| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 英文缩写表 | 第7-11页 |
| 前言 | 第11-20页 |
| 1. Eps8基因简介 | 第11-16页 |
| ·Eps8蛋白的结构 | 第11-12页 |
| ·Eps8蛋白的功能 | 第12-16页 |
| 2. ITSN2基因简介 | 第16-18页 |
| ·ITSN2蛋白的结构 | 第16-17页 |
| ·ITSN2蛋白的功能 | 第17-18页 |
| 3. 蛋白质的降解途径 | 第18-20页 |
| ·泛素-蛋白酶体途径 | 第18-19页 |
| ·溶酶体途径 | 第19-20页 |
| 第一部分 材料与方法 | 第20-35页 |
| 1. 实验材料 | 第20-25页 |
| ·菌种和细胞株 | 第20页 |
| ·载体和工具酶 | 第20页 |
| ·抗体 | 第20页 |
| ·试剂盒 | 第20-21页 |
| ·其它试剂 | 第21页 |
| ·所需溶液 | 第21-25页 |
| 2. 实验方法 | 第25-35页 |
| ·质粒构建 | 第25-26页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第26页 |
| ·细胞培养 | 第26-27页 |
| ·蛋白质印迹(Western blot) | 第27-28页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第28-30页 |
| ·细胞免疫荧光实验 | 第30-31页 |
| ·GST pull-down实验 | 第31-34页 |
| ·蛋白质的降解实验 | 第34-35页 |
| 第二部分 结果与分析 | 第35-46页 |
| 1. 通过酵母双杂交实验筛选Eps8的相互作用蛋白 | 第35页 |
| 2. Eps8和ITSN2蛋白的相互作用 | 第35-42页 |
| ·酵母双杂交实验证明Eps8和ITSN2的相互作用 | 第35-36页 |
| ·免疫共沉淀实验证明Eps8和ITSN2在体内相互作用 | 第36-38页 |
| ·细胞免疫荧光实验证明Eps8和ITSN2在细胞内共定位 | 第38-39页 |
| ·GST pull-down实验证明Esp8和ITSN2在体外相互作用 | 第39-42页 |
| 3. ITSN2促进Eps8蛋白的降解 | 第42-46页 |
| ·过表达ITSN2促进Eps8蛋白的降解 | 第42-44页 |
| ·ITSN2通过溶酶体途径促进Eps8蛋白的降解 | 第44-46页 |
| 第三部分 讨论 | 第46-50页 |
| 参考文献 | 第50-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
