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脉冲电磁场通过初级纤毛和BMP/BMPRII/Smad1/5/8信号途径促进骨形成的研究

英文缩写词表第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-13页
第1章 绪论第13-19页
   ·脉冲电磁场治疗骨质疏松症的现状第13-15页
     ·电磁场促进骨形成研究进展第13-14页
     ·电磁场治疗骨质疏松机理研究进展第14-15页
   ·初级纤毛结构与功能第15-17页
     ·初级纤毛的基本结构及其发生过程第15-16页
     ·初级纤毛与信号通路第16-17页
   ·BMP-Smad1/5/8 信号通路与骨形成的关系第17页
   ·本课题的研究内容及意义第17-19页
第2章 骨细胞和成骨细胞的比较研究第19-27页
   ·引言第19页
   ·材料与仪器第19-20页
     ·实验动物第19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要仪器第19-20页
   ·实验方法第20-23页
     ·大鼠颅骨成骨细胞的分离与培养第20页
     ·骨细胞的分离培养第20-21页
     ·HE染色分析第21页
     ·Ι 型胶原的免疫组化染色第21页
     ·骨钙素(OC)免疫荧光染色第21-22页
     ·ALP的偶氮偶合法染色第22页
     ·ALP活性测定第22页
     ·Western blot分析第22页
     ·统计学处理第22-23页
   ·结果与分析第23-26页
     ·成骨细胞与骨细胞的镜下形态第23页
     ·成骨细胞与骨细胞HE染色后的形态第23-24页
     ·COL-Ι 免疫组织化学染色结果第24页
     ·骨钙素(OC)免疫荧光染色结果第24页
     ·碱性磷酸酶(ALP)组织化学染色结果第24-25页
     ·碱性磷酸酶的活性检测的结果第25页
     ·Western blotting结果第25-26页
   ·讨论第26-27页
第3章 脉冲电磁场通过BMP-Smad信号通路促进骨形成第27-34页
   ·引言第27页
   ·材料与仪器第27-28页
     ·实验动物第27页
     ·主要试剂第27页
     ·主要实验仪器第27-28页
   ·实验方法第28-29页
     ·成骨细胞的分离培养第28页
     ·实验分组与处理第28页
     ·Western blotting第28页
     ·免疫荧光染色第28页
     ·碱性磷酸酶(ALP)活性的测定第28-29页
     ·茜素红钙化结节染色第29页
     ·统计学处理第29页
   ·结果与分析第29-32页
     ·PEMFs对BMP-2 和Smad1/5/8 及其磷酸化水平的影响第29-30页
     ·PEMFs对p-Smad1/5/8 发生核转位的影响第30页
     ·BMP信号通路阻断剂对成骨细胞ALP活性的影响第30-31页
     ·BMP信号通路阻断剂对成骨相关蛋白表达量的影响第31-32页
     ·BMP信号途径阻断剂对成骨细胞成熟矿化的影响第32页
   ·讨论第32-34页
第4章 脉冲电磁场通过初级纤毛激活BMP-Smad信号通路第34-42页
   ·引言第34页
   ·材料与仪器第34-35页
     ·实验动物第34页
     ·主要药品与试剂第34页
     ·实验仪器第34-35页
   ·实验方法第35-37页
     ·成骨细胞的分离与培养第35页
     ·初级纤毛免疫染色第35页
     ·成骨细胞内IFT88的RNA干扰第35-36页
     ·Real Time RT-PCR分析第36页
     ·western blot检测第36页
     ·统计学处理第36-37页
   ·结果与分析第37-41页
     ·初级纤毛干扰结果第37页
     ·初级纤毛干扰后BMP-2 和Smad1/5/8 及磷酸化水平的变化第37-38页
     ·初级纤毛干扰后p-Smad1/5/8 发生核转位的变化第38-39页
     ·初级纤毛被干扰前后BMPRs表达量的变化第39-40页
     ·初级纤毛干扰前后BMPR与初级纤毛的定位结果第40-41页
   ·讨论第41-42页
第5章 脉冲电磁场促进成骨细胞成熟分化依赖定位于初级纤毛中的BMPRⅡ第42-48页
   ·引言第42页
   ·材料与仪器第42-43页
     ·实验动物第42页
     ·主要药品与试剂第42页
     ·实验仪器第42-43页
   ·实验方法第43-44页
     ·成骨细胞的分离与培养第43页
     ·BMPRⅡ的RNA干扰第43页
     ·Real Time RT-PCR分析第43页
     ·western blot检测结果第43-44页
     ·碱性磷酸酶(ALP)活性的测定第44页
     ·茜素红钙化结节染色第44页
     ·统计学处理第44页
   ·结果与分析第44-47页
     ·BMPRⅡ干扰评估第44-45页
     ·BMPRII干扰后碱性磷酸酶(ALP)活性变化第45页
     ·BMPRII干扰后RUNX-2、Osx、COL-Ι 蛋白的变化第45-46页
     ·BMPRII干扰后钙化结节形成的变化第46-47页
   ·讨论第47-48页
结论第48-49页
参考文献第49-56页
致谢第56-57页
附录A:攻读学位期间所发表的学术论文目录第57页

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