| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-19页 |
| ·富马酸二甲酯及其主要的药理作用 | 第12-13页 |
| ·DMF用于肿瘤治疗的研究 | 第13-18页 |
| ·DMF的抗肿瘤作用机制 | 第13-14页 |
| ·干扰肿瘤细胞的氧化还原状态 | 第13-14页 |
| ·DMF显著抑制NF kappa B的活性 | 第14页 |
| ·DMF抑制肿瘤血管新生 | 第14页 |
| ·DMF抑制肿瘤细胞侵袭与转移 | 第14页 |
| ·DMF的保护肿瘤作用机制 | 第14-18页 |
| ·激活Nrf2信号通路 | 第14-17页 |
| ·调节细胞自噬功能 | 第17-18页 |
| ·结束语 | 第18-19页 |
| 2 DMF对恶性黑色素瘤细胞的抗肿瘤作用研究 | 第19-40页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19-24页 |
| ·实验细胞 | 第19页 |
| ·主要器材 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第20-22页 |
| ·试剂的配制 | 第22-24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·细胞培养 | 第24页 |
| ·MTT实验 | 第24-25页 |
| ·克隆形成实验 | 第25页 |
| ·细胞周期分析 | 第25页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第25-26页 |
| ·谷胱甘肽水平的检测 | 第26页 |
| ·细胞总蛋白的提取与定量 | 第26页 |
| ·免疫印迹检测蛋白表达水平 | 第26-28页 |
| ·统计学处理 | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-38页 |
| ·DMF抑制A375细胞增殖和克隆形成 | 第28-30页 |
| ·DMF诱导A375细胞发生G2期和有丝分裂期阻滞 | 第30-32页 |
| ·DMF处理诱导A375细胞凋亡 | 第32-33页 |
| ·DMF降低细胞内谷胱甘肽水平 | 第33-35页 |
| ·GSH水平对DMF诱导细胞周期改变的重要性大于细胞死亡 | 第35-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 3 DMF诱导恶性黑色素瘤细胞产生药物抵抗的研究 | 第40-53页 |
| ·引言 | 第40-43页 |
| ·实验细胞 | 第40页 |
| ·主要器材 | 第40-41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·试剂的配制 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-47页 |
| ·细胞培养 | 第43页 |
| ·免疫印迹检测蛋白表达水平 | 第43页 |
| ·细胞总RNA的提取与定量 | 第43-44页 |
| ·多聚酶链式反应 | 第44-45页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第44页 |
| ·PCR扩增 | 第44页 |
| ·PCR产物的鉴定 | 第44-45页 |
| ·实时定量PCR | 第45页 |
| ·免疫荧光染色和共聚焦显微镜观察 | 第45-46页 |
| ·双荧光素酶报告基因实验 | 第46-47页 |
| ·统计学处理 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-51页 |
| ·DMF增强A375细胞的自噬功能 | 第47-49页 |
| ·DMF激活Nrf2介导的信号系统 | 第49-50页 |
| ·DMF诱导A375细胞形成p62-Nrf2正反馈信号环路 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 4 干预Nrf2信号通路增强DMF杀伤肿瘤细胞的研究 | 第53-60页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·实验材料 | 第53-55页 |
| ·实验细胞 | 第53页 |
| ·主要器材 | 第53-54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·试剂的配制 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-56页 |
| ·细胞培养 | 第55页 |
| ·SiRNA法沉默基因Nrf2与p62 | 第55-56页 |
| ·基因沉默效果的鉴定 | 第56页 |
| ·多聚酶链式反应（PCR法） | 第56页 |
| ·免疫印迹法 | 第56页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第56页 |
| ·统计学处理 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-59页 |
| ·SiRNA转染沉默Nrf2与p62基因表达 | 第56-57页 |
| ·沉默Nrf2增强DMF诱导的细胞凋亡 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录A 附录缩略语 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
