
| 附录 | 第77-80页 |
| 附录A: 缩略词（Abbreviations） | 第77-79页 |
| 附录B: 攻读学位期间获得的研究成果 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
