中英文缩略表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
前言 | 第15-21页 |
第一部分 MIR-141调控OP小鼠BMSCS成骨分化机制研究 | 第21-69页 |
实验一 MIR-141(内源性表达)与绝经后骨质疏松症的相关性研究 | 第21-38页 |
1 研究目的 | 第21页 |
2 实验材料 | 第21-22页 |
·实验动物 | 第21页 |
·实验材料和试剂 | 第21页 |
·实验仪器 | 第21-22页 |
3 实验方法 | 第22-26页 |
·PMOP小鼠骨质疏松模型的建立 | 第22页 |
·PMOP小鼠骨质疏松模型的鉴定 | 第22-23页 |
·BMSCs细胞的培养 | 第23页 |
·BMSCs细胞的鉴定 | 第23-24页 |
·BMSCs细胞增殖能力比较 | 第24页 |
·miR-141内源性表达状况 | 第24-26页 |
·统计学处理分析 | 第26页 |
4 实验结果 | 第26-34页 |
·模型鉴定结果 | 第26-29页 |
·BMSCs细胞形态观察及鉴定结果 | 第29-31页 |
·BMSCs细胞生长情况比较结果 | 第31-33页 |
·两组BMSCs中miR-141 mRNA表达检测结果 | 第33-34页 |
5 讨论 | 第34-37页 |
6 小结 | 第37-38页 |
实验二 MIR-141及成骨基因DLX5/MSX2/RUNX2在BMSCs成骨分化过程中的表达情况及变化趋势 | 第38-55页 |
1 研究目的 | 第38页 |
2 实验材料 | 第38-39页 |
·实验细胞 | 第38页 |
·实验动物 | 第38页 |
·实验材料和试剂 | 第38-39页 |
·实验仪器 | 第39页 |
3 实验方法 | 第39-44页 |
·BMSCs细胞的培养、鉴定、增殖能力 | 第39页 |
·BMSCs细胞成骨能力比较 | 第39-40页 |
·实时荧光定量PCR检测miR-141及成骨基因Dlx5、Msx2、Runx2的表达 | 第40-43页 |
·Western Blot检测成骨基因Dlx5、Msx2、Runx2蛋白的表达 | 第43-44页 |
·统计学处理分析 | 第44页 |
4 实验结果 | 第44-51页 |
·BMSCs细胞形态观察及鉴定结果 | 第44-45页 |
·BMSCs细胞成骨能力比较结果 | 第45-51页 |
5 讨论 | 第51-54页 |
6 小结 | 第54-55页 |
实验三 MIR-141调控BMSCs成骨分化过程DLX5/MSx2/RUNX-2信号轴的作用机制 | 第55-69页 |
1 研究目的 | 第55页 |
2 实验材料 | 第55页 |
·实验药物 | 第55页 |
·实验材料和试剂 | 第55页 |
·实验仪器 | 第55页 |
3 实验方法 | 第55-57页 |
·细胞转染 | 第55-56页 |
·转染效率的鉴定 | 第56页 |
·转染对BMSCs成骨分化能力的影响 | 第56页 |
·miR-141靶基因验证(荧光素酶活性检测) | 第56-57页 |
·统计学处理分析 | 第57页 |
4 实验结果 | 第57-65页 |
·转染效率的检测结果 | 第57-60页 |
·转染对BMSCs成骨分化能力的影响结果 | 第60-61页 |
·成骨诱导13天成骨基因和蛋白表达结果 | 第61-65页 |
·miR-141与Dlx5靶基因验证结果 | 第65页 |
5 讨论 | 第65-68页 |
6 小结 | 第68-69页 |
第二部分 健骨颗粒干预OP小鼠BMSCS成骨分化机制研究 | 第69-97页 |
实验四健骨颗粒含药血清干预实验 | 第69-80页 |
1 研究目的 | 第69页 |
2 实验材料 | 第69页 |
·实验药物 | 第69页 |
·实验动物 | 第69页 |
·实验细胞 | 第69页 |
·实验材料和试剂 | 第69页 |
3 实验方法 | 第69-70页 |
·含药血清制备 | 第69页 |
·BMSCs细胞培养和鉴定 | 第69页 |
·健骨颗粒含药血清干预实验 | 第69-70页 |
·统计学处理分析 | 第70页 |
4 实验结果 | 第70-77页 |
·细胞表型鉴定结果 | 第70-71页 |
·健骨颗粒含药血清BMSCs最佳干预浓度选择结果 | 第71页 |
·10%含药血清干预成骨诱导小鼠BMSCs细胞分化的观察结果 | 第71-72页 |
·含药血清干预BMSCs细胞成骨能力比较结果 | 第72-73页 |
·实时荧光定量PCR及Western Blot检测成骨基因、蛋白的表达结果 | 第73-77页 |
5 讨论 | 第77-79页 |
6 小结 | 第79-80页 |
实验五 健骨颗粒在体干预实验 | 第80-97页 |
1 研究目的 | 第80页 |
2 实验材料 | 第80页 |
·实验药物 | 第80页 |
·实验动物 | 第80页 |
·实验材料和试剂 | 第80页 |
·实验仪器 | 第80页 |
3 实验方法 | 第80-84页 |
·建立PMOP小鼠模型 | 第80页 |
·药物干预方法 | 第80-81页 |
·microCT骨组织三维图像及骨质疏松指标检测 | 第81页 |
·骨组织形态学比较 | 第81页 |
·RT-PCR 对骨组织miR-141及成骨基因Dlx5、Msx2、Runx2 mRNA 检测 | 第81-82页 |
·Western Blot法对骨组织DLx5、Msx2、Runx2蛋白的检测 | 第82-84页 |
·统计学处理分析 | 第84页 |
4 结果 | 第84-92页 |
·microCT检测结果 | 第84-88页 |
·骨生物力学实验结果 | 第88-89页 |
·骨组织成骨基因RT-PCR及Western Blot检测结果 | 第89-92页 |
5 讨论 | 第92-96页 |
6 小结 | 第96-97页 |
结论 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-101页 |
附录 | 第101-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
文献综述 | 第106-113页 |
参考文献 | 第110-113页 |
作者简历 | 第113页 |