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长叶红砂V-H~+-ATPase B subunit基因及NHX基因的初步表达分析

摘要第1-7页
ABSTRACTS第7-11页
第一章 文献综述第11-19页
   ·离子转运与植物耐盐性关系研究进展第11-12页
     ·盐胁迫对植物的影响第11页
     ·植物抵御盐害的方式第11-12页
     ·离子转运与耐盐性关系第12页
   ·液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白NHX研究进展第12-14页
     ·NHX的分类第12-13页
     ·NHX的生物学功能第13页
     ·NHX与植物耐盐性关系第13-14页
   ·液泡膜H+-ATPase研究进展第14-15页
     ·V-ATPase的结构和功能第14-15页
     ·V-ATPase的组装第15页
     ·V-ATPase与耐盐性关系第15页
   ·长叶红砂研究进展第15-18页
     ·长叶红砂分布区概况第16页
     ·长叶红砂形态结构特征第16-17页
     ·长叶红砂生理特征第17页
     ·长叶红砂耐盐机理研究第17-18页
   ·研究目的及意义第18-19页
第二章 RtNHX和RtV-ATPase B基因的序列分析第19-31页
   ·实验方法第19页
   ·实验结果及分析第19-30页
     ·基因序列基本分析第19-20页
     ·基因酶切图谱分析第20页
     ·蛋白理化性质分析第20-25页
     ·氨基酸序列比对第25-28页
     ·蛋白同源性分析第28-30页
   ·讨论第30-31页
第三章 RtNHX和RtV-ATPase B基因表达分析第31-38页
   ·实验材料第31-32页
     ·植物材料第31页
     ·实验试剂第31页
     ·引物第31-32页
   ·实验方法第32-34页
     ·长叶红砂幼苗的培养第32页
     ·长叶红砂的胁迫处理第32页
     ·长叶红砂RNA提取第32-33页
     ·长叶红砂RNA的纯化第33-34页
     ·长叶红砂cDNA第一链的合成第34页
     ·长叶红砂NHX和V-ATPase B半定量RT-PCR分析第34页
   ·实验结果与分析第34-37页
     ·长叶红砂RNA的提取第34-35页
     ·RtNHX基因和RtV-ATPase B基因在非生物胁迫下的半定量RT-PCR分析第35-37页
   ·讨论第37-38页
第四章 V-ATPase B蛋白原核表达分析第38-54页
   ·实验材料第38-40页
     ·菌种和质粒第38页
     ·引物第38页
     ·实验试剂及配制第38-40页
   ·实验方法第40-44页
     ·RtV-ATPase B基因的TA克隆第40页
     ·pMD-19T-V-ATPase B的双酶切第40-41页
     ·pET-32a表达载体双酶切第41-42页
     ·RtV-ATPase B基因表达载体的构建第42-43页
     ·V-ATPase B蛋白的诱导表达第43页
     ·RtV-ATPase B基因的表达影响大肠杆菌在非生物胁迫下的存活率第43-44页
   ·实验结果与分析第44-52页
     ·RtV-ATPase B基因ORF的克隆第44-45页
     ·原核表达载体的构建第45页
     ·pET-32a-V-ATPase B重组质粒的鉴定第45-46页
     ·pET-32a-V-ATPase B蛋白诱导表达第46-47页
     ·RtV-ATPase B基因的表达影响大肠杆菌在非生物胁迫下的存活率第47-52页
   ·讨论第52-54页
第五章 真核表达载体的构建第54-60页
   ·材料和方法第54页
     ·植物材料、菌种和质粒第54页
     ·试剂与药品第54页
     ·引物第54页
   ·实验方法第54-57页
     ·RtV-ATPase B基因的TA克隆第54-55页
     ·RtV-ATPase B目的基因及表达载体的双酶切第55页
     ·植物表达载体的构建第55-56页
     ·农杆菌感受态的制备第56页
     ·植物表达载体转化农杆菌感受态细胞第56-57页
     ·植物材料的准备第57页
     ·浸花絮法侵染拟南芥第57页
   ·实验结果第57-59页
   ·讨论第59-60页
第六章 结论第60-61页
参考文献第61-67页
致谢第67页

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