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L-Ser对拟南芥和浮萍生长发育的影响及其代谢途径关键酶SGAT的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-12页
目录第12-16页
第一章 前言第16-38页
 第一节 丝氨酸在植物体内的研究第16-24页
     ·植物体内丝氨酸代谢第16-19页
     ·植物体内L-Ser与其他物质的转化第19-20页
     ·植物内L-Ser代谢过程关键酶编码基因的研究第20-22页
       ·光呼吸途径L-Ser代谢关键酶的研究第20-22页
       ·非光呼吸途径L-Ser代谢关键酶的研究第22页
     ·L-Ser在植物内的功能第22-24页
 第二节 植物光呼吸作用在植物衰老及逆境胁迫中的作用第24-31页
     ·植物光呼吸作用第24-26页
     ·光呼吸关键酶的研究第26页
     ·光呼吸途径的作用第26-31页
       ·光呼吸途径产生一系列中间物质第27-29页
       ·光呼吸途径解除胁迫下的光抑制第29页
       ·光呼吸缓解了叶绿素降解并促进了蛋白质合成第29-30页
       ·光呼吸途径的关键酶在非生物胁迫下起到重要作用第30-31页
 第三节 植物在逆境下产生活性氧以及活性氧的清除第31-35页
     ·环境胁迫下ROS的生成第32-33页
     ·ROS在植物抗逆中的作用第33-34页
     ·抗氧化酶系统在逆境下的响应第34-35页
 第四节 浮萍简介第35-36页
 第五节 课题的提出和意义第36-38页
第二章 实验材料和方法第38-54页
 第一节 实验材料第38-39页
     ·实验材料第38页
     ·培养条件第38-39页
       ·拟南芥的培养第38页
       ·浮萍的培养第38-39页
     ·工程菌和质粒第39页
     ·分子生物学试剂第39页
 第二节 实验方法第39-54页
     ·分子克隆第39-47页
       ·植物DNA的提取第39-40页
       ·RNA的提取和cDNA的获取第40-41页
       ·碱裂解法小量提取大肠杆菌(农杆菌)质粒第41-42页
       ·大肠杆菌(农杆菌)质粒的大量提取第42-43页
       ·PCR反应第43-45页
       ·酶切反应第45-46页
       ·目的DNA片段的回收第46页
       ·连接反应及其它修饰酶反应第46-47页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第47页
       ·大肠杆菌感受态的制备第47页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化第47页
     ·土壤农杆菌感受态细胞的制备及转化第47-48页
       ·土壤农杆菌感受态细胞的制备第47-48页
       ·农杆菌感受态细胞的转化第48页
     ·植物转化第48-49页
     ·鲜重的称取第49页
     ·实验处理第49页
       ·L-Ser对拟南芥生长的影响第49页
       ·20种不同氨基酸对拟南芥和浮萍愈伤组织的影响第49页
       ·NaCl胁迫对浮萍的影响第49页
     ·AtAGT1基因启动子表达的研究第49-50页
     ·氨基酸及SGAT酶和保护酶的提取第50页
     ·SGAT酶反应和氨基酸衍生化反应第50页
     ·色谱法测定氨基酸和SGAT酶活第50-51页
     ·保护酶活性测定第51-52页
       ·SOD活性测定第51页
       ·POD活性测定第51-52页
       ·CAT活性测定第52页
     ·生物信息学分析第52-53页
     ·数据处理第53-54页
第三章 结果与分析第54-111页
 第一节 L-丝氨酸处理对浮萍和拟南芥的影响第54-64页
     ·L-丝氨酸处理对浮萍的影响第54-59页
     ·L-丝氨酸处理对拟南芥生长的影响第59-62页
     ·外源L-Ser处理促进了拟南芥根中生长素的响应第62-64页
     ·外源L-Ser处理对拟南芥部分基因表达的影响第64页
 第二节 过表达AtAGT1的研究第64-81页
     ·pCAMBIA1301-AtAGT1过表达载体构建第64-67页
     ·将pCAMBIA1301-AtAGT1载体转化到不同农杆菌中第67-68页
     ·利用C58C1-pCAMBIA1301-AtAGT1和EHA105-pCAMBIA1301-AtAGT1侵染浮萍第68-70页
       ·筛选抗性的确定第68-69页
       ·对浮萍的转化第69-70页
     ·浮萍转基因植株的鉴定第70-71页
     ·AtAGT1转基因浮萍抗盐性增强第71-73页
     ·AtAGT1转基因浮萍在盐胁迫下提高了对光合系统的保护第73-74页
     ·盐胁迫下AtAGT1转基因浮萍和野生型浮萍活性氧的积累第74-75页
     ·AtAGT1转基因浮萍在盐胁迫下提高了对膜系统的保护第75-76页
     ·AtAGT1转基因浮萍在盐胁迫下提高了ROS的清除能力第76-79页
     ·AtAGT1转基因浮萍提高了长期盐胁迫下浮萍的抗性第79-81页
     ·在拟南芥中过表达AtAGT1的研究第81页
 第三节 AtAGT1基因敲减对拟南芥的影响第81-96页
     ·AtAGT1-RNAi载体构建第82-92页
       ·干扰序列的选取第82-83页
       ·pT-Exon+intron载体的构建第83-86页
       ·pT-Exon载体的构建第86-88页
       ·pSK-Exon和pSK-Exon+intron中间载体的构建第88-90页
       ·pCAMBIA 1301-AtAGT1-RNAi最终载体的构建第90-92页
     ·AtAGT1-RNAi转基因拟南芥的获得第92-96页
 第四节 AtAGT1启动子的相关研究第96-103页
     ·AtAGT1启动子的生物信息学分析第97-98页
     ·pCAMBIA 1301-P_(AtAGT1):GUS载体构建第98-101页
     ·P_(AtAGT1):GUS转基因拟南芥的研究第101-103页
 第五节 L-Ser磷酸化代谢途径的研究第103-111页
     ·pCAMBIA1301-AtPSP过表达载体的构建第104-107页
     ·pCAMBIA1301-AtPGDH过表达载体的构建第107-108页
     ·pCAMBIA1301-AtPSAT过表达载体的构建第108-111页
第四章 讨论第111-115页
 第一节 L-Ser对植物生长发育和衰老的影响第111-113页
 第二节 AtAGT1的表达及其参与了植物抗盐和衰老第113页
 第三节 AtAGT1过表达减弱了盐胁迫下ROS的积累并增强了抗氧化酶系统第113-114页
 第四节 根中AtAGT1表达可能具有的生理意义第114-115页
创新与突破第115-116页
参考文献第116-125页
致谢第125-126页
附录第126-149页
 第一节 AtAGT1基因序列第126-127页
 第二节 AtAGT1基因启动子序列第127页
 第三节 AtAGT1基因启动子分析结果第127-148页
 第四节 AtAGt1与其他物种同源基因的氨基酸序列同源性对比第148-149页
个人简历与在学期间发表的学术论文第149页
 个人简历第149页
 论文成果第149页

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