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粘细菌内源性隐秘质粒pMF1存在机制研究

摘要第1-15页
Abstract第15-21页
符号说明及缩写词第21-23页
第一章 文献综述第23-55页
   ·质粒概述第23-33页
     ·质粒的定义第23-24页
     ·质粒基因组第24-31页
     ·质粒的作用第31-33页
   ·质粒的稳定保存第33-40页
     ·质粒存在矛盾论第33-34页
     ·解决质粒矛盾论:共同进化的作用第34-36页
     ·质粒保存机制第36-40页
   ·细菌基因组进化第40-44页
     ·原核生物基因组的结构和进化第40-42页
     ·细菌的实验室进化第42-43页
     ·实验室进化中恒定的细菌基因组进化速率第43-44页
   ·粘细菌概述第44-50页
     ·粘细菌的生理特点第44-45页
     ·粘细菌基因组进化第45-48页
     ·粘细菌的遗传学研究第48-50页
   ·本课题开展思路及研究内容第50-55页
第二章 pMF1遗传稳定区功能模式研究第55-97页
   ·实验材料第56-63页
     ·菌株与质粒第56页
     ·培养基第56-57页
     ·实验试剂第57-61页
     ·仪器设备第61-63页
     ·数据库及分析软件第63页
   ·实验方法第63-82页
     ·质粒复制中间体的提取第63-64页
     ·Southern Blot检测复制中间体中的单链DNA第64-69页
     ·par loci基因改造策略第69页
     ·质粒稳定性测定第69-70页
     ·蛋白异源表达与纯化第70-73页
     ·EMSA检测蛋白与DNA的相互作用第73-75页
     ·ParB与ParC相互作用检测第75-79页
     ·GST-pulldown检测ParC与ParA的相互作用第79-81页
     ·ParC蛋白结晶与结构获得第81-82页
   ·实验结果与讨论第82-95页
     ·pMF1的复制方式为theta型第82-83页
     ·parC在par loci发挥功能过程中具有重要的作用第83-85页
     ·parC在粘球菌宿主M.xantus DZ1中表达第85-86页
     ·ParC生物信息学分析第86-87页
     ·ParC增强ParB与DNA的结合作用第87-88页
     ·ParC与par loci及ori均没有结合第88-89页
     ·ParC与ParB没有相互作用第89-92页
     ·ParA蛋白的异源表达与纯化第92-93页
     ·GST-pulldown检测ParC与ParA的相互作用第93页
     ·ParC蛋白以多聚体的形式存在第93-94页
     ·ParC蛋白晶体获得第94-95页
   ·本章小结第95-97页
第三章 pMF1质粒基因组组成分析第97-119页
   ·实验材料第98-100页
     ·菌株与质粒第98页
     ·培养基第98页
     ·实验试剂第98-100页
     ·仪器设备第100页
     ·数据库及分析软件第100页
   ·实验方法第100-106页
     ·pMF1.1-pMF1.5/pZJY41载体构建第100-102页
     ·大肠杆菌接合实验第102-103页
     ·链特异性转录组分析pMF1质粒基因转录水平及操纵子组成第103-104页
     ·PCR检测pMF1质粒操纵子组成第104-105页
     ·荧光定量PCR检测pMF1质粒基因转录水平第105-106页
   ·实验结果与分析第106-117页
     ·pMF1质粒编码蛋白功能预测第106-110页
     ·pMF1.1-pMF1.5接合功能验证第110-111页
     ·pMF1操纵子组成第111-113页
     ·pMF1基因转录水平第113-117页
   ·本章小结第117-119页
第四章 pMF1宿主M.fulvus 124B02基因组学第119-145页
   ·实验材料第120页
     ·菌株与质粒第120页
     ·培养基第120页
     ·实验试剂第120页
   ·实验方法第120-126页
     ·粘细菌gDNA的提取第120-121页
     ·M.fulvus 124B02全细胞脂肪酸测定第121页
     ·基因组测序与组装第121-124页
     ·基因组注释第124-125页
     ·比较基因组学分析第125页
     ·数据统计分析第125-126页
   ·实验结果与分析第126-143页
     ·橙色粘球菌124B02的菌株特征第126-127页
     ·M.fulvus 124B02基因组特征第127-129页
     ·M.fulvus 124B02比较基因组学第129-143页
   ·本章小结第143-145页
第五章 pMF1对宿主进化的影响第145-171页
   ·实验材料第146-147页
     ·菌株与质粒第146页
     ·培养基第146页
     ·实验试剂第146页
     ·仪器设备第146-147页
   ·实验方法第147-151页
     ·质粒消除第147-148页
     ·124B02相关菌株表型性质分析第148-149页
     ·实验室传代第149-150页
     ·菌株基因组重测序第150-151页
     ·粘球菌质粒提取第151页
   ·实验结果第151-170页
     ·pMF1质粒消除第151-154页
     ·pMF1的消除不影响M.fulvus 124B02的表型第154-155页
     ·不同菌株在3种传代条件中的表型分析第155-159页
     ·pMF1质粒的稳定存在具有条件依赖性第159-163页
     ·pMF1质粒在DC条件下稳定存在机制第163-166页
     ·pMF1降低宿主M.fulvus 124B02基因组突变率第166-167页
     ·pMF1降低宿主M.fulvus 124B02基因组突变率机制第167-170页
   ·本章小结第170-171页
全文总结与展望第171-173页
附录 论文中用到的主要引物第173-181页
参考文献第181-191页
致谢第191-193页
攻读学位期间发表的学术论文第193-194页
附件第194-223页
学位论文评阅及答辩情况隶第223页

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