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以促内涵体逃逸聚合物为载体构建脑靶向基因传递系统沉默BACE1基因的研究

摘要第1-11页
Abstract第11-14页
缩略词第14-16页
前言第16-20页
第一部分 阳离子聚合物载体的合成及表征第20-29页
 一、仪器与材料第21-22页
  (一) 仪器第21页
  (二) 材料与试剂第21-22页
 二、 实验方法第22-25页
  (一) 聚合物的合成方法第22-25页
  (二) 聚合物的表征第25页
 三、 实验结果第25-28页
 四、 小结第28-29页
第二部分 聚离子基因复合物的制备及表征第29-40页
 一、 仪器与材料第29-30页
  (一) 仪器第29页
  (二) 材料与试剂第29-30页
 二、 实验方法第30-32页
  (一) 复合物的制备第30页
  (二) 考察粒子的粒径及 zeta 电位第30页
  (三) 透射电镜观察粒子形态第30-31页
  (四) 考察不同复合物的凝胶阻滞情况第31页
  (五) Hoechst33258 法定量测定 pDNA 的包封率第31-32页
 三、 实验结果与讨论第32-39页
  (一) polyplex 的粒径第32-33页
  (二) polyplex 的电位第33-34页
  (三) 透射电镜观察外观形态第34页
  (四) 琼脂糖凝胶阻滞考察基因包载第34-39页
 四、 小结第39-40页
第三部分 聚离子基因复合物的细胞及组织毒性考察第40-51页
 一、 仪器与材料第40-42页
  (一)仪器第40-41页
  (二) 试剂与材料第41-42页
  (三) 细胞株第42页
  (四) 实验动物第42页
 二、 实验方法第42-45页
  (一) 细胞培养方法第42-43页
  (二) PEGPAsp(TEP)chole 的体内外毒性评价第43-45页
 四、 实验结果与讨论第45-50页
  (一) 阳离子聚合物的细胞毒性考察第45-47页
  (二) CD68 免疫组化染色第47-50页
 五、 小结第50-51页
第四部分 聚离子基因复合物的促内涵体逃逸及脑转运特性考察第51-65页
 一、 仪器与材料第51-53页
  (一) 仪器第51-52页
  (二) 试剂与材料第52-53页
  (三) 细胞株及动物第53页
 二、 实验方法第53-57页
  (一) 定性考察 bEnd.3 细胞摄取第53-54页
  (二) 定量考察 bEnd.3 细胞的摄取第54-55页
  (三) 细胞单层膜透过第55页
  (四) 定性考察 Neuro2a 细胞转染第55页
  (五) 定量考察 Neuro2a 细胞转染第55-56页
  (六) 细胞内示踪实验第56页
  (七) 聚阳离子载药系统的体内分布第56-57页
 三、 实验结果与讨论第57-64页
  (一) 定性考察 bEnd.3 细胞的摄取情况第57-58页
  (二) 定量考察 BEND.3 细胞的摄取情况第58-59页
  (三) 考察细胞单层膜透过情况第59-60页
  (四) 定性考察 Neuro2a 细胞的转染情况第60页
  (五) 定量考察 Neuro2a 细胞的转染情况第60-61页
  (六) 细胞内示踪实验第61-62页
  (七) 聚阳离子载药系统的体内分布第62-64页
 四、 小结第64-65页
第五部分 聚离子基因复合物沉默 BACE1 基因第65-70页
 一、 仪器和材料第65-66页
  (一) 仪器第65-66页
  (二) 试剂与材料第66页
  (三) 实验动物第66页
 二、 实验方法第66-67页
  (一) western blot 检测蛋白含量第66-67页
  (二) Morris 水迷宫行为学评价第67页
 三、 实验结果第67-69页
  (一) western blot 检测蛋白含量第67-68页
  (二) Morris 水迷宫评价 polyplexTet1/RVG29 的 AD 治疗作用第68-69页
 四、 小结第69-70页
全文总结第70-72页
参考文献第72-76页
综述第76-87页
 参考文献第83-87页
发表论文及参加科研工作情况第87-88页
致谢第88-89页

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