| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·穿山龙薯蓣皂昔 | 第10-11页 |
| ·穿山龙薯蓣皂苷的来源及化学成分 | 第10页 |
| ·穿山龙薯蓣皂苷的化学结构式 | 第10-11页 |
| ·穿山龙薯蓣皂苷的药理作用 | 第11页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶的纯化 | 第11页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶电印迹及N-端序列测定 | 第11-12页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶的电印迹 | 第11-12页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶N-端序列的测定 | 第12页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶肽段序列测定 | 第12-13页 |
| ·真核生物基因克隆的策略研究 | 第13-18页 |
| ·RNA的提取 | 第13-14页 |
| ·PCR技术 | 第14-18页 |
| ·RT-PCR技术 | 第15页 |
| ·RACE技术 | 第15-18页 |
| ·序列的测定与分析 | 第18-19页 |
| ·序列的测定 | 第18页 |
| ·序列分析 | 第18-19页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶及其基因克隆方面的研究现状 | 第19-20页 |
| ·本论文的主要研究内容及实验方案 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-45页 |
| ·实验材料与设备 | 第22-24页 |
| ·菌株与载体 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·仪器与设备 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-45页 |
| ·液体发酵培养基的制备 | 第24-25页 |
| ·麸皮浸出液的制备 | 第24-25页 |
| ·穿山龙浸出液的制备 | 第25页 |
| ·菌种液体发酵条件的确定 | 第25-26页 |
| ·培养基中诱导物浓度的确定 | 第25-26页 |
| ·培养时间的确定 | 第26页 |
| ·酶的提取与活力测定 | 第26-27页 |
| ·酶的提取 | 第26页 |
| ·酶活力的检测 | 第26-27页 |
| ·菌体的收集 | 第27页 |
| ·酶的纯化及纯度鉴定 | 第27-28页 |
| ·酶的纯化 | 第27页 |
| ·提纯酶的纯度鉴定 | 第27-28页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶反应特性的研究 | 第28页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶与人参皂苷Re的反应 | 第28页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶的淀粉酶活力的测定 | 第28页 |
| ·蛋白质电印迹及蛋白质N-端序列的测定 | 第28-30页 |
| ·蛋白质电印迹(即蛋白质转膜) | 第28-30页 |
| ·酶蛋白N-端序列的测定 | 第30页 |
| ·酶蛋白氨基酸片段序列的测定 | 第30-31页 |
| ·RNA的提取及质量检测 | 第31-33页 |
| ·RNA的提取 | 第31页 |
| ·RNA的质量检测 | 第31-33页 |
| ·RNA的消化与精制 | 第33页 |
| ·RNA的消化 | 第33页 |
| ·RNA的精制 | 第33页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶基因全序列的调取 | 第33-42页 |
| ·CDS区部分基因序列的扩增及测定 | 第33-35页 |
| ·利用RACE技术对3’端部分基因序列的扩增及测定 | 第35-38页 |
| ·利用RACE技术对5’端部分基因序列的扩增及测定 | 第38-42页 |
| ·基因序列的验证 | 第42页 |
| ·目的基因的获取及克隆测序 | 第42-44页 |
| ·目的基因的获取 | 第42-44页 |
| ·测序分析 | 第44页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶基因全序列的获得与同源性分析 | 第44页 |
| ·基因全序列的获得 | 第44页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶基因全序列的同源性分析 | 第44页 |
| ·氨基酸序列比较 | 第44-45页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第45-65页 |
| ·菌种液体发酵条件的确定 | 第45-47页 |
| ·培养基中诱导物浓度的确定 | 第45-46页 |
| ·培养时间的确定 | 第46-47页 |
| ·酶的纯化及纯度鉴定 | 第47-50页 |
| ·酶的纯化 | 第47-48页 |
| ·酶的纯度鉴定及分子量测定 | 第48-50页 |
| ·蛋白质电印迹及蛋白质N-端序列的测定 | 第50-51页 |
| ·蛋白质电印迹 | 第50-51页 |
| ·蛋白质N-端序列的测定 | 第51页 |
| ·RNA的提取及质量检测 | 第51-52页 |
| ·RNA的提取 | 第51-52页 |
| ·RNA的质量检测 | 第52页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶基因全序列的调取 | 第52-62页 |
| ·CDS区部分基因序列的扩增及测定 | 第52-54页 |
| ·引物设计与合成 | 第52-53页 |
| ·基因序列的扩增 | 第53-54页 |
| ·基因序列的测定 | 第54页 |
| ·利用RACE技术对3’端部分基因序列的扩增及测定 | 第54-56页 |
| ·引物的设计与合成 | 第54-55页 |
| ·基因序列的扩增 | 第55页 |
| ·基因序列的测定 | 第55-56页 |
| ·利用RACE技术对5’端部分基因序列的扩增及测定 | 第56-58页 |
| ·引物的设计与合成 | 第56页 |
| ·基因序列的扩增 | 第56-57页 |
| ·基因序列的测定 | 第57-58页 |
| ·基因序列的验证 | 第58页 |
| ·引物的设计与合成 | 第58页 |
| ·基因序列的扩增 | 第58页 |
| ·目的基因的获取及克隆测序 | 第58-59页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶基因全序列的获得与CDS区同源性分析 | 第59-62页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶基因全序列的获得 | 第59页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶基因CDS区的同源性分析 | 第59-62页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶氨基酸片段序列的测定与分析 | 第62-65页 |
| ·薯蓣皂苷糖苷酶氨基酸片段序列的测定 | 第62-63页 |
| ·氨基酸序列的分析 | 第63-65页 |
| 第四章 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 附录A | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
