| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-14页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·真核生物转录因子的研究现状 | 第10-11页 |
| ·ERF转录因子的研究进展 | 第11-12页 |
| ·ERF转录因子的结构功能 | 第11页 |
| ·ERF转录因子参与植物的逆境应答 | 第11-12页 |
| ·研究的目的和意义 | 第12页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第12-14页 |
| ·研究内容 | 第12-13页 |
| ·技术路线 | 第13-14页 |
| 2 柽柳ERF家族基因表达模式分析及ThERF1的亚细胞定位 | 第14-25页 |
| ·实验材料 | 第14页 |
| ·植物材料 | 第14页 |
| ·菌株与载体 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14页 |
| ·溶液配制 | 第14页 |
| ·实验方法 | 第14-20页 |
| ·柽柳ERF家族基因的实时荧光定量PCR | 第14-17页 |
| ·柽柳ThERF1基因的亚细胞定位 | 第17-20页 |
| ·结果与分析 | 第20-24页 |
| ·不同非生物胁迫下的柽柳ERF家族基因的表达模式分析 | 第20-23页 |
| ·柽柳ThERF1基因的亚细胞定位 | 第23-24页 |
| ·本章小结 | 第24-25页 |
| 3 转ThERF1基因拟南芥的抗逆能力分析 | 第25-39页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·溶液配制 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·干旱、盐胁迫下的转ThERF1基因拟南芥的抗逆性分析 | 第26页 |
| ·干旱、盐胁迫下的转基因拟南芥ROS水平和细胞受损情况研究 | 第26-27页 |
| ·干旱、盐及ABA胁迫下的转基因拟南芥的生理指标测定 | 第27-28页 |
| ·实时定量研究ThERF1所调控的SOD及POD基因表达 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-38页 |
| ·转ThERF1基因拟南芥在干旱和盐胁迫下的抗逆能力分析 | 第29-31页 |
| ·NBT染色法分析逆境下的转基因拟南芥细胞内超氧离子水平 | 第31-32页 |
| ·DAB染色法分析逆境下的转基因拟南芥细胞内过氧化氢水平 | 第32-33页 |
| ·Evans Blue染色法分析逆境下的转基因拟南芥细胞的受损情况 | 第33-34页 |
| ·ROS定位法分析逆境下的转基因拟南芥细胞内的ROS水平 | 第34-35页 |
| ·转基因拟南芥在干旱、盐及ABA胁迫下各项生理指标水平 | 第35-36页 |
| ·ThERF1所调控的SOD及POD基因研究 | 第36-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 4 柽柳ThERF1的互作蛋白研究 | 第39-48页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·菌株与载体 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要培养基 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-45页 |
| ·柽柳ThERF1同源基因的序列分析 | 第40页 |
| ·Bait载体的构建 | 第40-42页 |
| ·4.2.3 Prey载体的构建 | 第42-44页 |
| ·Bait与Prey载体共转化酵母细胞 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-46页 |
| ·柽柳ThERF1同源基因的序列分析 | 第45-46页 |
| ·柽柳ThERF1同其他ThERF的互作确认 | 第46页 |
| ·本章小结 | 第46-48页 |
| 5 柽柳ThERF1基因上游调控因子的研究 | 第48-64页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·菌株与载体 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·主要培养基 | 第48页 |
| ·溶液配制 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-54页 |
| ·对柽柳ThERF1基因的启动子进行序列分析 | 第48页 |
| ·构建pHIS2-靶DNA重组报告载体 | 第48-49页 |
| ·pHIS2-靶DNA筛选柽柳cDNA文库 | 第49-50页 |
| ·阳性克隆的再筛选及互作蛋白的鉴定 | 第50-51页 |
| ·上游调控因子对顺式作用元件的识别特异性 | 第51-54页 |
| ·上游调控因子的表达模式分析 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-62页 |
| ·柽柳ThERF1基因启动子分析 | 第54-55页 |
| ·能够识别GCC-box、W-box和MBS的上游调控因子的获得 | 第55页 |
| ·ThERF1基因上游调控因子对顺式作用元件的特异性识别 | 第55-57页 |
| ·柽柳ThERF1基因上游调控因子能特异性识别含相应元件的启动子区 | 第57-59页 |
| ·柽柳ThERF1基因的上游调控因子的表达模式分析 | 第59-62页 |
| ·本章小结 | 第62-64页 |
| 6 柽柳ThERF1所识别的元件及调控的下游基因研究 | 第64-78页 |
| ·实验材料 | 第64-65页 |
| ·植物材料 | 第64页 |
| ·菌株与载体 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·主要培养基 | 第64页 |
| ·芯片杂交实验的仪器与试剂 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-70页 |
| ·柽柳ThERF1识别的顺式作用元件研究 | 第65-67页 |
| ·芯片杂交RNA样品的制备 | 第67-68页 |
| ·芯片杂交 | 第68-69页 |
| ·数据的处理分析 | 第69-70页 |
| ·结果与分析 | 第70-76页 |
| ·ThERF1识别的顺式作用元件研究 | 第70-72页 |
| ·ThERF1过表达与野生型拟南芥的基因差异筛选与富集分析 | 第72-74页 |
| ·NaCl胁迫下ThERF1过表达与野生型拟南芥的基因差异筛选 | 第74-76页 |
| ·本章小结 | 第76-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 附录 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
