| 前言 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| Abstract | 第9-20页 |
| 第1章 文献综述 | 第20-44页 |
| ·乳腺癌化疗耐药机制的研究进展 | 第20-32页 |
| ·多药耐药机制 | 第21-23页 |
| ·P-糖蛋白 | 第23-24页 |
| ·多药耐药蛋白 | 第24-25页 |
| ·乳腺癌耐药蛋白 | 第25页 |
| ·微管的改变 | 第25-26页 |
| ·酶的改变 | 第26-27页 |
| ·p53 肿瘤抑制基因和细胞周期 | 第27页 |
| ·DNA 修复过程中的改变 | 第27页 |
| ·细胞凋亡 | 第27-29页 |
| ·组织扩散与 MDR | 第29-30页 |
| ·肿瘤干细胞的细胞动力学与 MDR | 第30-31页 |
| ·肿瘤异质性与 MDR | 第31页 |
| ·宿主免疫应答与 MRD | 第31-32页 |
| ·克服肿瘤耐药的策略 | 第32-37页 |
| ·克服转运蛋白引起的 MDR | 第32-34页 |
| ·针对肿瘤抗细胞凋亡引起的 MDR | 第34页 |
| ·药物基因组学、蛋白组学和成像技术 | 第34-36页 |
| ·新型抗肿瘤药物及新靶点 | 第36-37页 |
| ·KU70 的研究进展 | 第37-44页 |
| ·Ku70 与 DNA 修复 | 第38-40页 |
| ·端粒维持 | 第40页 |
| ·Ku70 调控的 Bax 蛋白介导的细胞凋亡 | 第40-44页 |
| 第2章 材料与方法 | 第44-52页 |
| ·细胞 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44-45页 |
| ·RNA 提取及 PCR 相关试剂 | 第44页 |
| ·Western-blot 相关试剂 | 第44页 |
| ·细胞培养相关试剂 | 第44页 |
| ·细胞染色试剂 | 第44页 |
| ·SiRNA 试剂 | 第44-45页 |
| ·常用化学试剂全部为国产分析纯试剂 | 第45页 |
| ·试剂配制 | 第45-46页 |
| ·磷酸盐溶液（PBS）： | 第45页 |
| ·蛋白提取液(10ml) 按下表配制 | 第45页 |
| ·蛋白电泳缓冲液即 1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 | 第45-46页 |
| ·2 x SDS-PAGE loading buffer 按下表配制 | 第46页 |
| ·电转印缓冲液按下表配制 | 第46页 |
| ·抗体稀释液：含 0.05%Tween20 和 0.2% BSA 的 Tris-HCl （50mmol/L，pH7.5） | 第46页 |
| ·PVDF 膜封闭液：含 2% BSA 的 Tris-HC（l50mmol/L，pH7.5） | 第46页 |
| ·洗液：含 0.1% Tween-20 的 Tris-HCl（50mmol/L，pH7.5） | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46-47页 |
| ·主要方法 | 第47-52页 |
| ·细胞培养 | 第47-48页 |
| ·细胞分组 | 第48页 |
| ·转染方法 | 第48页 |
| ·MTS 试剂盒检测 MCF7、MCF7-ADR 细胞增殖活性 | 第48-49页 |
| ·总 RNA 提取 | 第49页 |
| ·RT-PCR 检测细胞 Ku70 mRNA 表达水平 | 第49页 |
| ·Western blot | 第49-50页 |
| ·荧光法检测 caspase-3 相对活性 | 第50页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第50页 |
| ·Hochest33258 染色检测细胞凋亡 | 第50-51页 |
| ·PCR-Array 基因芯片比较沉默 Ku70 前后 MCF7-ADR 细胞凋亡相关基因的表达变化 | 第51页 |
| ·统计学方法 | 第51-52页 |
| 第3章 结果 | 第52-64页 |
| ·耐表阿霉素乳腺癌细胞系 MCF7-ADR 细胞耐药性检测 | 第52-54页 |
| ·MTS 法检测 MCF7、MCF7-ADR 增殖活性差异 | 第52页 |
| ·倒置相差显微镜观察 MCF7、MCF7-ADR 细胞形态差异 | 第52-53页 |
| ·MCF7-ADR 对表阿霉素耐药性检测 | 第53-54页 |
| ·MCF7、MCF7-ADR 细胞 KU-70 MRNA 表达水平差异 | 第54-55页 |
| ·MCF7、MCF7-ADR 细胞 KU-70 蛋白表达水平差异 | 第55页 |
| ·MCF7-ADR 细胞转染 KU70 SIRNA 片段效果检测 | 第55-56页 |
| ·KU70 沉默对 MCF7-ADR 耐药性的影响 | 第56页 |
| ·KU70 沉默对 MCF7-ADR CASPASE-3 活性影响 | 第56-57页 |
| ·形态学比较 KU70 沉默前后对表阿霉素诱导凋亡敏感性变化 | 第57-61页 |
| ·光学显微镜观察表阿霉素对 MCF7、MCF7-ADR 细胞形态学影响 | 第57-59页 |
| ·Hochest-33258 染色观察沉默 Ku70 前后表阿霉素对MCF7-ADR 细胞核形态的影响 | 第59-61页 |
| ·流式细胞术比较 KU70 沉默前后 MCF7-ADR 对表阿霉素诱导凋亡敏感性变化 | 第61页 |
| ·PCR-ARRAY 检测 KU70 沉默对 MCF7-ADR 细胞凋亡相关基因表达的影响 | 第61-64页 |
| 第4章 讨论 | 第64-70页 |
| ·乳腺癌多药耐药机制 | 第64页 |
| ·KU70 与肿瘤耐药 | 第64-65页 |
| ·表阿霉素治疗乳腺癌作用机制 | 第65页 |
| ·KU70 与乳腺癌耐药发生的关系 | 第65页 |
| ·KU70 沉默逆转乳腺癌耐药性 | 第65-66页 |
| ·KU70 沉默逆转乳腺癌耐药性机制探讨 | 第66页 |
| ·KU70 沉默增加乳腺癌对化疗药物诱导凋亡敏感性的机制研究 | 第66-70页 |
| 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-88页 |
| 在学期间所取得的科研成果 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
