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抗草鱼呼肠孤病毒药筛选细胞模型及分子检测方法的建立

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-11页
第一章 文献综述第11-22页
 1 草鱼出血病研究进展第11-12页
   ·草鱼出血病研究重要历史事件第11页
   ·草鱼出血病的预防及治疗第11-12页
     ·草鱼出血病的免疫预防第12页
     ·草鱼出血病的药物防治第12页
 2 草鱼呼肠孤病毒生物学特性第12-13页
 3 抗病毒药物研究进展第13-21页
   ·抗病毒药物的类型第13-16页
     ·抗病毒的化学合成药物第13-14页
     ·抗病毒中药制剂的研究第14-16页
   ·抗病毒药物筛选的模型研究第16-18页
     ·整体动物水平筛选模型第17页
     ·组织器官水平的筛选模型第17页
     ·细胞水平筛选模型第17-18页
   ·基于细胞模型的抗病毒药物筛选研究方法第18-21页
     ·细胞病变法(CPE)第18-19页
     ·蚀斑减数法(PRA)第19页
     ·噻唑蓝染料法(MTT)第19-20页
     ·病毒抗原的测定第20页
     ·病毒核酸量的分子检测第20-21页
 4 本论文研究的目的及意义第21-22页
第二章 体外抗草鱼呼肠孤病毒药物筛选细胞模型的建立第22-34页
 1 材料与方法第22-26页
   ·实验材料第22页
     ·实验药物及提取第22页
     ·细胞及病毒材料第22页
   ·主要试剂第22-23页
   ·实验仪器与设备第23-24页
   ·实验方法第24-26页
     ·病毒感染性及滴度的测定第24页
     ·药物对CIK细胞的毒性测定第24-25页
     ·药物筛选试验分组与抗病毒效果检测第25-26页
   ·统计学方法第26页
 2 实验结果第26-32页
   ·草鱼呼肠孤病毒对CIK细胞感染性的测定第26-28页
   ·药物对CIK细胞毒性的测定第28-29页
   ·先给药后感染试验组抑制病毒吸附侵入细胞的效果第29-30页
   ·先感染后给药试验组抑制病毒增殖的效果第30-31页
   ·病毒与药物共同孵育后感染试验组对病毒的直接杀灭作用第31-32页
 3. 讨论第32-34页
第三章 抗草鱼呼肠孤病毒药物筛选荧光定量PCR检测方法的建立第34-44页
 1 材料与方法第34-39页
   ·实验材料第34页
   ·主要试剂第34-35页
   ·实验仪器与设备第35页
   ·引物设计第35-36页
   ·实验方法第36-39页
     ·病毒滴度的测定及药物对CIK细胞的毒性测定第36页
     ·药物抗病毒实验组处理第36页
     ·细胞总RNA提取第36-37页
     ·cDNA的成及PCR产物检测第37-38页
     ·实时荧光定量PCR第38-39页
     ·实时定量PCR扩增效率鉴定与溶解曲线的分析第39页
     ·实时定量PCR检测不同药物处理组中GCRV表达差异第39页
 2 结果第39-42页
   ·总RNA及实时荧光定量PCR结果检测第39-40页
   ·扩增效率及溶解曲线鉴定结果第40-41页
   ·不同药物处理组中GCRV的表达差异第41-42页
 3. 讨论第42-44页
第四章 MTT法和MTS法在CIK细胞应用比较第44-50页
 1. 材料与方法第44-45页
   ·实验材料第44页
     ·细胞第44页
   ·主要试剂第44-45页
   ·实验仪器及设备第45页
   ·实验方法第45页
     ·不同浓度细胞贴壁时间的测定第45页
     ·MTT和MTS试剂最适细胞接种数的确定第45页
     ·MTT和MTS最佳孵育时间的选择第45页
 2 结果与分析第45-48页
   ·不同浓度细胞贴壁时间的测定结果第45页
   ·最适细胞数量测定的测定结果第45-47页
   ·最适孵育时间的测定结果第47-48页
 3 讨论第48-50页
参考文献第50-58页
在读期间发表论文及参加会议第58-59页
致谢第59页

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