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O型FMDV衣壳抗原酸稳定性位点及影响其高效表达区域的鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 引言第13-21页
   ·研究背景第13-14页
   ·口蹄疫及口蹄疫病毒概述第14-18页
     ·口蹄疫病毒的基因组第15-17页
       ·基因组简介第15页
       ·口蹄疫病毒的结构蛋白 P1第15-16页
       ·口蹄疫病毒的 2B 基因第16页
       ·口蹄疫病毒的 3C 蛋白酶(3Cpro)第16-17页
     ·口蹄疫病毒的主要抗原位点第17页
     ·口蹄疫的流行现状及防控第17-18页
     ·口蹄疫疫苗的研究现状第18页
   ·家蚕杆状病毒表达系统的研究现状第18-21页
     ·家蚕杆状病毒表达系统第18-19页
     ·家蚕杆状病毒表达系统的优越性第19-20页
     ·家蚕杆状病毒表达系统在口蹄疫病毒疫苗研究中的应用第20页
     ·高效表达口蹄疫空衣壳的优化策略第20-21页
第二章 O 型 FMDV 的耐酸性筛选第21-31页
   ·实验材料第21页
     ·病毒的准备第21页
     ·实验试剂第21页
     ·实验仪器第21页
   ·实验方法第21-26页
     ·O 型口蹄疫原病毒序列的扩增及序列测定第21-24页
       ·病毒 RNA 的提取第21-22页
       ·病毒基因组的分段扩增第22-23页
       ·PCR 扩增产物的纯化与回收第23页
       ·目的片段与 pMD18-T 载体的连接与转化第23-24页
       ·重组质粒的鉴定并测序第24页
     ·病毒的酸化处理第24-25页
     ·酸处理病毒的蚀斑筛选第25页
     ·筛选病毒的培养与测序第25页
     ·耐酸毒与原病毒基因组序列的比对第25-26页
   ·结果第26-29页
     ·FMDV 基因组的分段扩增第26页
     ·蚀斑筛选毒感染 BHK-21第26-27页
     ·酸化毒的 P1 片段的扩增第27-28页
     ·酸化毒与原毒基因组的序列比对第28-29页
   ·讨论第29-31页
第三章 O 型 FMDV 衣壳抗原的酸稳定性相关位点的鉴定第31-41页
   ·实验材料第31页
     ·实验试剂第31页
     ·实验仪器第31页
   ·实验方法第31-36页
     ·经改造的 O 型口蹄疫病毒 P12A2B3C 的合成第31页
     ·pVL-P12A2B3C 重组质粒的构建第31-33页
     ·BmN 细胞的复苏、传代及病毒繁殖第33页
     ·Bm-BacPAK6 基因组 DNA 的制备第33-34页
     ·Bm-BacPAK6 基因组的线性化与共转染第34-35页
     ·重组病毒的筛选、鉴定与纯化第35页
     ·目的基因蛋白在 BmN 细胞中的表达第35页
     ·目的基因蛋白在家蚕中的表达第35-36页
   ·结果第36-39页
     ·pVL-P12A2B3C 重组质粒的构建第36-37页
     ·BmN 细胞的复苏及病毒的传代第37页
     ·重组病毒在 BmN 细胞中的表达第37-38页
     ·空衣壳抗原在家蚕中表达的检测第38-39页
   ·讨论第39-41页
第四章 影响 O 型 FMDV 衣壳抗原高效表达相关区域的鉴定第41-44页
   ·实验材料第41页
   ·实验方法第41-42页
     ·O 型与 AsiaⅠ型嵌合 P12A3C 的合成第41页
     ·目的片段与 pVL-1393 载体的连接第41-42页
     ·嵌合 P12A2B3C 基因在家蚕体内的表达第42页
   ·结果第42-43页
   ·讨论第43-44页
第五章 全文结论第44-45页
参考文献第45-50页
致谢第50-51页
作者简介第51页

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