不同木质素诱导下糙皮侧耳cDNA文库构建分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-23页 |
| ·课题背景 | 第10-11页 |
| ·糙皮侧耳研究概况 | 第11-12页 |
| ·木质素相关研究 | 第12-16页 |
| ·木质素结构 | 第12-13页 |
| ·木质素降解酶 | 第13-15页 |
| ·木质素降解机制 | 第15-16页 |
| ·食用菌遗传转化研究进展 | 第16-18页 |
| ·差异表达基因技术的研究进展 | 第18-22页 |
| ·SSH技术原理与步骤 | 第18-20页 |
| ·SSH技术优缺点 | 第20页 |
| ·SSH技术在真菌中的研究应用 | 第20-22页 |
| ·研究内容 | 第22页 |
| ·课题来源 | 第22-23页 |
| 2 总RNA提取方法优化与mRNA纯化 | 第23-28页 |
| ·试验材料 | 第23页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| ·试验材料准备 | 第23页 |
| ·试验方法 | 第23-25页 |
| ·菌丝体收集 | 第23-24页 |
| ·RNA提取 | 第24-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-26页 |
| ·电泳检测 | 第25-26页 |
| ·分光光度计检测 | 第26页 |
| ·mRNA质量鉴定 | 第26页 |
| ·本章小结 | 第26-28页 |
| 3 糙皮侧耳降解草本木质素cDNA文库构建 | 第28-39页 |
| ·试验材料 | 第28页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第28页 |
| ·引物与接头 | 第28页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-34页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第28-29页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第29页 |
| ·RsaⅠ酶切双链cDNA | 第29-30页 |
| ·接头连接 | 第30页 |
| ·接头连接效率检测 | 第30-31页 |
| ·SSH文库第一次杂交 | 第31页 |
| ·第二次杂交 | 第31-32页 |
| ·两次PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·差减文库的构建 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-36页 |
| ·cDNA文库消减效率的PCR检测 | 第34页 |
| ·SSH文库质量检测分析 | 第34页 |
| ·生物信息学分析 | 第34-36页 |
| ·文库SSH1主要ESTs的讨论 | 第36-38页 |
| ·细胞抵抗与防御相关基因 | 第36页 |
| ·蛋白质合成及降解相关基因 | 第36-37页 |
| ·信号传导基因 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 4 糙皮侧耳降解木本木质素的cDNA文库构建 | 第39-52页 |
| ·试验材料 | 第39页 |
| ·主要酶、试剂和试剂盒 | 第39页 |
| ·引物与接头 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·ds cDNA反转录与RsaⅠ酶切检测 | 第39页 |
| ·连接效率检测 | 第39-40页 |
| ·抑制消减杂交效果检测 | 第40页 |
| ·文库质量鉴定 | 第40-41页 |
| ·ESTs生物信息学分析 | 第41-44页 |
| ·ESTs功能分类 | 第44页 |
| ·文库SSH2重要ESTs的讨论 | 第44-50页 |
| ·木质素降解酶基因 | 第45页 |
| ·细胞防御相关基因 | 第45-46页 |
| ·信号传导基因 | 第46-48页 |
| ·转录因子基因 | 第48页 |
| ·物质能量转运基因 | 第48-49页 |
| ·文库SSH2相关代谢途径 | 第49-50页 |
| ·本章小结 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
