摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
目录 | 第12-16页 |
第一章 前言 | 第16-38页 |
第一节 丝氨酸在植物体内的研究 | 第16-24页 |
·植物体内丝氨酸代谢 | 第16-19页 |
·植物体内L-Ser与其他物质的转化 | 第19-20页 |
·植物内L-Ser代谢过程关键酶编码基因的研究 | 第20-22页 |
·光呼吸途径L-Ser代谢关键酶的研究 | 第20-22页 |
·非光呼吸途径L-Ser代谢关键酶的研究 | 第22页 |
·L-Ser在植物内的功能 | 第22-24页 |
第二节 植物光呼吸作用在植物衰老及逆境胁迫中的作用 | 第24-31页 |
·植物光呼吸作用 | 第24-26页 |
·光呼吸关键酶的研究 | 第26页 |
·光呼吸途径的作用 | 第26-31页 |
·光呼吸途径产生一系列中间物质 | 第27-29页 |
·光呼吸途径解除胁迫下的光抑制 | 第29页 |
·光呼吸缓解了叶绿素降解并促进了蛋白质合成 | 第29-30页 |
·光呼吸途径的关键酶在非生物胁迫下起到重要作用 | 第30-31页 |
第三节 植物在逆境下产生活性氧以及活性氧的清除 | 第31-35页 |
·环境胁迫下ROS的生成 | 第32-33页 |
·ROS在植物抗逆中的作用 | 第33-34页 |
·抗氧化酶系统在逆境下的响应 | 第34-35页 |
第四节 浮萍简介 | 第35-36页 |
第五节 课题的提出和意义 | 第36-38页 |
第二章 实验材料和方法 | 第38-54页 |
第一节 实验材料 | 第38-39页 |
·实验材料 | 第38页 |
·培养条件 | 第38-39页 |
·拟南芥的培养 | 第38页 |
·浮萍的培养 | 第38-39页 |
·工程菌和质粒 | 第39页 |
·分子生物学试剂 | 第39页 |
第二节 实验方法 | 第39-54页 |
·分子克隆 | 第39-47页 |
·植物DNA的提取 | 第39-40页 |
·RNA的提取和cDNA的获取 | 第40-41页 |
·碱裂解法小量提取大肠杆菌(农杆菌)质粒 | 第41-42页 |
·大肠杆菌(农杆菌)质粒的大量提取 | 第42-43页 |
·PCR反应 | 第43-45页 |
·酶切反应 | 第45-46页 |
·目的DNA片段的回收 | 第46页 |
·连接反应及其它修饰酶反应 | 第46-47页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第47页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第47页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第47页 |
·土壤农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第47-48页 |
·土壤农杆菌感受态细胞的制备 | 第47-48页 |
·农杆菌感受态细胞的转化 | 第48页 |
·植物转化 | 第48-49页 |
·鲜重的称取 | 第49页 |
·实验处理 | 第49页 |
·L-Ser对拟南芥生长的影响 | 第49页 |
·20种不同氨基酸对拟南芥和浮萍愈伤组织的影响 | 第49页 |
·NaCl胁迫对浮萍的影响 | 第49页 |
·AtAGT1基因启动子表达的研究 | 第49-50页 |
·氨基酸及SGAT酶和保护酶的提取 | 第50页 |
·SGAT酶反应和氨基酸衍生化反应 | 第50页 |
·色谱法测定氨基酸和SGAT酶活 | 第50-51页 |
·保护酶活性测定 | 第51-52页 |
·SOD活性测定 | 第51页 |
·POD活性测定 | 第51-52页 |
·CAT活性测定 | 第52页 |
·生物信息学分析 | 第52-53页 |
·数据处理 | 第53-54页 |
第三章 结果与分析 | 第54-111页 |
第一节 L-丝氨酸处理对浮萍和拟南芥的影响 | 第54-64页 |
·L-丝氨酸处理对浮萍的影响 | 第54-59页 |
·L-丝氨酸处理对拟南芥生长的影响 | 第59-62页 |
·外源L-Ser处理促进了拟南芥根中生长素的响应 | 第62-64页 |
·外源L-Ser处理对拟南芥部分基因表达的影响 | 第64页 |
第二节 过表达AtAGT1的研究 | 第64-81页 |
·pCAMBIA1301-AtAGT1过表达载体构建 | 第64-67页 |
·将pCAMBIA1301-AtAGT1载体转化到不同农杆菌中 | 第67-68页 |
·利用C58C1-pCAMBIA1301-AtAGT1和EHA105-pCAMBIA1301-AtAGT1侵染浮萍 | 第68-70页 |
·筛选抗性的确定 | 第68-69页 |
·对浮萍的转化 | 第69-70页 |
·浮萍转基因植株的鉴定 | 第70-71页 |
·AtAGT1转基因浮萍抗盐性增强 | 第71-73页 |
·AtAGT1转基因浮萍在盐胁迫下提高了对光合系统的保护 | 第73-74页 |
·盐胁迫下AtAGT1转基因浮萍和野生型浮萍活性氧的积累 | 第74-75页 |
·AtAGT1转基因浮萍在盐胁迫下提高了对膜系统的保护 | 第75-76页 |
·AtAGT1转基因浮萍在盐胁迫下提高了ROS的清除能力 | 第76-79页 |
·AtAGT1转基因浮萍提高了长期盐胁迫下浮萍的抗性 | 第79-81页 |
·在拟南芥中过表达AtAGT1的研究 | 第81页 |
第三节 AtAGT1基因敲减对拟南芥的影响 | 第81-96页 |
·AtAGT1-RNAi载体构建 | 第82-92页 |
·干扰序列的选取 | 第82-83页 |
·pT-Exon+intron载体的构建 | 第83-86页 |
·pT-Exon载体的构建 | 第86-88页 |
·pSK-Exon和pSK-Exon+intron中间载体的构建 | 第88-90页 |
·pCAMBIA 1301-AtAGT1-RNAi最终载体的构建 | 第90-92页 |
·AtAGT1-RNAi转基因拟南芥的获得 | 第92-96页 |
第四节 AtAGT1启动子的相关研究 | 第96-103页 |
·AtAGT1启动子的生物信息学分析 | 第97-98页 |
·pCAMBIA 1301-P_(AtAGT1):GUS载体构建 | 第98-101页 |
·P_(AtAGT1):GUS转基因拟南芥的研究 | 第101-103页 |
第五节 L-Ser磷酸化代谢途径的研究 | 第103-111页 |
·pCAMBIA1301-AtPSP过表达载体的构建 | 第104-107页 |
·pCAMBIA1301-AtPGDH过表达载体的构建 | 第107-108页 |
·pCAMBIA1301-AtPSAT过表达载体的构建 | 第108-111页 |
第四章 讨论 | 第111-115页 |
第一节 L-Ser对植物生长发育和衰老的影响 | 第111-113页 |
第二节 AtAGT1的表达及其参与了植物抗盐和衰老 | 第113页 |
第三节 AtAGT1过表达减弱了盐胁迫下ROS的积累并增强了抗氧化酶系统 | 第113-114页 |
第四节 根中AtAGT1表达可能具有的生理意义 | 第114-115页 |
创新与突破 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-125页 |
致谢 | 第125-126页 |
附录 | 第126-149页 |
第一节 AtAGT1基因序列 | 第126-127页 |
第二节 AtAGT1基因启动子序列 | 第127页 |
第三节 AtAGT1基因启动子分析结果 | 第127-148页 |
第四节 AtAGt1与其他物种同源基因的氨基酸序列同源性对比 | 第148-149页 |
个人简历与在学期间发表的学术论文 | 第149页 |
个人简历 | 第149页 |
论文成果 | 第149页 |