| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 1 引言 | 第9-18页 |
| ·转座子载体的研究进展 | 第9-11页 |
| ·转座子载体的分类 | 第9-10页 |
| ·转座子载体的应用 | 第10-11页 |
| ·PiggyBac 转座子的研究进展 | 第11-14页 |
| ·PiggyBac 转座子的结构 | 第11-12页 |
| ·PiggyBac 转座子的转座机制 | 第12页 |
| ·PiggyBac 转座子的应用 | 第12-14页 |
| ·绿色荧光蛋白研究进展 | 第14-15页 |
| ·绿色荧光蛋白的结构 | 第14页 |
| ·绿色荧光蛋白的发光原理 | 第14-15页 |
| ·GFP 在分子生物学上的应用 | 第15页 |
| ·嗜热古菌β -糖苷酶的研究进展 | 第15-16页 |
| ·嗜热古菌β -糖苷酶的密码子优化 | 第16页 |
| ·转座子插入位点的检测方法 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 P-ZGL-LACS-EGFP-NEO 转座子载体的构建 | 第18-30页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·生物材料 | 第18页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第18-19页 |
| ·试剂及溶液配制 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-26页 |
| ·LacS 表达框和 ZGL 表达框的扩增 | 第21-24页 |
| ·pZGL-LacS 的构建 | 第24-25页 |
| ·PGK-NEO-EGFP 表达框的扩增 | 第25-26页 |
| ·pZGL-LACS-EGFP-NEO 的构建 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-30页 |
| ·LacS 表达框和 ZGL 表达框的扩增 | 第26-27页 |
| ·pZGL-LacS 的构建 | 第27-28页 |
| ·EGFP 基因和 NEO 基因的获得 | 第28-29页 |
| ·pZGL-LACS-EGFP-NEO 的构建 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30页 |
| 3 PiggyBac 转座子在牛成纤维细胞中的转座效率和插入位点分析 | 第30-39页 |
| ·材料与方法 | 第30-33页 |
| ·细胞培养 | 第30-31页 |
| ·细胞转染和药物筛选 | 第31页 |
| ·考马斯亮蓝染色和计数 | 第31页 |
| ·统计学分析 | 第31页 |
| ·插入位点分析 | 第31-33页 |
| ·细胞基因组 DNA 的提取 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-38页 |
| ·引物设计 | 第33-34页 |
| ·添加转座酶与不添加转座酶的转染实验结果 | 第34-35页 |
| ·在牛成纤维细胞中转座子与转座酶的最佳比例实验结果 | 第35页 |
| ·Tail PCR 结果 | 第35-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 4 结论 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 作者简介 | 第44页 |
