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旋毛虫p43与p53核酸疫苗的构建及免疫效果的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-17页
   ·旋毛虫及旋毛虫病第11页
   ·旋毛虫的排泄分泌抗原、p43 与 p53 的研究进展第11-13页
     ·排泄分泌抗原的研究进展第11-12页
     ·旋毛虫 p43 基因的研究进展第12-13页
     ·旋毛虫 p53 基因的研究进展第13页
   ·核酸疫苗及在旋毛虫中的应用第13-15页
     ·核酸疫苗的研究意义第13-14页
     ·核酸疫苗的优缺点第14页
     ·旋毛虫核酸疫苗的研究意义及进展第14-15页
   ·旋毛虫心肌损伤的研究第15页
   ·Toll 样受体第15-16页
   ·研究目的与意义第16-17页
2 材料和方法第17-27页
   ·材料第17-19页
     ·虫种第17页
     ·试验动物第17页
     ·主要试剂第17-18页
     ·主要试验仪器及设备第18页
     ·主要生物信息学软件第18-19页
   ·方法第19-27页
     ·目的基因的克隆第19-22页
     ·重组表达质粒的构建第22-23页
     ·核酸疫苗免疫保护性试验第23-25页
     ·应用 SYBR-Green 荧光定量方法检测小鼠肠上皮细胞 TLR2 及 TLR4 表达量变化情况第25-27页
3 结果第27-41页
   ·目的基因的克隆第27-34页
     ·旋毛虫总 RNA 提取结果第27页
     ·p43 与 p53 基因的 RT-PCR 扩增结果第27-28页
     ·重组质粒 pMD18T-p43 与 pMD18T-p53 的鉴定第28页
     ·pMD18T-p43 与 pMD18T-p53 的测序结果及序列分析第28-33页
     ·重组真核表达载体 pcDNA3.1-p43 与 pcDNA3.1-p53 的构建第33-34页
   ·核酸疫苗对小鼠的免疫效果第34-37页
     ·核酸疫苗对感染旋毛虫小鼠的免疫保护效果第34-35页
     ·抗体水平的检测第35页
     ·H-FABP ELISA 检测结果第35-36页
     ·流式细胞术检测 T 细胞亚类第36-37页
   ·荧光定量方法检测 TLR2 与 TLR4 的变化情况第37-41页
     ·GAPDH、TLR2 与 TLR4 的标准品第37-38页
     ·荧光定量 PCR 检测 TLR2 相对表达量结果第38-39页
     ·荧光定量 PCR 检测 TLR4 相对表达量结果第39-41页
4 讨论第41-45页
   ·p43 与 p53 基因的克隆与分析第41-42页
     ·p43 基因分析第41-42页
     ·p53 基因分析第42页
   ·核酸疫苗对小鼠免疫保护效果的分析第42-43页
   ·TLR2 与 TLR4 在小鼠小肠的表达变化情况的分析第43-45页
5 结论第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-50页
攻读学位期间发表学位论文第50页

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