中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1 草鱼出血病研究进展 | 第11-12页 |
·草鱼出血病研究重要历史事件 | 第11页 |
·草鱼出血病的预防及治疗 | 第11-12页 |
·草鱼出血病的免疫预防 | 第12页 |
·草鱼出血病的药物防治 | 第12页 |
2 草鱼呼肠孤病毒生物学特性 | 第12-13页 |
3 抗病毒药物研究进展 | 第13-21页 |
·抗病毒药物的类型 | 第13-16页 |
·抗病毒的化学合成药物 | 第13-14页 |
·抗病毒中药制剂的研究 | 第14-16页 |
·抗病毒药物筛选的模型研究 | 第16-18页 |
·整体动物水平筛选模型 | 第17页 |
·组织器官水平的筛选模型 | 第17页 |
·细胞水平筛选模型 | 第17-18页 |
·基于细胞模型的抗病毒药物筛选研究方法 | 第18-21页 |
·细胞病变法(CPE) | 第18-19页 |
·蚀斑减数法(PRA) | 第19页 |
·噻唑蓝染料法(MTT) | 第19-20页 |
·病毒抗原的测定 | 第20页 |
·病毒核酸量的分子检测 | 第20-21页 |
4 本论文研究的目的及意义 | 第21-22页 |
第二章 体外抗草鱼呼肠孤病毒药物筛选细胞模型的建立 | 第22-34页 |
1 材料与方法 | 第22-26页 |
·实验材料 | 第22页 |
·实验药物及提取 | 第22页 |
·细胞及病毒材料 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·实验仪器与设备 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-26页 |
·病毒感染性及滴度的测定 | 第24页 |
·药物对CIK细胞的毒性测定 | 第24-25页 |
·药物筛选试验分组与抗病毒效果检测 | 第25-26页 |
·统计学方法 | 第26页 |
2 实验结果 | 第26-32页 |
·草鱼呼肠孤病毒对CIK细胞感染性的测定 | 第26-28页 |
·药物对CIK细胞毒性的测定 | 第28-29页 |
·先给药后感染试验组抑制病毒吸附侵入细胞的效果 | 第29-30页 |
·先感染后给药试验组抑制病毒增殖的效果 | 第30-31页 |
·病毒与药物共同孵育后感染试验组对病毒的直接杀灭作用 | 第31-32页 |
3. 讨论 | 第32-34页 |
第三章 抗草鱼呼肠孤病毒药物筛选荧光定量PCR检测方法的建立 | 第34-44页 |
1 材料与方法 | 第34-39页 |
·实验材料 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34-35页 |
·实验仪器与设备 | 第35页 |
·引物设计 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-39页 |
·病毒滴度的测定及药物对CIK细胞的毒性测定 | 第36页 |
·药物抗病毒实验组处理 | 第36页 |
·细胞总RNA提取 | 第36-37页 |
·cDNA的成及PCR产物检测 | 第37-38页 |
·实时荧光定量PCR | 第38-39页 |
·实时定量PCR扩增效率鉴定与溶解曲线的分析 | 第39页 |
·实时定量PCR检测不同药物处理组中GCRV表达差异 | 第39页 |
2 结果 | 第39-42页 |
·总RNA及实时荧光定量PCR结果检测 | 第39-40页 |
·扩增效率及溶解曲线鉴定结果 | 第40-41页 |
·不同药物处理组中GCRV的表达差异 | 第41-42页 |
3. 讨论 | 第42-44页 |
第四章 MTT法和MTS法在CIK细胞应用比较 | 第44-50页 |
1. 材料与方法 | 第44-45页 |
·实验材料 | 第44页 |
·细胞 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44-45页 |
·实验仪器及设备 | 第45页 |
·实验方法 | 第45页 |
·不同浓度细胞贴壁时间的测定 | 第45页 |
·MTT和MTS试剂最适细胞接种数的确定 | 第45页 |
·MTT和MTS最佳孵育时间的选择 | 第45页 |
2 结果与分析 | 第45-48页 |
·不同浓度细胞贴壁时间的测定结果 | 第45页 |
·最适细胞数量测定的测定结果 | 第45-47页 |
·最适孵育时间的测定结果 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-58页 |
在读期间发表论文及参加会议 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |