| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1. 文献综述 | 第9-21页 |
| ·植物miRNA 研究进展 | 第9-15页 |
| ·miRNA 的发现 | 第9页 |
| ·植物miRNA 的形成过程 | 第9-11页 |
| ·植物miRNA 的作用机制 | 第11-12页 |
| ·植物miRNA 的生理功能 | 第12-15页 |
| ·H_2O_2 在植物中的双重作用 | 第15-17页 |
| ·H_2O_2的产生和清除 | 第15页 |
| ·H_2O_2的双重作用 | 第15-17页 |
| ·H_2O_2的危害 | 第16页 |
| ·H_2O_2作为信号分子发挥积极作用 | 第16-17页 |
| ·植物启动子的基本结构及分类 | 第17-21页 |
| ·组成型启动子 | 第18页 |
| ·组织特异型启动子 | 第18-19页 |
| ·诱导表达启动子 | 第19-21页 |
| ·生物胁迫诱导型启动子 | 第19页 |
| ·非生物胁迫诱导型启动子 | 第19-21页 |
| 2. 引言 | 第21-23页 |
| ·研究目的与意义 | 第21-22页 |
| ·研究思路及其内容 | 第22-23页 |
| 3. 材料与方法 | 第23-34页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·主要载体和试剂 | 第23页 |
| ·质粒与宿主菌 | 第23页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-34页 |
| ·RNA 提取 | 第23-24页 |
| ·miRNA 差异文库构建 | 第24-25页 |
| ·测序数据分析 | 第24-25页 |
| ·Northern 杂交 | 第25-27页 |
| ·低分子量 RNA 的富集 | 第25页 |
| ·电泳和转膜 | 第25-26页 |
| ·探针标记 | 第26页 |
| ·预杂交和杂交 | 第26页 |
| ·洗膜与压片 | 第26-27页 |
| ·osa-miR169b 启动子序列生物信息学分析 | 第27页 |
| ·水稻幼苗基因组 DNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·osa-miR169b 启动子不同长度序列扩增 | 第28页 |
| ·PCR 产物回收 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第28-29页 |
| ·感受态细胞制备所用试剂 | 第28-29页 |
| ·制备程序 | 第29页 |
| ·载体克隆与转化 | 第29-30页 |
| ·转化所需试剂 | 第29-30页 |
| ·转化过程 | 第30页 |
| ·阳性克隆筛选及测序 | 第30页 |
| ·表达载体的构建 | 第30页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第30页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞制备 | 第30-31页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第31页 |
| ·农杆菌转化子的鉴定 | 第31页 |
| ·转化烟草 | 第31-32页 |
| ·烟草无菌苗的准备 | 第31-32页 |
| ·转基因烟苗的获得 | 第32页 |
| ·基因枪的瞬时转化 | 第32-33页 |
| ·LUC 活性的测定 | 第33-34页 |
| 4. 结果与分析 | 第34-42页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第34页 |
| ·应答 H_2O_2 的osa-miR169b 的发现 | 第34-35页 |
| ·miR169b 的 Northern 杂交验证结果 | 第35-36页 |
| ·miR169b 的启动子片段预测及其生物信息学分析 | 第36-37页 |
| ·水稻幼苗基因组 DNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·osa-miR169b 启动子片段的扩增 | 第38页 |
| ·osa-miR169b 启动子报告载体的酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·转化农杆菌的 PCR 鉴定 | 第39页 |
| ·转基因烟草的获得与分析 | 第39-40页 |
| ·瞬时表达法分析miR169b 启动子活性 | 第40-42页 |
| 5. 结论与讨论 | 第42-45页 |
| ·结论 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| Abstract | 第51-52页 |
