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牛结核病PPDB-PE/C-IFN-γ诊断方法的建立及分枝杆菌的分离鉴定

摘要第1-4页
Summary第4-6页
缩略语第6-8页
目录第8-12页
第一篇 文献综述第12-21页
 1 概述第12-15页
   ·牛结核病病原学特征第12-13页
   ·牛结核病流行病学情况第13-14页
     ·发达国家和地区的流行状况第13页
     ·发展中国家和地区的流行状况第13-14页
     ·我国的流行状况第14页
   ·牛结核病的危害第14-15页
 2 牛结核病的诊断第15-18页
   ·细菌学检测方法第15页
   ·免疫学检测方法第15-17页
     ·PPDB皮内变态反应试验(SITT)第16页
     ·比较皮内变态反应试验(SICTT)第16页
     ·ELISA第16页
     ·IFN-_γ试验第16-17页
     ·免疫胶体金技术第17页
   ·分子生物学检测方法第17-18页
     ·PCR 方法第17页
     ·核酸探针检测法第17-18页
     ·DNA 指纹图谱检测法第18页
     ·基因芯片技术第18页
 3 牛分枝杆菌特异性抗原的研究进展第18-19页
   ·ESAT-6 家族蛋白第18页
   ·MPB 系列蛋白第18-19页
   ·Ag85 复合物第19页
   ·热休克蛋白(HSP)第19页
 4 牛结核病疫苗的研究进展第19-20页
 5 牛结核病的防制第20页
 6 研究的目的和意义第20-21页
第二篇 试验部分第21-49页
 第一章 新疆部分地区牛结核病血清学筛查第21-26页
  1 材料和方法第21-24页
   ·材料第21-22页
     ·样品第21页
     ·主要试剂第21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·方法第22-24页
     ·PPDB皮内变态反应方法(SITT)第22页
     ·比较皮内变态反应(SICTT)第22页
     ·牛 IFN-_γ酶联免疫试验第22-24页
  2 结果第24页
   ·阳性率第24页
   ·禽分枝杆菌感染情况第24页
   ·不同牛结核病检测方法的比较结果第24页
  3 讨论第24-26页
   ·新疆部分地区牛结核病流行病学调查结果第24-25页
   ·新疆部分地区牛结核病的感染趋势及禽分枝杆菌感染第25页
   ·不同牛结核病检测方法的比较第25页
   ·制定牛结核病防控计划第25-26页
 第二章 牛分枝杆菌的分离鉴定第26-36页
  1 材料与方法第26-31页
   ·材料第26-28页
     ·菌株第26页
     ·主要试剂及溶液第26-27页
     ·萋-尼氏(Ziehl-Neelsen)抗酸染色液试剂第27页
     ·培养基第27页
     ·主要仪器第27-28页
   ·方法第28-31页
     ·病料的采集及处理第28页
     ·分枝杆菌的初次培养第28页
     ·分枝杆菌的扩大培养第28页
     ·临床分离株的 Ziehl-Neelsen(Z-N)染色观察第28-29页
     ·细菌 DNA 的提取第29页
     ·细菌 DNA 的浓度测定第29页
     ·临床分离株的种属多重 PCR 鉴定第29-30页
     ·临床分离株结核分枝杆菌群内 PCR 鉴定第30-31页
  2 结果第31-34页
   ·病料的采集第31-32页
   ·分枝杆菌的初次培养第32页
   ·分枝杆菌的扩大培养第32-33页
   ·临床分离株的染色观察第33页
   ·细菌 DNA 的浓度第33页
   ·分枝杆菌种属鉴定结果第33页
   ·结核分枝杆菌复合群鉴定结果第33-34页
  3 讨论第34-36页
   ·牛分枝杆菌临床分离的意义第34-35页
   ·病料的采集、处理、分离培养及涂片镜检第35页
   ·模板的制备及其对 PCR 的影响第35-36页
 第三章 牛结核病 PPD_B-P_(E/C)-IFN-_γ诊断方法的建立第36-49页
  1 材料与方法第36-44页
   ·材料第36-39页
     ·主要试验材料与样本选择第36页
     ·主要试剂及试剂盒第36-37页
     ·主要仪器第37页
     ·常用培养基及溶液第37-39页
   ·方法第39-44页
     ·PE和 PC的表达、纯化及鉴定第39-43页
     ·P-IFN-_γ试验及其敏感性与特异性分析第43-44页
     ·PPD_B-P-IFN-_γ试验的敏感性与特异性分析第44页
     ·重复性和稳定性试验第44页
  2 结果第44-47页
   ·PE和 PC的表达、纯化及鉴定第44-45页
   ·P-IFN-_γ试验的敏感性和特异性第45-46页
   ·PPDB-P-IFN-_γ试验的敏感性和特异性第46-47页
   ·重复性和稳定性试验结果第47页
  3 讨论第47-49页
结论第49-50页
参考文献第50-57页
致谢第57-58页
作者简介第58-59页
导师简介第59-61页

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