摘要 | 第1-8页 |
文献综述 | 第8-14页 |
1 猪肺炎支原体致病机理研究进展 | 第8-10页 |
·细胞黏附方面的研究 | 第8-9页 |
·细胞炎性因子方面的研究 | 第9页 |
·直接诱导细胞凋亡方面的研究 | 第9-10页 |
2 差异蛋白质组学技术研究进展 | 第10-12页 |
·双向电泳 | 第10页 |
·荧光双向差异凝胶电泳 | 第10-11页 |
·同位素亲和标签 | 第11页 |
·蛋白质芯片 | 第11页 |
·毛细管电泳 | 第11页 |
·高效液相色谱 | 第11-12页 |
·蛋白质组生物信息学 | 第12页 |
·生物质谱 | 第12页 |
3 猪肺炎支原体差异蛋白质组学研究进展 | 第12-13页 |
4 本研究的目的及意义 | 第13-14页 |
实验一 猪肺炎支原体168强弱毒株对猪肺泡上皮细胞氧化损伤的差异分析 | 第14-22页 |
1 材料 | 第14-15页 |
·菌种,细胞与培养基 | 第14页 |
·主要试剂 | 第14页 |
·主要仪器 | 第14页 |
·主要溶液及配制 | 第14-15页 |
2 方法 | 第15-17页 |
·Mhp菌液培养 | 第15页 |
·SJPL细胞培养 | 第15页 |
·Mhp感染细胞 | 第15页 |
·感染时间的筛选 | 第15页 |
·感染剂量的筛选 | 第15-16页 |
·H_2O_2检测 | 第16页 |
·免疫荧光法检测 | 第16页 |
·DAPI染色 | 第16页 |
·统计分析 | 第16-17页 |
3 结果与分析 | 第17-21页 |
·不同感染时间细胞上清NO浓度的测定结果 | 第17-18页 |
·不同感染剂量36h后细胞上清NO浓度的测定结果 | 第18-19页 |
·H_2O_2浓度测定结果 | 第19-20页 |
·感染细胞IFA检测结果 | 第20页 |
·感染细胞DAPI染色结果 | 第20-21页 |
4 小结 | 第21-22页 |
实验二 猪肺炎支原体168强弱毒株感染猪气管上皮细胞的表达蛋白差异分析 | 第22-34页 |
1 材料 | 第22-26页 |
·菌种,细胞与培养基 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·主要溶液及配制 | 第23-26页 |
2 方法 | 第26-30页 |
·猪肺炎支原体的复苏与扩大培养 | 第26页 |
·细胞培养 | 第26页 |
·Mhp感染细胞 | 第26-27页 |
·感染细胞全蛋白的制备与纯化 | 第27-28页 |
·细胞蛋白双向电泳 | 第28-29页 |
·凝胶扫描及软件分析 | 第29页 |
·质谱样本制备及分析 | 第29页 |
·Western-blotting验证 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-33页 |
·感染细胞蛋白的双向电泳结果 | 第30-31页 |
·MALDI-TOF-MS结果 | 第31-32页 |
·Western-blotting结果 | 第32-33页 |
4 小结 | 第33-34页 |
讨论 | 第34-37页 |
1 猪肺炎支原体对细胞氧化损伤差异分析 | 第34-35页 |
2 猪肺炎支原体感染细胞后表达蛋白的差异分析 | 第35-37页 |
结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
Abstract | 第42-44页 |
致谢 | 第44页 |