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生菜离体再生体系的建立及其rbcS基因启动子的获得

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
缩略词表第7-8页
目录第8-12页
第一章 文献综述第12-19页
   ·植物转基因研究概况第12页
   ·生菜转基因研究第12-13页
     ·生菜第12页
     ·生菜转基因研究概况第12-13页
   ·生菜组织培养第13-14页
     ·生菜组织培养研究概况第13页
     ·生菜离体再生实现途径第13页
     ·影响生菜离体再生的因素第13-14页
   ·外源基因在转基因植物中表达水平的优化第14-16页
     ·启动子、调控序列和增强子的选用第14-15页
     ·转基因定位表达及表达产物的定向积累第15-16页
   ·生菜转基因研究存在的问题第16页
   ·植物rbcS基因启动子第16-17页
   ·本研究的目的、意义与实验内容第17-19页
     ·目的与意义第17页
     ·实验内容第17-19页
第二章 生菜离体再生体系的建立第19-29页
   ·材料与方法第19-22页
     ·实验材料、试剂及溶液配制第19-20页
     ·生菜无菌苗培养第20页
     ·生菜愈伤组织的诱导第20页
     ·生菜愈伤组织的继代培养第20-21页
     ·生菜愈伤组织分化产生不定芽的诱导第21页
     ·生菜外植体向不定芽的诱导分化第21页
     ·生菜不定芽的继代培养第21页
     ·生菜再生苗诱导生根第21页
     ·统计分析第21-22页
   ·结果与分析第22-25页
     ·不同基因型的影响第22页
     ·不同外植体的影响第22-23页
     ·不同植物激素的影响第23-25页
   ·讨论第25-27页
   ·小结第27-29页
第三章 生菜rbcS基因启动子的获得及序列分析第29-40页
   ·材料与方法第29-33页
     ·实验材料、试剂及溶液的配制第29页
     ·生菜基因组DNA的提取第29-30页
     ·生菜rbcS基因启动子的PCR扩增第30-31页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第31页
     ·连接产物的转化第31页
     ·重组质粒筛选及鉴定第31-33页
     ·序列分析第33页
   ·结果与分析第33-38页
     ·生菜rbcS基因启动子序列的扩增第33页
     ·启动子的序列分析第33-37页
     ·rbcS基因启动子序列的相似性比对第37-38页
   ·讨论第38页
   ·小结第38-40页
第四章 生菜rbcS基因启动子驱动的GFP表达载体构建及验证第40-63页
   ·材料与方法第40-50页
     ·实验材料、试剂及溶液的配制第40-42页
     ·启动子序列的扩增第42-43页
     ·重组质粒的构建第43-44页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第44-46页
     ·生菜叶片原生质体的分离纯化第46-47页
     ·重组表达载体的原生质体瞬时转化及激光共聚焦检测第47页
     ·重组表达载体转化烟草与生菜植株第47-49页
     ·转基因苗的PCR检测第49-50页
     ·SDS-PAGE检测第50页
   ·结果与分析第50-59页
     ·生菜rbcS启动子序列的扩增第50-51页
     ·重组质粒的构建第51-53页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第53-54页
     ·生菜叶片原生质体的分离与纯化第54-55页
     ·重组表达载体的原生质体瞬时表达第55页
     ·GFP表达载体转化烟草与生菜植株及检测第55-59页
   ·讨论第59-61页
   ·小结第61-63页
结论第63-64页
参考文献第64-73页
攻读硕士学位期间取得的科研成果第73-74页
致谢第74页

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