| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| ·棉花概述 | 第9-10页 |
| ·棉花纤维的发育过程 | 第10-11页 |
| ·植物细胞壁的相关研究 | 第11-12页 |
| ·细胞壁的组成 | 第11页 |
| ·纤维细胞壁的特殊性 | 第11-12页 |
| ·棉花纤维的品质指标 | 第12页 |
| ·植物几丁质酶基因的相关研究 | 第12-14页 |
| ·植物基因功能的研究方法 | 第14-15页 |
| ·RNA干扰(RNA interference,RNAi) | 第14-15页 |
| ·超量表达(Over expression) | 第15页 |
| ·研究目的与意义 | 第15-16页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-31页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·植物材料 | 第17页 |
| ·载体与菌株 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-31页 |
| ·载体构建方法 | 第18-21页 |
| ·农杆菌介导法转化棉花下胚轴 | 第21页 |
| ·DNA的提取与浓度测定 | 第21-22页 |
| ·转基因再生植株的阳性检测 | 第22-23页 |
| ·Southern blot检测基因拷贝数 | 第23-25页 |
| ·RNA的提取及纯化 | 第25页 |
| ·反转录PCR | 第25-26页 |
| ·Real-time quantitative PCR(qRT-PCR)检测基因表达量 | 第26-27页 |
| ·棉花纤维品质检测 | 第27-28页 |
| ·成熟纤维横断面石蜡切片制作 | 第28-29页 |
| ·成熟纤维纤维素含量的测定 | 第29-30页 |
| ·GUS染色 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-40页 |
| ·GbCTLs序列分析 | 第31-33页 |
| ·GbCTLs表达模式分析 | 第33-35页 |
| ·CTLs在陆地棉不同器官及纤维发育不同时期的表达情况 | 第33-34页 |
| ·GbCTL1启动子驱动GUS基因在棉花中表达的染色分析 | 第34-35页 |
| ·转基因后代不同株系纤维中GbCTLs的表达量变化分析 | 第35-37页 |
| ·转基因后代纤维长度测定 | 第37-39页 |
| ·成熟纤维纤维素含量测定以及次生壁厚度的观察 | 第39页 |
| ·转基因后代纤维次生壁合成期优势表达基因的表达量变化 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| ·GbCTL1与GhCTL2启动子驱动GUS基因表达模式差异 | 第40-41页 |
| ·RNAi在抑制基因表达上存在不足 | 第41页 |
| ·GbCTLs对棉花纤维伸长有一定的影响 | 第41-42页 |
| ·GbCTLs对棉花纤维的次生壁增厚影响不大 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录 | 第47-59页 |
| 附录1. 主要缓冲液的配制 | 第47-49页 |
| 附录2. 培养基配方 | 第49-50页 |
| 附录3. 雷蒙德氏棉(G.raimondii)基因组中CTLs的同源序列 | 第50-52页 |
| 附录4. 海岛棉(G.barbadense)3-79基因组中CTLs的同源序列 | 第52-57页 |
| 附录5. GbCTL1启动子序列 | 第57-58页 |
| 附录6. 纤维素含量测定结果 | 第58页 |
| 附录7. 成熟纤维横截面观察 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
