| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 前言 | 第12-18页 |
| ·棉铃虫对棉花的危害 | 第12-13页 |
| ·Bt基因的研究进展 | 第13页 |
| ·Bt基因在棉花育种中的应用 | 第13-14页 |
| ·含Bt基因种质创新方法 | 第14-16页 |
| ·花粉管通道法转Bt基因 | 第14页 |
| ·基因渐渗 | 第14-15页 |
| ·嫁接植物蛋白运输的相关研究 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 2 中棉41Bt基因的克隆及载体的构建 | 第18-33页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌株和质粒 | 第18页 |
| ·克隆载体与表达载体 | 第18页 |
| ·酶和试剂 | 第18页 |
| ·配置溶液 | 第18-19页 |
| ·培养基的配置 | 第19页 |
| ·所使用的主要工具 | 第19页 |
| ·所使用的主要仪器 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-26页 |
| ·Bt基因克隆引物的设计 | 第19-20页 |
| ·中棉41总基因组DNA的提取 | 第20页 |
| ·中棉41Bt基因PCR克隆 | 第20-21页 |
| ·PCR产物回收纯化 | 第21-22页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第22页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·重组质粒的转化 | 第22-23页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第23页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒的提取 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的酶切 | 第24页 |
| ·重组质粒酶切后目的片段回收 | 第24页 |
| ·表达载体pbi121质粒的提取 | 第24页 |
| ·表达载体pbi121质粒的酶切 | 第24-25页 |
| ·表达载体酶切后大片段的回收 | 第25页 |
| ·目的片段与表达载体的连接 | 第25-26页 |
| ·表达载体重组质粒的转化 | 第26页 |
| ·表达载体重组质粒阳性克隆的筛选 | 第26页 |
| ·表达载体重组质粒的鉴定 | 第26页 |
| ·表达载体重组质粒的提取 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-31页 |
| ·中棉41Bt基因的克隆及鉴定 | 第26-27页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·中棉41Bt基因的序列分析 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 3 转Bt基因海岛棉的获得和海岛棉与抗虫棉的杂交 | 第33-44页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·菌株与质粒 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·仪器用具 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-36页 |
| ·棉花的花粉管注射 | 第33-34页 |
| ·注射种子的采摘和播种 | 第34页 |
| ·卡那霉素涂抹浓度的鉴定 | 第34页 |
| ·棉花幼苗的初步筛选 | 第34-35页 |
| ·转基因棉花阳性植株的鉴定 | 第35页 |
| ·中棉41与海岛棉的杂交 | 第35页 |
| ·杂交植株的初步筛选 | 第35-36页 |
| ·杂交植株的基因鉴定 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-42页 |
| ·对海岛棉的花粉管注射 | 第36页 |
| ·注射棉花种子的采摘 | 第36页 |
| ·对注射植株进行初步筛选的时候卡那浓度的确定 | 第36-40页 |
| ·转基因阳性海岛棉植株的获得 | 第40-41页 |
| ·中棉41与海岛棉的杂交 | 第41页 |
| ·具有目的基因的杂交植株的获得 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 4 转基因抗虫棉与海岛棉的嫁接植物中毒蛋白的运输 | 第44-53页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-47页 |
| ·材料准备 | 第45页 |
| ·嫁接 | 第45-46页 |
| ·样品采集 | 第46页 |
| ·毒蛋白的测定 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-51页 |
| ·中棉41与多年生海岛棉A113互相嫁接的植株中不同时期叶片毒蛋白相对含量的变化 | 第47-48页 |
| ·中棉41与多年生海岛棉A113互相嫁接的植株中不同器官毒蛋白相对含量比较 | 第48-49页 |
| ·中棉41与多年生海岛棉07-98互相嫁接的植株中不同部位Bt毒蛋白相对含量比较 | 第49-50页 |
| ·中棉41与海岛棉07-98互相嫁接的植株中不同部位CpTI蛋白的相对含量 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 5 全文讨论 | 第53-55页 |
| ·抗虫海岛棉的应用前景 | 第53页 |
| ·本研究的创新点 | 第53页 |
| ·问题与展望 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61页 |
