| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 本文所用主要缩略词 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-44页 |
| 第一章 植物CMS育性恢复基因研究进展 | 第12-22页 |
| 1 不同植物的育性恢复基因 | 第12-18页 |
| ·玉米 | 第12-13页 |
| ·矮牵牛 | 第13页 |
| ·甜菜 | 第13页 |
| ·水稻 | 第13-18页 |
| 2 棉花育性恢复基因研究现状 | 第18-22页 |
| 第二章 PPR基因家族研究进展 | 第22-28页 |
| 1 PPR基因家族的结构特点 | 第22-24页 |
| 2 PPR基因的起源和分布 | 第24-28页 |
| ·PPR基因的起源 | 第24页 |
| ·PPR基因的分布 | 第24-25页 |
| ·PPR蛋白质的功能 | 第25-28页 |
| 第三章 植物基因克隆技术研究进展 | 第28-34页 |
| 1 图位克隆 | 第28-29页 |
| 2 转座子或T-DNA标签法 | 第29-30页 |
| 3 功能克隆 | 第30-31页 |
| 4 差异表达克隆 | 第31页 |
| 5 同源序列克隆技术 | 第31-32页 |
| 6 电子克隆(in silico cloning) | 第32-34页 |
| 第四章 基因沉默 | 第34-42页 |
| 1 转录水平上的基因沉默 | 第34-35页 |
| ·重复序列诱导的甲基化 | 第34-35页 |
| ·位置效应引起的甲基化 | 第35页 |
| 2 转录后水平基因沉默 | 第35-37页 |
| ·RNAi作用机制 | 第36页 |
| ·RNAi的特征 | 第36-37页 |
| 3 基因沉默技术 | 第37-39页 |
| ·反义RNA技术 | 第37页 |
| ·hpRNAi技术的兴起 | 第37-38页 |
| ·病毒诱导的基因沉默(VIGS) | 第38页 |
| ·人工microRNA技术 | 第38-39页 |
| ·人工ta-siRNA | 第39页 |
| 4 新一代基因沉默技术的展望 | 第39-42页 |
| 本研究目的和意义 | 第42-44页 |
| 第二部分 研究报告 | 第44-72页 |
| 第五章 棉花CMS育性恢复基因的图位克隆 | 第44-72页 |
| 1 实验材料与方法 | 第46-49页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·BAC文库 | 第47页 |
| ·菌株和质粒 | 第47页 |
| ·酶和试剂 | 第47页 |
| ·网络资源和应用软件 | 第47-48页 |
| ·引物 | 第48-49页 |
| 2 方法 | 第49-56页 |
| ·育性调查 | 第49-50页 |
| ·棉花基因组DNA提取方法 | 第50-51页 |
| ·CTAB法提取棉花总RNA及DNase Ⅰ消化 | 第51-52页 |
| ·感受态细胞的制备及大肠杆菌的转化 | 第52-53页 |
| ·扩增产物的电泳、回收、克隆及测序 | 第53-54页 |
| ·农杆菌的制备和转化 | 第54-55页 |
| ·VIGS步骤 | 第55页 |
| ·Q-PCR反应 | 第55-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-69页 |
| ·BC1群体、F2群体遗传分析和本实验研究基础 | 第56页 |
| ·对包含Rf1位点BAC序列的分析 | 第56-61页 |
| ·对所有候选基因进行Q-PCR验证 | 第61-65页 |
| ·VIGS技术验证候选基因功能 | 第65-69页 |
| ·0-613-2R和8518R中育性恢复基因的位置关系 | 第69页 |
| 4 讨论 | 第69-72页 |
| ·PPR育性恢复基因在染色体上的分布 | 第69页 |
| ·棉花Rf1基因是PPR基因家族成员 | 第69-70页 |
| ·恢复基因作用方式探讨 | 第70页 |
| ·VIGS作用温度和时间探讨 | 第70-72页 |
| 全文结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82页 |