| 英文缩略词表（ABBREVIATION） | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-17页 |
| 英文摘要 | 第17-24页 |
| 1 前言 | 第24-26页 |
| 2 实验材料 | 第26-32页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·菌株、细胞株及质粒 | 第26-27页 |
| ·抗体 | 第27页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第27-28页 |
| ·引物和SIRNA | 第28-29页 |
| ·主要仪器与设备 | 第29-30页 |
| ·主要试剂和溶液的配方 | 第30-32页 |
| 3 实验方法 | 第32-48页 |
| ·重组质粒的构建及质粒提取 | 第32-36页 |
| ·引物设计和合成 | 第32页 |
| ·PCR 扩增 | 第32页 |
| ·凝胶回收 | 第32-33页 |
| ·酶切 | 第33页 |
| ·连接 | 第33页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·连接产物和质粒转化 | 第33-34页 |
| ·质粒的小量提取 | 第34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·质粒的中量提取 | 第35-36页 |
| ·SIRNA 的合成 | 第36页 |
| ·免疫印迹（IMMUNOBLOTTING，IB） | 第36-37页 |
| ·蛋白样品制备 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶制备 | 第36-37页 |
| ·上样电泳 | 第37页 |
| ·转膜 | 第37页 |
| ·IB 检测 | 第37页 |
| ·RT-PCR | 第37-39页 |
| ·RNA 提取 | 第37-38页 |
| ·RT 反应 | 第38页 |
| ·PCR 扩增 | 第38-39页 |
| ·酵母双杂交（YEAST TWO HYBRID，Y2H） | 第39-42页 |
| ·小规模转化酵母菌 | 第39页 |
| ·酵母提蛋白 | 第39-40页 |
| ·Bait－BD 与文库融合，筛选 | 第40-41页 |
| ·酵母质粒 DNA 的提取 | 第41页 |
| ·大肠杆菌电转化感受态细胞制备 | 第41-42页 |
| ·文库质粒 DNA 电转化大肠杆菌 | 第42页 |
| ·细胞培养及转染 | 第42-43页 |
| ·GST PULL DOWN | 第43-45页 |
| ·表达 GST 标签融合蛋白 | 第43页 |
| ·表达 His 标签融合蛋白 | 第43-44页 |
| ·纯化 GST 标签融合蛋白 | 第44页 |
| ·纯化 His 标签融合蛋白 | 第44页 |
| ·pull down | 第44-45页 |
| ·免疫共沉淀（CO-IMMUNOPRECIPITATION，CO-IP） | 第45页 |
| ·核浆分离实验 | 第45-46页 |
| ·细胞免疫荧光染色 | 第46页 |
| ·稳定转染细胞系的建立 | 第46-47页 |
| ·PI 染色 | 第47页 |
| ·脑组织免疫荧光染色 | 第47-48页 |
| 4 结果 | 第48-65页 |
| ·诱饵表达质粒 PGBKT7-MANF 的构建和鉴定 | 第48页 |
| ·诱饵质粒 PGBKT7-MANF 的毒性及自激活效应检测 | 第48-49页 |
| ·检测 BAIT 阳性酵母克隆中 MANF 融合蛋白的表达 | 第49-50页 |
| ·酵母融合与阳性克隆的筛选 | 第50-51页 |
| ·阳性克隆基因序列的测定与分析 | 第51-53页 |
| ·酵母回复性杂交 | 第53-54页 |
| ·酵母表达质粒 pGADT7-RNF2 的构建与鉴定 | 第53页 |
| ·酵母回复性杂交验证 MANF 和 RNF2 相互作用 | 第53-54页 |
| ·GST PULL-DOWN 证明 RNF2 和 MANF 有直接的相互作用 | 第54-55页 |
| ·免疫共沉淀证实 MANF 与 RNF2 相互作用 | 第55-58页 |
| ·稳定转染细胞系 N2A-MANF 的建立 | 第55-57页 |
| ·免疫共沉淀证实 MANF 与 RNF2 相互作用 | 第57-58页 |
| ·ER 应激诱导 MANF 与 RNF2 在神经细胞核中相互作用 | 第58-60页 |
| ·ER 应激诱导神经细胞中的 MANF 与 RNF2 共定位于细胞核50 | 第58-59页 |
| ·免疫共沉淀证实 MANF 与 RNF2 在细胞核内相互作用 | 第59-60页 |
| ·ER 应激诱导神经细胞中 RNF2 的表达 | 第60-61页 |
| ·ER 应激诱导神经细胞中 RNF2 表达上调 | 第60页 |
| ·轻度脑缺血再灌注损伤诱导神经细胞中的 RNF2 表达及其与MANF 的共定位 | 第60-61页 |
| ·RNF2 可以减少 ER 应激介导的神经细胞的死亡 | 第61-64页 |
| ·RNF2 抑制 CASPASES-3 的活化 | 第64-65页 |
| 5 讨论 | 第65-69页 |
| 6 结论 | 第69页 |
| 7 本研究的创新点 | 第69页 |
| 8 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 综述 | 第81-97页 |
| 参考文献 | 第90-97页 |
